① 求塗片免疫組化的具體步驟
112. 取0.13ml骨髓，使用塗有蛋白甘油的硅化玻片製作塗片，每片塗5-7張。同時，用EDTA抗凝的試管抽取2ml靜脈血進行流式細胞術(FCM)檢查。
113. 免疫組化試劑來源：採用福州邁新公司提供的即用型第二代免疫組化ElivisionTMplus廣譜試劑盒。
114. 免疫組化步驟：
① 石蠟塗片經過脫蠟和水化處理後，用PBS（pH7.14）沖洗3次，每次3分鍾。
② 根據不同抗體的要求，對組織抗原進行相應的修復。
③ 每張塗片加入50μl 3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10分鍾，以阻斷內源性過氧化物酶的活性。隨後用PBS沖洗3次，每次3分鍾。
④ 每張塗片根據需要加入50μl第一抗體（例如CD20、CD3、CD45RO、CD45RB、TdT、MPO、CD5、CD79、CD56、CD79a、CD43、CD5、CD10），室溫下孵育60分鍾。
⑤ 除去PBS液，每張塗片加入50μl聚合物（Polymer Enhancer），室溫下孵育20分鍾。之後用PBS沖洗3次，每次3分鍾。
⑥ 除去PBS液，每張塗片加入50μl酶標抗鼠/兔聚合物（Polymerized HRP-Anti Ms/Rb IgG），室溫下孵育30分鍾。再用PBS沖洗3次，每次3分鍾。
⑦ 除去PBS液，每張塗片加入50μl新鮮配製的DAB或AEC溶液，在顯微鏡下觀察3-10分鍾。
⑧ 用自來水沖洗，進行蘇木紫復染，用0.11%鹽酸分化，然後用自來水沖洗，並用PBS返藍。
⑨ 塗片經過梯度酒精脫水乾燥後，用DAE顯色，再用中性樹膠封固。