通常用什么方法对提取物进行鉴定

‘壹’ .为什么药典里面蕲蛇用特异性PCR法而川贝母用PCR-RFLP法作为辨别方法。是否川

1. 蕲蛇的辨别方法采用特异性PCR法，这是因为蕲蛇是动物，其DNA结构相对简单，通过特异性PCR扩增和电泳检测，可以快速准确地鉴别蕲蛇及其提取物的真伪。
2. 这种方法不仅适用于蕲蛇的干燥体，还适用于蕲蛇药材的不同提取物形式，以及在中成药中的使用情况。即使在极端的加工条件下，如高温、高压、长时间的处理，蕲蛇提取物的真实性鉴定也依然有效。
3. 对于川贝母，由于其与某些混淆品的外观相似，单凭性状鉴别难以做出客观准确的判断。因此，《中华人民共和国药典》自2010年版第一增补本起，采用了PCR-RFLP法来辅助鉴别川贝母。
4. PCR-RFLP法在川贝母的鉴别中显示出高灵敏度，即使掺伪比例达到5%，也能被该方法检测出来。这种方法能够有效地检测川贝母中是否掺杂了其他非川贝母的成分，确保了药材的纯度和质量。

‘贰’ 甘草提取物鉴别

甘草提取物的鉴别特征如下：

1. 横切面观察：木栓层由数排棕色细胞组成，皮层较薄。韧皮部射线宽广且弯曲，常出现裂隙；纤维束非木化或微木化，周围细胞内可见草酸钙方晶；筛管群可能因压力而变形。束内形成层清晰可见，木质部射线宽约3至5列细胞，导管众多，直径可达160微米；木纤维成束，同样有草酸钙方晶的存在。根部无髓，根茎中心则有髓质。粉末为淡棕黄色，纤维束直径8至14微米，壁厚且微木化，晶纤维常见，草酸钙方晶较多。导管以具缘纹孔为主，少量网纹导管可见。木栓细胞呈红棕色，多角形，微木化。

2. 鉴定方法：取1克粉末，先用乙醚回流1小时后过滤，药渣再用甲醇处理，经过一系列步骤提取后，制成供试品溶液。对照药材和甘草酸铵对照品同样处理，制成对照药材溶液和对照品溶液。采用薄层色谱法，分别取三种溶液1至2微升，点在硅胶G薄层板上，展开后用特定溶剂显色并置于紫外光灯下观察。结果显示，供试品色谱在对照药材对应位置显相同颜色的荧光斑点，与对照品色谱对应位置则显橙黄色荧光斑点，表明其与标准甘草提取物具有相似的色谱特征。

甘草提取物，是从甘草中提取的有药用价值的成份。甘草提取物一般包含：甘草甜素、甘草酸，甘草甙、甘草类黄酮、后幕比檀素、刺芒柄花素、槲皮素等。为黄色至棕黄色粉末。有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的功效。用于治疗脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛等病症。

‘叁’ 怎么区分精油的纯度

1、 闻味道--精油气味是否正确。

100%的纯精油，打开瓶盖，初闻的味道都会比较重、比较刺激、不好闻、味道比较复杂等。将浓度稀释到5度以下，味道就会温和好闻很多。

2、看颜色--精油的色泽是否正确。

例如：100%纯度的精油，是无色或略浅黄色、不“粘稠”感觉“很稀”的水样液体。凡感觉“浓稠”、“发粘”的精油，绝非纯精油！

3、滴水实验：滴水中1－3滴，出现有明显大颗大团油粒（与家用菜籽油或者花生油类似的大颗油粒）的精油为勾兑精油非纯品，纯精油是小分子活跃精油，滴水反应会迅速扩散，表面有一小层分散开的亮点，即呈现油晕状态，不会成团凝聚在一起的。

(3)通常用什么方法对提取物进行鉴定扩展阅读：

精油的使用方法

1、香熏炉熏香法

把清水倒进香熏炉的盛水器中，加入5-6滴精油。燃点蜡烛放置在香熏炉内，待热力使水中精华油徐徐释放出来。调配不同的精油滴入香熏炉中，便可得到不同的效果，有助于制造不同的气氛。

2、居家吸入法

把近沸的热水注入玻璃或瓷质的脸盆中，选择1-3种精油滴于热水里，总数不超过六滴，将精油充分搅匀后。以大浴巾将整个头部及脸盆覆盖，用口、鼻交替呼吸，维持5-10分钟。薰衣草2滴＋薄荷2滴可治疗感冒。

3、香薰漱口法

将2-3滴精油滴入一杯水中搅匀，嗽喉10秒钟，然后吐出，重复至整杯水用完，每天香薰漱口，可保持口气清新，保护牙齿，减少喉炎。常用精油：茶树，薰衣草，薄荷。牙痛时，把肉桂一滴，不需稀释，直接用棉签点在牙痛部位，即可缓解牙痛。

‘肆’ 如何鉴定肉桂提取物中的化学成分

肉桂，原名菌桂、牡桂，是樟科（Lauraceae）植物樟属（Cin-namomum）肉桂（CinnamomumcassiaPresl）的干燥树皮，是全世界最重要、最流行的香料之一，且为常用中药。肉桂的嫩枝（桂枝）、幼嫩果实（桂丁）、叶均可供药用。肉桂中主要含有挥发油、二萜及其糖苷、黄烷醇及其多聚体，此外还含有黄酮类、多酚类等化合物，其中最重要的活性成分是肉桂醛（Cinnamal-dehyde），以反式结构的形式存在于肉桂挥发油中。肉桂中的肉桂醛等成分具有多种药理活性，如抗氧化、抗炎、降血糖、抗心血管疾病、抗癌等。近年来，国内外学者对肉桂提取物的主要化学成分及药理活性进行了广泛而深入的研究，本文对PubMed数据库、谷歌学术及Elsevier电子期刊全文数据库中1980－2014年发表的相关研究文献进行系统完整地检索和综述，旨在为肉桂提取物的深入开发提供参考。

1化学成分
GengS等从不同的肉桂挥发油中分离鉴定出41种不同成分，包括肉桂醛、肉桂酸、肉桂醇乙酸酯等，其组成比例主要取决于肉桂的生长阶段和产地。TungYT等[7]从土肉桂的嫩枝中提取不同蒸馏时段的挥发油，并利用气相色谱-质谱联用（GC-MS）法进行分析，其主要成分包括丁香酚、石竹烯氧化物、β-石竹烯、γ-桉叶油醇、δ-荜澄茄油烯、δ-杜松醇、L-冰片、E-橙花叔醇等。梁忠云等[8]从肉桂皮挥发油中鉴定出21个组分，包括咕吧烯（Copaene）、反式-肉桂醛、α-依兰油烯等。

药理活性
抗氧化
肉桂中的抗氧化化合物在延缓和防止食物变质中发挥着越来越重要的作用，而且该类化合物对因年老引起的自由基损伤和代谢类疾病综合征等都具有明显的抑制作用[9]。肉桂提取物的化学成分多为高极性化合物，采用乙醇提取法制备的提取物比超临界流体技术具有更高的抗氧化活性。Shoba-naS等[10]报道，肉桂的乙醚、水以及甲醇提取物具有较强的抗氧化活性，能够在体外显着抑制脂肪酸的氧化和脂质的过氧化反应。AravindR等[11]的初步研究表明，肉桂叶各类提取物（如正己烷、乙醇、水提取物）中都含有酚类化合物，且该类化合物具有潜在的抗过氧化氢、一氧化氮和脂质过氧化自由基的作用。DongY等[12]研究发现，肉桂提取物的主要抗氧化活性成分为E-肉桂醛，其在肉桂叶中含量高达72％。此外，肉桂提取物作为一种酪氨酸酶活性抑制剂能够抑制色素沉着、褐变等，在食品、化妆品以及药品中均发挥着重要的作用。

2.2抗炎
肉桂植物的抗炎活性于1987年被首次报道。迄今为止，已有来自不同部位的多种肉桂提取物被发现具有明显的抗炎活性，其抗炎机制也各有不同。LeeSH等[14]从肉桂皮中提取出的2′-羟基肉桂醛是一种较好的消炎剂，其抗炎机制主要是通过抑制核因子NF-κB的激活来降低一氧化氮的生成。YuT等[15]认为，肉桂乙醇提取物主要通过抑制Src/Syk-酪氨酸酶介导的NF-κB的活性来发挥其抗炎活性。同时，有研究指出，多种肉桂提取物可通过抑制中枢神经系统中诱导型一氧化氮（iNO）、环氧化酶2（COX-2）的合成发挥其抗炎活性。由此提示，肉桂提取物可成为炎症介导的神经变性疾病的预防与治疗的潜在新型化合物[16]。此外，肉桂水提物可通过降低人血浆中脂多糖诱导的肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达来发挥抗炎机制。

2.3降血糖
肉桂提取物对2型糖尿病的治疗作用越来越引起人们的关注，并被誉为“胰岛素强化因子”（IPF），其水提物的胰岛素增效作用比其他香料高约20倍。

据报道，肉桂水提物中的多酚类化合物在体外和体内均能增强胰岛素的生物活性，而且分离纯化的肉桂多酚A型聚合物还可作为胰岛素样分子提高体内葡萄糖的代谢。KimSH等[21]对肉桂多酚A型聚合物进行结构改造，得到一种新型羟基肉桂酸衍生物萘甲基酯，对C57BL/Ksdb/db型糖尿病小鼠给药12周后，小鼠的血糖水平和脂质过氧化反应均可明显降低。CaoH等用高效液相色谱（HPLC）法对多酚类化合物进行纯化得到一系列化合物，包括芦丁（9.0672％）、儿茶素（1.9％）、槲皮素（0.172％）、山柰酚（0.016％）、异鼠李素（0.103％）等，这些化合物均具有胰岛素样活性，能够参与胰岛素受体信号转导和葡萄糖转运蛋白的生成。

ZhengH等提取出了一系列的肉桂挥发油成分，该类成分能靶向激活核因子E2相关因子2（Nrf2），改善糖尿病肾病引起的代谢紊乱，保护肾功能。另有研究显示，肉桂提取物能竞争性抑制哺乳动物α-葡萄糖苷酶的活性，降低餐后高血糖，从而使整体血糖趋于平稳，这与阿卡波糖的降糖作用相似。

2.4抗心血管疾病

现代药理学研究表明，肉桂能够增加冠脉血流量，改善冠脉循环和心肌营养状况，故常用于冠心病、心律失常、风心病等心血管疾病的预防与治。

据报道，肉桂挥发油中的主要成分肉桂醛、肉桂酸等均能够保护模型大鼠伴发缺血性心肌损伤，这与二者减少一氧化氮的生成、抗炎、抗氧化的活性有关。HwaJS等[27]从肉桂中分离提取出化合物2-甲氧基肉桂醛（2-MCA），并利用成年大鼠缺血再灌注模型证实该化合物能减少TNF-α活化的内皮细胞中血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达以及诱导血红素氧合酶1（HO-1）生成来改善局部缺血/再灌注（I/R）损伤。XueYL等[28]研究表明，肉桂醛能够扩张内皮非依赖性大鼠血管平滑肌的舒张，这与其能够阻滞Ca+通道有关。

此外，肉桂提取物对心血管的保护作用研究较多的是一种木脂素类化合物Cinnamophilin。该化合物是一种新型的血栓素A2受体拮抗药（TXA2）和潜在的血栓素合成酶抑制剂，能够抑制血栓素受体介导的血管平滑肌细胞的增殖，对预防血管疾病和治疗动脉粥样硬化具有潜在作用。

2.5抗癌

近年来，水溶性聚合物肉桂多酚类化合物的抗肿瘤作用日益引起关注。SchoeneNW等研究发现，肉桂总多酚能抑制急性淋巴性白血病细胞的增殖，其可能机制是通过调节p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和细胞周期蛋白B1两种信号蛋白，破坏细胞周期G2/M期中磷酸化/去磷酸化作用，阻碍细胞周期G2/M期的进程。AssadollahiV等[32]研究发现，肉桂水提取物能抑制急性髓系白血病细胞HL-60的增殖，并且呈现剂量和时间依赖性，这与其能阻滞细胞周期于G1期有关。

此外，肉桂醛在体内外对多种肿瘤细胞也具有明显的杀伤、抑制或细胞毒作用。KingAA等研究发现，用最小浓度（0.5～2.5mmol/L）的肉桂醛体外作用于结肠癌HCT细胞4～6h即可以明显诱导肿瘤细胞DNA损伤发生，抑制其DNA修复重组，减少自发性突变的发生。给予雄性转基因小鼠CB6F1-TgHras2（rasH2）5000ppm肉桂醛26周后发现，甲基盐硝氨基吡啶（NNK）诱发的肺癌发生率以及肿瘤的基因多态性均明显降低。CabelloCM等[35]研究发现，反式-肉桂醛是一种亲电的迈克尔反应受体分子，其在低浓度时能够抑制黑色素瘤细胞的增殖，且对荷黑色素瘤的SCID小鼠（T、B淋巴细胞缺陷型）模型也表现出明显的治疗作用。

2.6其他

肉桂提取物除了上述药理活性之外，还具有止咳、治疗神经系统疾病以及抑制晚期糖基化终末产物（Advancedglycationendprocts，AGEs）形成等活性[衰老、阿尔茨海默病（Alzheimerdisease，AD）及动脉粥样硬化的发生、发展跟体内AGEs的慢性蓄积有着密切的关系]。

侯仙明等[36]利用小鼠哮喘模型观察肉桂的镇咳、平喘机制，发现肉桂能够通过显着降低小鼠血清中的白细胞介素2和5（IL-2、5）的含量，减少内皮素（ET）的分泌，以及抑制内源性一氧化氮和IL-5的分泌等，达到舒张支气管和减轻炎症反应的作用。

AD是一种中枢神经系统退行性疾病，AD老年斑的核心成分是β-淀粉样蛋白多肽聚合物（Aβ）。Frydman-MaromA等[37]从肉桂皮中提取出一种天然化合物CEppt，该化合物能够显着减少毒性Aβ聚合物的形成与沉淀，且在体外能有效抑制神经嗜铬细胞瘤（PC12）细胞的活性。对AD转基因小鼠口服100μg/mlCEppt化合物4个月后，发现小鼠脑内56KDaAβ聚年第合物水平明显降低，其认知行为也发生了明显的改善。

从肉桂中提取分离的酚类化合物，如表儿茶素、儿茶酸和原花青素B2等能够显着抑制AGEs的形成。而AGEs与单核细胞表面特异性受体结合可产生一系列的病理学作用，导致慢性肾衰竭患者远期并发症如心血管病变、动脉粥样硬化及透析相关性淀粉样变的发生和发展。

3结语
综上所述，肉桂提取物中含有丰富的化学成分并具有多种药理活性，其中肉桂醛类、酚类等是肉桂提取物中发挥药理活性的主要有效成分，这对于揭示肉桂提取物的药效物质基础提供了有力的依据，也为相关多活性新药的研发奠定了基础。但是，对具有多种生理活性的肉桂提取物的分离提取率的提高及药理活性的分子机制的揭示尚需更进一步的研究。