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疟原虫血检测操作方法

发布时间:2023-01-09 06:59:45

Ⅰ 血涂片染色检查原虫的方法和步骤

方法和步骤如下:
一、玻片清洁
玻片清洁。清洁的玻片无油脂,无划痕,无灰尘,玻片
上有油迹,使厚血膜容易脱落,薄血膜涂布不均匀。在用手
指持玻片时,只能夹持玻片的两侧边缘,不要接触玻片的表
面以避免手指上的油污染污玻片。
1.新的载玻片先用热肥皂水洗涤,再用清水冲洗,然后
用软而洁净的毛巾擦干待用。
2.使用过的载玻片的清洁方法有两种:
①5%的肥皂水煮沸法
将洗衣肥皂削成小片,加水配成约5%的肥皂 水,煮沸
后将玻片一张一张地平放进肥皂水内,微火煮约一刻钟,然
后灭火待肥皂水稍冷后,用清洁干毛巾擦净后待用。
②清洁液浸泡法清洁液配制如下
重铬酸钾 80g
浓硫酸 100ml
水(清净水)1000ml
配制时须先将重铬酸钾研细放入水中,慢慢加温到全部
溶解为止,然后缓缓加入浓硫酸,待溶液冷却后倒入有盖的
大口玻璃缸内。清洁玻片时,将待洗的玻片逐张放入清洁中
浸泡一两天后,取出清水冲洗至完全没有黄色为止。浸泡前
最好用二甲笨除去镜油,清洁液颜色变为墨绿色后即失去清
洁作用,不能再用。
二、制片
1.薄血膜涂制
(1)先用75%酒精棉球将耳垂消毒,待酒精干后用采血针
迅速刺入耳垂近下端边缘处。
(2)用左手的拇指与食指以及右手的中指向相对的方向
将耳垂轻轻挤压出血。
(3)取一张洁净的载玻片,将它的左1/3的表面接触耳垂
上的血滴不要将玻片接触耳垂上的皮肤,使一小滴血在
玻片上。血量1-1.5mm
3
.1/4.火柴头大小。
(4)将推片臵于血溶之前与血液相接触,待血液沿推片边
缘展开后,将推片与载玻片保持30角度,用力均匀迅速将
推片由右向左推出而制成薄血膜。涂制得较好的薄血膜只有
一层血球,血球的分布排列比较均匀,血膜的末端突出如舌
状。
若取的血滴太大,则涂制的血膜太宽太厚,若推时用力
不均匀,则易成梯田状
若用力太大,则血膜两端过厚,若涂片上有油污,则血
膜成多孔状。
2.厚血膜涂制,薄血膜涂好后,再轻挤耳垂挤出约火柴
头大一血滴,将这一滴血滴在玻片的中心1/3处然后用推片
的一角由血滴中央向周围旋转涂成直径约一厘米的圆形血
膜,旋转涂制时间不宜过短,以免形成纤维蛋白束,遮盖了
疟原虫。
厚血薄涂好后,应平放待干,防苍蝇舔食血膜或灰尘落
在上面。受检者的编号可用铅笔或钢笔写在薄血膜的边缘
上,也可用蜡笔写在厚血膜一端。
三、染色
常用的染色方法有姬姆萨氏和瑞氏两种
(一)吉氏染色法,吉氏染剂是最可靠的血膜染剂其优
点是易于掌握很少染色过度,染好后的血膜褪色较慢
1.吉氏染剂的配制
吉氏染剂粉 0.5g
甘油,中性,25ml
甲醇,纯,分析纯,25ml
将吉氏染剂粉0.5臵于乳钵中,加少许甘油充分研磨
再加甘油研磨,直至25甘油加完为止。将充分研磨的吉氏
甘油液倒入无水,干净的棕色玻塞瓶中,然后分次加甲醇于
乳钵洗出染剂倒入瓶中,直至25甲醇将乳钵洗净并全部倒
入瓶中,塞紧,充分摇匀,放臵室内一星期,每天摇动数次
以后即可使用.
2.缓冲液的配制;
为了保证染色良好,使疟原虫的核和胞浆红兰分明,感
染的红血球上的薛氏小点清楚,在稀释染剂厚液时所用的
蒸馏水必须加缓冲液,缓冲蒸馏水。新鲜蒸馏水可能接近
中性,但贮存在一个时期后,由于吸收了空气中的 而变为
酸性,因此蒸馏水中必须加缓冲液,使其达到我们需要的效
果。
缓冲液配制
磷酸氢二钠,无水 9.5g
蒸馏水 1000ml
磷酸二氢钾 9.07g
蒸馏水 1000ml
将上二液分别贮存于紧塞的玻瓶中。
稀释染剂所用的蒸馏水的ph以7.0-7.2为最适宜现
用现配可按下表配制缓冲蒸馏水的配制(ml)
ph 磷酸二氢钠液 磷酸二氢钾液 蒸馏水
6.6 37 63 900
6.8 49 51 900
7.0 63 37 900
7.2 73 27 900

Ⅱ 查找疟原虫的血涂片的制作方法

常用姬氏染液,也可化学试剂部或检验试剂部购买使用液。配方:姬氏染粉 0.5g 甲醇AR 33.0ml 纯甘油 33.0ml先将染料置于甘油中60°C水浴2小时,使其溶解,然后加入60°C预热的甲醇,混合后置棕色瓶中,室温放置数天使用。染色方法:1)干燥血涂片用甲醇固定3~5分钟 2)滴加稀释10倍染液(用磷酸盐缓冲液或蒸馏水稀释)染色10~30分钟3)水洗,干后镜检

Ⅲ 疟原虫血图片怎么制作(详细步骤)

疟原虫的血涂片分厚薄涂片两种,吉姆萨染色后直接镜检疟原虫。厚血片先行溶血后检查,可使受检量增多10倍,但无确定其与红细胞的关系,最好与薄血片同时参照检查。恶性疟的诊断以查见配子体最具特征,但其发育缓慢,早期常不易查见。而较晚期出现大量疟原虫血症,又使大量含疟原虫的红细胞粘附聚集于内脏微血管,难于在外周血中查见,镜检时应格外仔细,并需一定的经验的检查者。

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