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麦氏比浊仪使用方法

发布时间:2022-05-11 13:14:55

A. 麦氏比浊仪怎么使用呢

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B. 麦氏比浊法

在临床微生物学检验中,麦氏比浊法常用于细菌鉴定、药敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.5×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。但是,标准比浊管的浓度,是药敏实验结果的影响因素之一。
K-B法药敏试验时接种物配制有两种方法,第一种是肉汤增菌法(对数生长法),是用接环挑取3-5个细菌菌落入肉汤增菌管中进行增菌4-6小时,然后用生理盐水或肉汤对增菌管中的培养物进行稀释校正使其浓度达到0.5麦氏比浊标准(因为经过增菌培养其培养物浓度一般都高于此标准)。第二种方法是直接菌落法:从孵育18-24小时的非选择性培养基上,挑取3-5菌落,直接用肉汤或盐制成悬液作为接种,然后将浊度调整至0.5麦氏比浊标准。此法是检测苛养菌(如嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌)和潜在的对甲氧西林耐药的葡萄球菌的推荐方法。
0.5麦氏比浊管配制方法:
0.048M
BaCL2
(1.17%
W/V
BaCL2
.
2H2O)
0.5ml
0.36N
H2SO4
(1%,
V/V)
99.5ml
将二液混合,置螺口试管中,放室温暗处保存。用前混匀。有效期为6个月。
应用时,可目测或使用比浊仪即可。
http://www.cjic.com.cn/bbs/dispbbs.asp?boardid=8&id=84
先弄清原理,再分析就知道了

C. 的麦氏浊度到底是个什么概念

麦氏浊度法是一种比较粗略的方法,常用于目测比较菌液浓度。例如,药敏实验中常用一个标准的0.5麦氏浊度管(有市售,如杭州天和微生物试剂公司有售,也可自己用BaSO4配制)和你培养的菌液在单纯背景光下比较,大致估计培养菌液的浓度。
一般实验室有分光光度计即可以测细菌浊度了,根据美国CLSI(以前称NCCLS)推荐的方法,将菌液调整至OD625值在0.08-0.13之间就相当于0.5麦氏浊度了。希望这个回答对你有帮助

D. 做微生物抑菌实验时,其中有一步骤是制备菌悬液,我稀释菌液10倍,100倍,1000倍等浓度梯度

做药敏试验所需菌悬液的浓度是0.5个麦氏比浊度。
而这个浓度并不是通过血球计数板获得的,而是通过麦氏比浊管肉眼观或者比浊仪比出来的。0.5个麦氏比浊度大概就是淡淡的一点浑浊,这样描述可能你体会不出来,如果你亲自见过一套麦氏比浊管就看出来了。有点误差没有关系的。

0.5个麦氏比浊度含菌量大约是1.5*10的8次方/ml。
可以用0.5ml的1.175%氯化钡和99.5ml的1%硫酸混匀配成0.5的麦氏比浊管。

E. 如何用比浊法调细菌OD值

在临床微生物学检验中,麦氏比浊法常用于细菌鉴定、敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.5×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,。

F. 请问麦氏比浊管配制方法

附件3 药敏试验
药敏试验根据美国临床标准委员会(NCCLS)推荐的K-B琼脂法进行,药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片,试验所选择药物必须包括下列抗生素:氨苄西林(AMP),阿莫西林/克拉维酸(AMC),头孢噻吩(CFT),头孢噻肟(CTX),庆大霉素(GEN),萘啶酸(NAL),环丙沙星(CIP),四环素(TBT),利福平(RFA),复方新诺明(SMZ)。药敏结果判定标准按照NCCLs手册2005版。
1. 操作方法:
(1)将待检菌接种于普通营养琼脂平板,37℃培养16~18小时,然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落,悬于3ml生理盐水中,混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景,调整浊度与比浊管(0.5麦氏单位)相同。
(2)用无菌棉拭子蘸取菌液,在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面,反复几次,每次将平板旋转60度,最后沿周边绕两圈,保证涂均匀。
(3)待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面,纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片,每张纸片间距不少于24mm,纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。
(4)将平板反转,孵育18~24小时后取出,用游标卡尺测量抑菌圈直径,从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录(附表6)。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长,进入抑菌环,磺胺药在抑菌环内出现轻微生长,这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。
(5)每次药敏试验必须用ATCC 25922大肠杆菌做质控。只有当质控菌株的抑菌圈直径在允许范围内测试菌株的结果才可以报告。ATCC 25922的结果必须与测试菌株同时记录和报告在附表6中。
0.5麦氏比浊管配制方法:
0.048M BaCL2 (1.17% W/V BaCL2 . 2H2O) 0.5ml
0.36N H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml
将二液混合,置螺口试管中,放室温暗处保存。用前混匀。有效期为6个月。

2. 注意事项:
(1) 制备MH琼脂平板应用直径90mm平皿,在水平的实验台上倾注。琼脂厚为4±0.5mm(约25-30ml培养基),琼脂凝固后塑料包装放4℃保存,在5日内用完,使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。倾注平皿前应用pH计测pH值是否正确(pH应为7.3)。pH过低会导致氨基糖苷类,大环内酯类失效,而青霉素活力增强。
(2) 药敏纸片长期储存应于-20℃,日常使用的小量纸片可放在4℃,但应至于含干燥剂的密封容器内。使用时从低温取出后,放置平衡到室温后才可打开,用完后应立即将纸片放回冰箱内的密封容器内。 过期纸片不能使用, 应弃去。
(3) 不稳定药物如亚胺培南, 头孢克洛, 克拉维酸复合药等, 应冷冻保存, 最好在-40 ℃以下。
(4) 保证质控菌株不变异的简便方法,将新得到的冻干菌株接种含血的M-H平板复活。然后每株细菌接种10支高层琼脂管,放置冰箱保存。每月取出一支,传出细菌供常规用。待用剩至最后一支,可传种在M-H平板上,再接种一批高层琼脂管备用。如此可保证原始菌种永不接触抗菌素。
3.质量控制
质量控制方法 是用与常规实验相同的操作方法,测定质控菌株的抑菌环。应使用新鲜传代的菌种。接种菌液的涂布方法等均同常规操作,测定的抗菌素种类也应与常规测定的种类相同。

G. 麦氏标准比浊法原理是什么怎么做

麦氏标准比浊法的原理是:麦氏比浊法又称Mcforland比浊法,它是根据细菌溶于水中存在一定的混浊度来测定细菌的浓度,是一种比较简单粗列的计算细菌浓度的方法。一般Mcforland比浊法有5个标准管,分别代表不同的浓度,我们可以用肉眼来比较你所测的细菌管和哪个标准管浊度相似,即可判定浓度。另外,也可用分光光度计来和标准管来比较,而算出你的浓度。

操作方法:

  1. 轻摇标准试管。

  2. 无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

  3. 以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

H. 麦氏比浊仪 酶标仪 哪个更精确 细菌

这两个仪器是完全不同的,麦式比浊仪是测量一定范围内的细菌悬液的麦氏比浊度,并不能反映是什么细菌或细菌的精确数量有多少。酶标仪一般是对抗原抗体进行半定量的检查。所以两者之间并没有可比性,它们的应用范围也是不同的。

I. 麦氏浊度单位(MCF)到底是个什么概念

个人理解的概念:
0.048mol/L(1.175%)氯化钡0.5ml加0.18mol/L(1%)硫酸溶液99.5ml,混合后用530nm波长比色调整其浊度,使吸收值为0.1。该浊度为0.5麦氏比浊标准(Mcfarland Standard),相当于5*10的7~8次方CFU/ml的含菌量。

以下内容为引自阳光检验网的一位朋友:

麦氏浊度标准(0.5号)

(1) 将0.5mL 0.048mol/L的BaCL2 (1.175%w/v BaCL2·2H2O)加到99.5mL 0.18mol/L (0.36N)的H2SO4(1%v/v)中并不断搅动以维持混悬状态。

(2) 按每管4-6mL将硫酸钡悬液分装于带悬盖的管子中,管子尺寸应与培养或稀释接种菌所用的管子一致。

(3) 这些管子应密封并贮存于室温避光处。

(4) 每次使用前,应将浊度标准管置于旋转混匀器上剧烈振动,目测其外观浊度应均匀一致。若有大颗粒出现,此标准管应更换。

(5) 使用前核实其正确浓度,每个月都应证实或更换。浊度标准的正确浓度应使用分光光度计测定吸光度核实。该分光光度计光径为1cm,并配有合适的比色杯。0.5号麦氏标准管在625nm处的吸光度值应为0.08-0.10。
你说的仪器分两个量程,可参照下表:

J. 麦氏比浊法

在临床微生物学检验中,麦氏比浊法常用于细菌鉴定、药敏实验前配置菌液时大致判断菌液浓度的一种方法,通常认为,如将配菌液浓度配成0.5麦氏比浊管时,相当于1.5×108细菌数/ml,由于方法本身就是一种估计的方法,所以尽管不同细菌大小差异很大,除了真菌孢子,细菌的差别不大,结果不会有影响。但是,标准比浊管的浓度,是药敏实验结果的影响因素之一。
K-B法药敏试验时接种物配制有两种方法,第一种是肉汤增菌法(对数生长法),是用接环挑取3-5个细菌菌落入肉汤增菌管中进行增菌4-6小时,然后用生理盐水或肉汤对增菌管中的培养物进行稀释校正使其浓度达到0.5麦氏比浊标准(因为经过增菌培养其培养物浓度一般都高于此标准)。第二种方法是直接菌落法:从孵育18-24小时的非选择性培养基上,挑取3-5菌落,直接用肉汤或盐制成悬液作为接种,然后将浊度调整至0.5麦氏比浊标准。此法是检测苛养菌(如嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌)和潜在的对甲氧西林耐药的葡萄球菌的推荐方法。

0.5麦氏比浊管配制方法:
0.048M BaCL2 (1.17% W/V BaCL2 . 2H2O) 0.5ml
0.36N H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml
将二液混合,置螺口试管中,放室温暗处保存。用前混匀。有效期为6个月。
应用时,可目测或使用比浊仪即可。

http://www.cjic.com.cn/bbs/dispbbs.asp?boardid=8&id=84

先弄清原理,再分析就知道了

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