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狂犬病抗体胶体检测方法

发布时间:2022-12-12 13:34:16

‘壹’ 如何验狂犬抗体

您好,根据卫生部《狂犬病防治工作规范》的22条规定:“使用合格的、正规途径获得的疫苗全程免疫后,一般情况下无需对免疫效果进行检测。”狂苗在正常情况下的阳转率是100%,无需检测抗体的。如果被免疫者一定要检测,根据上述22条的规定必须使用中和抗体的检测方法,包括RFFIT法和MNT法,这俩个方法不是什么地方都可以开展的而且多数不对个人。于是现在有的医疗机构采用ELISA法试剂盒来检测狂犬病毒抗体,虽然不是检测中和抗体的方法,但是也可以选择。您请咨询当地的疾控部门或传染病医院,可能有开展这方面检测的。

‘贰’ 怎么查狂犬疫苗抗体是抽血还是....

是抽血,因为狂犬病抗体是在血清中的。

‘叁’ 防疫站说没有狂犬疫苗抗体检测,还说全中国都没有,医生来解答

根据《狂犬病预防控制技术指南(2016 版)》
(五)疫苗的血清学效果评价
WHO 仅推荐小鼠脑内中和试验和荧光灶抑制试验 (RFFIT)检测中和抗体,两种方法均可以正确评价疫苗免疫后的中和抗体水平,WHO 认为免疫后血清中的病毒中和抗体≥0.5IU/ml 即达到有效保护水平.
由于这两个测定是要用到活病毒的,所以一般的CDC没有条件做,国内有几个机构可以做的,想做可以给你推荐。

‘肆’ 关于狂犬疫苗的抗体检测!

楼主:

不要太紧张了,放心吧,你不会发生狂犬病的了;

1、目前的狂犬病疫苗效果很好,只要按照程序接种完成5针以上的疫苗,抗体阳性率就能达到100%,也就是说能预防狂犬病,没有必要非去做检测;

2、目前的狂犬病抗体检测和家用的试剂都不一样,也就是说临床上抗体的检测准确度不是很好,也只能做参考;

3、如果抗体不高,可以继续加强接种1-2针(间隔15天);

4、只要狂犬病疫苗接种完成后没有发病,就不会发病了;你经检测已经阳性(+),你可以绝对放心了,你描述的症状也不是狂犬病症状。

祝你健康!

‘伍’ 有没有什么小方法,可以检测出自己是否得了狂犬病

问题分析:
您好,被犬类以及一些温血动物咬伤后是容易感染狂犬病毒的,而狂犬病毒的潜伏期从几周到数年甚至几十年不等,此时可以通过一些方法来检测是否有狂犬病。

意见建议:
最常用的方法就是进行下抽血的狂犬病毒DNA抗体的检查,此时就可以明确是否发生一些感染的,这个检查通常是需要到当地的大一些的医院才可以的。

‘陆’ 狂犬病的病毒和抗体检测及治疗方法

十 年 过 去 了

已 经 不 可 能 了

不 过 为 了 保 险

我 建 议 你 去 医 院 再 打 次 疫 苗

‘柒’ 请教你关于狂犬抗体检测RFFIT的知识

1995年6月,法国巴斯德研究所狂犬病研究室前主任蒋安立(HerryTsiang)博士专程访问本所,进行学术交流。双方达成在狂犬病毒研究方面进行全面合作的意向。蒋安立博士最早明确提出在中国要解决狂犬病的防治问题,首先要解决的问题之一就是要建立狂犬病检测中心
1996年2月,受蒋安立博士之邀,我室的严家新研究员去法国巴斯德研究院学习狂犬病毒抗原和抗体的检测技术,带回了蒋安立博士赠予的许多资料和实验材料。
1996年3月,蒋安立博士再次专程访问我所。此后十余年里,蒋安立博士每年都要访问中国;其接班人Bourhy博士也多次访问中国,与我所共同开展狂犬病毒的分子流行病学及相关诊断试剂的研究,协助我所建立符合WHO标准的狂犬病检测中心,共同培养博士研究生,共同向欧共体等机构申请科研课题经费等。
该论文的结果再次证明RFFIT的重复性、特异性和灵敏度都不低于MNT(小鼠中和试验),同时具有更加快速、价廉、简便等优点,在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可取代MNT。
1998年10月,由PRA(中法先进研究计划)支持、由蒋安立和Bourhy博士发起并组织的中法狂犬病诊断和控制培训班成功地在中国CDC传染病所(北京)举办(唐青主持)。我所的严家新和徐葛林参加了这次培训班。
本室产品曾四次送到法国巴斯德研究所WHO狂犬病参考与合作中心试用,结果特异性和敏感性都优于国外同类产品。在国内数次全国性狂犬病研讨会和学习班上,我们建立的方法和制备的试剂都获得了好评,在与国外试剂的大量现场对比试验中都证明效果相同或更好,而成本则大幅度降低。多年来,法国巴斯德研究所不仅大量购买我们生产的检测试剂盒,还多次购买我们的单抗(原材料)用于相关研究。
我室制备的狂犬病毒检测试剂先后出口到法国、突尼斯、希腊、伊朗等国用于狂犬病实验室诊断,据用户反馈信息,我们的产品检测灵敏度优于国外同类试剂。
(本工作得到法国巴斯德研究所WHO狂犬病参考与合作中心主任HerryTsiang博士的技术指导和法国巴斯德梅里厄血清疫苗公司(PMSV)的部分资助。)
在国内首先制备出抗狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的基础上,建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法,经与小鼠中和试验(MNT)比较,其重复性、特异性和灵敏度均无显着差异。该方法在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可取代MNT。
狂犬病目前在中国和许多发展中国家仍是一个严重问题[1-3],因而迫切需要建立和推广与狂犬病毒(RV)有关的各种快速、实用的检测方法。WHO专家委员会肯定并推荐将小鼠中和试验(MNT)和RFFIT作为检测RV中和抗体的两项基本方法[4],并建议在可能时尽量用RFFIT代替MNT,因前者更快速、价廉,且灵敏度与MNT相同。进行RFFIT需要有抗RV核蛋白(NP)荧光标记抗体。我们在国内首先试制成功此关键试剂[5]的基础上,建立起微量RFFIT方法,并对该方法的重复性、特异性和灵敏度与MNT进行了比较。该方法有希望在狂犬病的临床诊断、疫苗质量控制和流行病学调查等项工作中获得广泛应用。现将有关实验的结果报告如下。
BHK21/BSR细胞,已适应该细胞系的RV攻击病毒CVS株(ATCCVR959),以及已知中和滴度(IU/ml)的抗RV标准血清(批号I-1995-10-11)由法国巴斯德研究所HerryTsiang博士惠赠;接种RV疫苗(法国巴斯德梅里厄血清疫苗公司生产的VERORAB或本所生产的RV疫苗)前后的人血清由本室肖鼎昌医生提供。
细胞培养基:D-MEM,GibcoBRL产品。Lab-Tak细胞培养载玻片,Nunc产品。Falcon96孔平底细胞培养板。Opton荧光显微镜。抗RVNP荧光标记抗体参考标准品为法国巴斯德Sanofi诊断用品公司产品(批号6E022U),本文中简称pNF;本室自制的相应产品,本文中简称mNF,见文献[5];本文中未注明采用pNF的,均采用mNF。
组织培养RV的快速滴定按文献[5-6],待测RV样品经系列稀释后感染BSR细胞,细胞质内的包涵体(主要成分为RV的NP)的荧光可在24小时(固定毒)或48小时(街毒)后检测到。通常在低倍显微镜(160X)下检查20个视野(用Lab-Tak载玻片时),或8个视野(微量法,用96孔细胞培养板时)。滴度用Reed&Muench方法计算,用荧光灶单位(FFU/ml)表示。进行RFFIT时攻击病毒采用CVS株,病毒的最适攻击剂量为经24小时温育后能使80%的细胞感染(产生荧光包含体)的最高稀释度。
将固定量的CVS病毒与系列稀释的待测血清(包括已知滴度的参考血清)一起温育(体外中和反应),然后加入敏感细胞(BSR)悬液。经24小时温育后,细胞单层用丙酮固定,用荧光标记的抗NP抗体染色,以检测未被中和的病毒的存在(荧光灶)。与病毒对照组比较,计算每种待测血清使固定量CVS病毒的FFU/ml减少50%的稀释度,然后与已知滴度的参考血清比较,计算每种待测血清的中和抗体滴度。
将同一份CVS毒种分装保存于一70℃,在半年时间内6次重复用mNF和pNF平行测定其滴度,所得的结果相当稳定,相互间也无差别(对于病毒稀释度1103.5,t=0.445,P0.05;对于病毒稀释度1104.2,
t=0.353,P0.05,见表1)。此CVS毒种经测定在小鼠中的毒力滴度为5.5LogLD50/ml(Sm=0.4LogLD50/ml),可用作毒力参考标准品以换算未知样品在小鼠中的毒力滴度(根据未知RV样品与此参考样品在组织培养中用荧光灶单位(FFU/ml)表示的滴度的比值,可直接换算出其小鼠LD50滴度)。此CVS毒力参考品经24小时温育后能使80%的BSR细胞感染的最高稀释度为1160,此稀释度即用作RFFIT的最适病毒攻击剂量。
以法国巴斯德研究所提供的抗RV标准血清为参照,分别用RFFIT和MNT各4次重复测定参考血清A和B的中和滴度,结果见表2,这两种方法检测的结果间的差别均无显着意义(对于样品A,t=0 儿童棉鞋。444,P0.05;对于样品B,t=0。768,P0.05,),即可认为两种方法所得结果基本一致。
对接种RV疫苗前后的人血清样品52份,分别用RFFIT(平行采用mNF和pNF)和MNT测定其RV中和滴度(仅测定样品的中和效价是否大于0.5IU/ml)。在进行RFFIT测定时,采用mNF和pNF所得荧光抗体滴度之间的符合率(52/52)为100%,而RFFIT与MNT之间的符合率(51/52)则在98%以上,其中不相符的一份样品MNT定为阴性,经RFFIT复测滴度稍大于临界值(0.5IU/ml),为弱阳性(见表3);这也说明RFFIT的灵敏度可能略高于MNT。
同时用RFFIT和MNT对18份在不同时间采集自暴露后接种VERORAB疫苗者(编号37和45)或接种本所生产的RV疫苗者(编号121)血清样品的RV中和抗体滴度进行检测,结果用RFFIT和MNT测定同一份血清的滴度基本上是一致的,与相应的算术平均值相比较,绝大多数结果的变异范围都在25%以内(见表4)。
本室制备的mNF成本低廉,效果稳定,在上述应用试验中都与法国巴斯德Sanofi诊断用品公司相应产品pNF的特异性和敏感性完全相同,在法国巴斯德研究所WHO狂犬病参考与合作中心对这两种试剂进行的对比试验也得到相同结果(H.Tsiang,个人通讯)。
在应用抗NP荧光标记抗体的基础上建立的RFFIT方法,其原理和所得结果与MNT有高度的一致性(它们所专一检测的都是特异性地针对RV的保护性中和抗体),而且比MNT更加快速(实验所需时间由14天降至2个工作日)、价廉,重复性更好,因此得到WHO的肯定和推荐[4],在国际上已成为最广泛接受的对MNT的替代方法。
Fitzgerald等[8]曾进行3个实验室的合作研究以比较MNT和RFFIT的重复性。在同一实验室对同一样品进行检测,采用MNT所得结果的变异范围为67%-149%,采用RFFIT的变异范围为68%-146%。本文中分别用RFFIT和MNT各4次重复测定参考血清A和B的中和滴度,采用MNT所得结果的变异范围对样品A和B分别为81%-123%和78%-129%,采用RFFIT所得结果对样品A和B的变异范围分别为83%-120%和86%-116%。结果都证明RFFIT的重复性不低于MNT,而且这两种方法检测的结果间的差别均无显着意义。
Zalan等[9]将RFFIT方法微量化,即用96孔细胞培养板代替价格昂贵的Lab-Tak细胞培养载玻片。其优点是可同时处理大量样品,大大减少了试剂用量,而且观察结果容易并能减少判定上的误差。本文的结果也证明这种微量化方法优点更多,值得推广。
综上所述,本文的结果再次证明RFFIT的重复性、特异性和灵敏度都不低于MNT,同时具有更加快速、价廉、简便等优点,在大多数需要检测RV中和抗体的情况下RFFIT可代替MNT,有希望在我国狂犬病的防治和研究中获得广泛应用。
5.严家新,李承平,徐葛林,等.抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步应用,《第四次全国生物制品学术会议论文汇编》,武汉,1997,P110。
8.FitzgeraldEA,CabassoVJ,SmithJS,etal.(human)bythemouseneutralizationtest(MNT)(RFFIT).JBiolStand,1979,7(1):67.
-(RV)nucleoprotein(NP),(RFFIT)itsreprocibilty,(MNT).ntofrabiesinChina.
免责声明本文是作者在光明网卫生频道原创专栏内容,其原创性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不作任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容。来源光明网卫生频道)

‘捌’ 怀疑自己得了狂犬病做什么检查

狂犬病是很多人都比较担心的一种疾病,因为狂犬病一旦发作是治不好的。如果你被猫狗咬伤后没去打针,总是怀疑自己的得了狂犬病是很累的,狂犬病是有潜伏期的,有症状后才会慢慢显出来,那个时候再进行治疗就已经晚了。

怀疑自己得了狂犬病做什么检查

1.血常规、尿常规、脑脊液常规白细胞总数为(12-30)×109/L,中性粒细胞百分比多在80%以上,大单核细胞百分比也可升高。常规尿液检查通常显示轻度蛋白尿,偶尔会出现透明管型。脑脊液压力在正常范围内或轻度升高,蛋白轻度升高,细胞数轻度升高,但很少超过200×106/L,以淋巴细胞为主。

2. 免疫学试验

(1)血清中和抗体或荧光抗体测定:对未注射疫苗、抗狂犬病血清或免疫球蛋白者有诊断价值。缺点是在病程第8天前不易发现。对于已经接种过疫苗的患者,如果中和抗体效价超过1:5000,对于狂犬病的诊断还是有价值的,因为只有接种过疫苗的患者的抗体效价较低。最近,ELISA也被用于抗体检测。

(2)狂犬病病毒抗原检测:利用荧光抗体检测脑组织涂片、角膜印迹、冰冻皮肤切片中的病毒抗原,在发病前可获得阳性结果。该方法简单,可在数小时内完成,与小鼠脑内接种检查内体的方法有较高的符合率,是一项具有较大实际应用价值的试验。在有经验的实验室,免疫荧光检测的可靠性可达95%以上。最近,快速狂犬病酶免疫诊断(RREID)方法可用于检测脑组织中的狂犬病病毒抗原。只需要肉眼观察或酶标仪测量结果即可。如果阳性反应显示橙色,阴性反应是无色的,非常快速和容易。

3.病毒分离虽然可以从患者的脑组织、脊髓、唾液腺、泪腺、肌肉、肺、肾、肾上腺、胰腺等器官组织中分离到病毒,但机会并不多,而且从脑脊液和唾液中分离病毒就更加困难了;患者存活时间越长,分离病毒就越困难。可以通过组织培养或动物接种来分离病毒。病毒被分离后,可以通过中和试验进行鉴定。

4.动物接种及脑组织检查均在死后进行。动物接种是制备死者脑组织的10%悬液,接种到小鼠脑内(2~3周龄的乳鼠比成年鼠更敏感)。阳性小鼠在 6 至 8 天内出现震颤、毛发竖立、尾巴僵硬和瘫痪,并在 10 至 15 天内因精疲力竭而死亡。内体可以在死老鼠的脑组织切片中找到。

通过血液、尿液、脑脊液、免疫学检查、病毒分离等一系列检查,怀疑自己是否患有狂犬病的朋友可以解决问题。狂犬病是一种侵入中枢神经系统的病毒。一旦发现,既要加强预防,避免病毒的传播,还要安抚患者,根据其产生的并发症进行一些相应的治疗。

焦虑怀疑自己有狂犬病怎么办

怀疑自己得了狂犬病,焦虑的症状其实是疑病症或疑病症。 狂犬病是一种已知的致命疾病。 患者担心自己的生命受到威胁,因此出现焦虑症状。 有些患者可能还会出现其他症状,以及抑郁症的症状,以及各种身体不适。

一种治疗是药物治疗,另一种是心理治疗。 用药应以抗焦虑药、苯二氮卓类、新型SSRIs为主,对症治疗也是可以的。 常用的心理治疗形式有精神分析、行为治疗、认知治疗,可能还有森田治疗等,治疗要及时。

如何克服狂犬病恐惧症

我就不明白了,概率如此之小的狂犬病为什么会有这么多人恐惧?有甚者还要因此而灭了狗狗!每天开车,走路的死人概率要比这个多得多,可没看谁恐惧走路开车啊!其实只要被咬伤挠伤,视轻重程度去打疫苗或加打血清就可以了!其它的事就是命了吧?完全没有必要恐惧害怕的!只要没有疏忽,努力了,一切顺其自然好了!

‘玖’ 狂犬疫苗抗体检测

一般在全程注射完人用狂犬病疫苗15天后检测抗体狂犬病抗体。
但如果当时注射该疫苗机体产生足够抗体者,即使两个月后检测,
应该还能检测到抗体的。
1.抗狂犬病抗体检测:
http://..com/question/14080354.html
2.注射疫苗期间饮食禁忌:
http://..com/question/16569958.html

关于吸烟:我个人的理解是问题不大,比抽烟的肺癌的几率小。狂犬病疫苗对身体而言是异种蛋白可引起变态反应(就是过敏),而吸烟,吃辛辣刺激类的食物会诱发过敏。但可能性小。看情况你是个老烟民身体已经耐受,问题不大。至于影响抗体是不可能的,对吸烟的研究并没有得出抑制免疫的结论。不必害怕。

‘拾’ 狗查狂犬病要检查什么

实验室检查:
1.血、尿常规及脑脊液 白细胞总数自(12~30)×109/L不等,中性粒细胞百分率大多在80%以上,大单核细胞百分率亦可增加。尿常规检查常可发现轻度蛋白尿,偶有透明管型。脑脊液的压力在正常范围或稍有增高,蛋白质轻度增高,细胞数稍增多,但很少超过200×106/L,主要为淋巴细胞。
2.免疫学试验
(1)血清中和抗体或荧光抗体测定:对未注射过疫苗、抗狂犬病血清或免疫球蛋白者有诊断价值。缺点是在病程第8天前不易测出。接种过疫苗的患者,如中和抗体效价超过1∶5000时,对诊断狂犬病仍有价值,因仅注射疫苗者其抗体效价较低。近来亦有采用ELISA进行抗体检测。
(2)狂犬病毒抗原检测:应用荧光抗体检查脑组织涂片、角膜印片、冷冻皮肤切片中的病毒抗原,发病前即可获得阳性结果。方法简便,数小时内可完成,且与小鼠脑内接种检查内氏小体方法有较高的符合率,因此是实际应用价值较大的一种试验。在有经验的实验室中,免疫荧光试验的可靠性可达95%以上。最近采用快速狂犬病酶链免疫吸附诊断法(rapid rabies enzyme immuno diagnosis,RREID)可用于检测脑组织中狂犬病毒抗原,只需肉眼观察或酶标仪测定结果即可,如阳性反应显示橘黄色,阴性反应则无色,甚为快速简便。
3.病毒分离 从患者脑组织、脊髓、涎腺、泪腺、肌肉、肺、肾、肾上腺、胰腺等脏器和组织虽可分离到病毒,但机会均不多,自脑脊液和唾液中则更不易分离出病毒;患者的存活时间越长,病毒的分离也越困难。分离病毒可采用组织培养或动物接种,分离出病毒后可用中和试验加以鉴定。
4.脑组织动物接种与检查 均于死后进行,动物接种为将死者脑组织制成10%混悬液接种于小鼠脑内(2~3周龄的乳鼠较成年鼠为敏感),阳性者小鼠于6~8天内出现震颤、竖毛、尾强直、麻痹等现象,10~15天内因衰竭而死亡。死亡小鼠脑组织切片中可发现内氏小体。
5.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测狂犬病毒核酸 为了能检侧大多数狂犬病毒和狂犬相关病毒,可选择狂犬病毒核蛋白基因(N)中最保守区域设计引物:N1( )(587)5’-TTTTGAGACTGCTCCTTTTTG-3’(605),N2(-)(1029)5’-CCCATATAGCATCCTAC-3’(1013)。取脑组织或病毒感染细胞,先获得病毒RNA。N1引物用于合成cDNA,然后进行PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果。
以死者脑组织或咬人动物死亡后的脑组织作病理切片或压片,用Seller染色及直接免疫荧光法检查内氏小体,阳性率可达70%。
其他辅助检查:
常规应做X线胸片、B超、心电图、脑CT检查。

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