A. 如何用沒食子酸標准曲線計算茶多酚含量,並計算出提取率
如何用沒食子酸標准曲線計算茶多酚含量,並計算出提取率?
定量測定方法.光度法———酒石酸亞鐵比色法.其測定原理是茶多酚類物質能與亞鐵離子形成紫藍色絡合物.用分光光度法測定其含量.
茶多酚標准溶液的配製稱取提取純品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混勻,即為每毫升含1mg提取純品的標准溶液(mg/mL) . 茶多酚的含量.茶多酚標准曲線的繪制.分別吸取茶多酚標准溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL 於4 個50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亞鐵溶液10mL,加入pH為7.5的磷酸緩沖液至刻度,混勻後用1㎝比色皿,以空白試劑作參比,於波長540nm處測定吸光度(A) ,繪制出標准曲線.
B. 茶多酚的提取工藝
從茶葉中制備茶多酚的傳統方法主要分為以下三類。 所用試劑應為分析純(AR),水為蒸餾水。
1酒石酸亞鐵溶液:稱取1g (准確至0.0001g)硫酸亞鐵和5g (准確至0.0001g)酒石酸鉀鈉,用水溶解並定容至1L(溶液應避光,低溫保存,有效期一個月)。
2 pH7.5磷酸鹽緩沖液:磷酸氫二鉀: 稱取23.377g磷酸氫二鉀,加水溶解後定容至1L。磷酸二氫鉀:稱取9.078g磷酸二氫鉀,加水溶解後定容至1L。取上述磷酸氫二鉀溶液85ml和磷酸二氫鉀溶液15ml混合均勻。 1 取樣按《茶 取樣》的規定取樣。
2 試樣的制備按《茶 磨碎試樣的制備及其干物質含量測定》的規定,制備試樣。
3 測定步驟 (1)試液的制備按《茶 水浸出物測定》中的規定,制備試液。 (2)測定準確吸取上述(1)試液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亞鐵溶液5mL,充分混合,再加pH7.5的緩沖液至刻度,用10mm比色杯,在波長540nm處,以試劑空白溶液作參比,測定吸光度(A)。 5、結果計算 計算方法和公式茶葉中茶多酚的含量,以干態質量百分率表示,按下式計算: 茶多酚(%)=(A×1.957×2)/100 × L1/(L2×M×m)式中: L1——試液的總量,mL; L2——測定時的用液量,mL; M——試樣的質量,g; m——試樣干物質含量百分率,%; A——試樣的吸光度; 1.957——用10mm比色杯,當吸光度等於0.50時,每毫升茶湯中含茶多酚相當於1.957mg。 如果符合重復性的要求,則取兩次測定的算術平均值作為結果。 重復性同一樣品的兩次測定值之差,每100g試樣不得超過0.5g。