Ⅰ 除高锰酸钾外，还有什么方法可以测定过氧化氢的含量
过氧化氢(Hydrogen peroxide)
化学式： H2O2过氧化氢含量测定,过氧化氢含量,H2O2过氧化氢含量测定,过氧化氢含量,H2O
相对分子质量： 34.01
结构式:
说到过氧化氢，可能很多小伙伴会想就是实验室里那种俗称双氧水，外观为无色透明需要避光的液体。它是一种强氧化剂，其水溶液适用于医用伤口消毒及环境消毒和食品消毒。然鹅，过氧化氢可没这么简单，它在生物体内广泛存在，而且是一种关键的调节因子。过氧化氢含量与细胞状态有密切关系呢。
可能有人不理解这种强氧化剂咋会在生物体内存在，我们就来说说：
过氧化氢是生物体内最常见的活性氧分子，是一种活性氧代谢的副产物，主要由 SOD 和 XOD 等催化产生，由 CAT 和 POD 等催化降解。过氧化氢不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面 过氧化氢也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。过氧化氢可以激活NF-κB等因子，这些过氧化氢相关的信号途径和哮喘、炎症性关节炎、动脉硬化以及神经退行性疾病等许多疾病相关。过氧化氢也和细胞凋亡、细胞增殖等密切相关。
看来过氧化氢在生物体内确实发挥重要作用呢，所以过氧化氢含量的测定就有重要的意义。我们下面简单介绍几种常用的测定过氧化氢的方法：
一、二甲酚橙（xylenol orange）法
这种方法在国内应用比较广泛，有明显的优势。
原理：过氧化氢氧化二价铁离子产生三价铁离子，二甲酚橙（xylenol orange）高选择性的结合三价铁离子形成有色（紫色）产物，可用比色法在580nm处测定。从而实现对过氧化氢浓度的测定。
由于二甲酚橙（xylenol orange）作为一种金属离子络合指示剂，与三价铁离子的结合有很高的选择性，也就是该方法有很好的特异性。同时该反应需要在酸性条件下进行，可以消除很多物质的干扰。
二、硫酸钛比色法
这也是国内一种比较常见的方法。
原理：H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在 415nm 有特征吸收。
该方法原理简单易懂，但样本处理需要自备丙酮用来破碎细胞、匀浆组织和稀释液体样本。丙酮易挥发，而且易燃有毒，给操作带来一定困难，需要做好防护措施。
三、探针法
这是目前国外一种常用的测定过氧化氢含量的方法。
原理：在辣根过氧化物酶（HRP）存在的条件下，特异的 探针与过氧化氢反应，生成有色产物在570nm有最大光吸收，也可产生红色荧光（Ex/Em=535/587 nm）。比色法与荧光法灵敏度不同，需要配制不同的标准曲线。
该方法需要用到特异性的荧光探针，反应原理较前面2种复杂，但灵敏度很高，在荧光法中灵敏度可达40 nM。
四、过氧化物酶底物法
这是一种国外不太常见的方法。
原理：用一种独特的过氧化物酶底物测定溶液和细胞提取物中的过氧化氢 ，在辣根过氧化物酶（HRP）存在的条件下，过氧化氢氧化无色的过氧化物酶底物，产生强烈的蓝色。在 650nm有特征吸收。
Ⅱ 过氧化物酶活性测定的方法有哪些
实验
48
过氧化物酶活性的测定（比色法）
过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。
一、原理
在有过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，该物质在
470
nm
处有最大吸收，可用分光光度计测量
470
nm
的吸光度变化测定过氧化物酶活性。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
马铃薯块茎。
（二）试剂
1
．
100
mmol
／
L
磷酸缓冲液
pH6.0
（见附录）。
2
．反应混合液：
100
mmol
／
L
磷酸缓冲液（
pH6.0
）
50
mL
于烧杯中，加入愈创木酚
28
μl
，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解，待溶液冷却后，加入
30
%
过氧化氢
19
μl
，混合均匀，保存于冰箱中。
（三）仪器设备
分光光度计，研钵，恒温水浴锅，
100
mL
容量瓶，吸管，
离心机。
三、实验步骤
1
．称取植物材料
1
g
，剪碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆，以
4000
r
／
min
离心
15
min
，上清液转入
100
mL
容量瓶中，残渣再用
5
mL
磷酸缓冲液提取一次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，贮于低温下备用。
2
．取光径
1
cm
比色杯
2
只，于
1
只中加入反应混合液
3
mL
和磷酸缓冲液
1mL
，作为对照，另
1
只中加入反应混合液
3
mL
和上述酶液
1mL
（如酶活性过高可稀释之），立即开启秒表记录时间，于分光光度计上测量波长
470
nm
下吸光度值，每隔
1min
读数一次。
四、结果计算
以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小，即以
ΔA
470
/[min
•
g
（鲜重）
]
表示之。也可以用每
min
内
A
470
变化
0.01
为
1
个过氧化物酶活性单位（
u
）表示。
过氧化物酶活性
[u/
（
g
•
min
）
]=
式中：
Δ
A
470
——反应时间内吸光度的变化。
W
——植物鲜重，
g
。
V
T
——提取酶液总体积，
mL
。
V
s
——测定时取用酶液体积
,
mL
。
t
——反应时间，
min
。
Ⅲ 过氧化值检测国标
过氧化值表示油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标。是1千克样品中的活性氧含量，以过氧化物的毫摩尔数表示。用于说明样品是否因已被氧化而变质。那些以油脂、脂肪为原料而制作的食品，通过检测其过氧化值来判断其质量和变质程度。
基本信息
_
中文名
_
过氧化值
_
_
检测意义
_
一定程度上可以反映食品的质量
_
_
作用
_
判断其质量和变质程度
_
_
表示
_
毫摩尔数
_
_
释义
_
油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标
_
_
检测方法
_
滴定法和比色法
_
目录 1简介
2标准检测方法 3快速检测
4检测意义 5超标危害
折叠编辑本段简介
油脂氧化后生成过氧化物、醛、酮等。氧化能力较强，能将碘化钾氧化成游离碘。可用硫代硫酸钠来滴定。
过氧化值是衡量油脂酸败程度，一般来说过氧化值越高其酸败就越厉害!
因为油脂氧化酸败产生的一些小分子物质在体内对人体产生不良的影响，如产生自由基，所以过氧化值太高的油对身体不好 。
折叠编辑本段标准检测方法
在中国食品质量标准GB/T 5009.37-2003食用油卫生标准分析方法中，提及或介绍了对食用植物油中酸价、过氧化值、羟基价、游离棉酚(适用于棉籽油)、砷、苯并芘、黄曲霉毒素B1、残留溶剂、镍、非食用油、黄曲霉毒素的检测方法和标准，其中涉及到过氧化值的主要有两种检测方法滴定法和比色法。
折叠滴定法
试剂
1、饱和碘化钾溶液:称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕色瓶中。
2、三氯甲烷-冰乙酸混合液:量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混匀。
3、0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液:称取5g硫代硫酸钠(Na2S2O3 ·5H2O)(或3g无水硫代硫酸钠)，溶于1000ml水中，缓缓煮沸10分钟，冷却。放置两周后过滤备用。
4、10g/L 淀粉指示剂:称取可溶性淀粉0.50g，加入少许水调成糊状倒入50ml沸水中调匀，煮沸，临用时现配。
测定步骤
精确称取2.00-3.00g混匀的样品 ，置于250ml碘量瓶中，加30ml三氯甲烷-冰乙酸混合液(因为纯品对光敏感，遇光照会与空气中的氧作用，逐渐分解而生成剧毒的光气(碳酰氯)和氯化氢。可加入0.6%~1%的乙醇作稳定剂。能与乙醇、苯、乙醚、石油醚、四氯化碳、二硫化碳和油类等混溶)，使样品完全溶解;加入1.00ml饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置5min，取出加100ml水，摇匀。立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至淡黄色时，加1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点，取相同量三氯甲烷-冰乙酸混合液、碘化钾溶液、水，按同一方法，做试剂空白试验。
测定结果的计算与分析
1、计算:
X=[(V-V0)×N×0.1269]/m
式中:X-样品的过氧化值，%。
V-样品消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。
V0-空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。
N-硫代硫酸钠标准溶液的麾尔浓度，mol/L。
0.1269-1N硫代硫酸钠1ml相当于碘的克数。
2、分析:
油脂新鲜，其过氧化值不应大于0.15%。
折叠比色法
原理:试样用三氯甲烷-甲醇混合溶剂溶解，试样中的过氧化物将二价铁离子氧化成三价铁离子，三价铁离子与硫氰酸盐反应生成橙红色硫氰酸铁配合物，在波长500nm处测定吸光度，与标准系列比较定量。
试剂:盐酸溶液、过氧化氢、三氯甲烷+甲醇混合溶剂、氯化亚铁溶液、硫氰酸钾溶液、铁标准储备溶液(1.0g/L)、铁标准使用溶液(0.01g/L)。
仪器:分光光度计，10mL具塞玻璃比色管。
分析步骤
试样溶液的制备:精密称取约0.01g~1.0g试样(准确至刻度0.0001g)于10mL容量瓶内，加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。
分别精密吸取铁标准使用溶液(10ug/mL)0,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0mL(各自相当于铁浓度0,2.0,5.0,10.0,20.0,30.0,40.0ug)于干燥的10mL比色管中，用三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂稀释至刻度，混匀。加1滴(约0.05mL)硫氰酸钾溶液(300g/L)，混匀。室温(10℃-35℃)下准确放置5min后，移入25px比色皿中，以三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂为参比，于波长500nm处测定吸光度，以标准各点吸光度减去零管吸光度后绘制标准曲线或计算直线回归方程。
试样测定:精密吸取1.0mL试样溶液于干燥的10mL比色管内，加1滴(约0.05mL)氯化亚铁(3.5g/L)溶液，用三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂稀释至刻度，混匀。以下按试样溶液制备中自"加1滴(约0.05mL)硫氰酸钾溶液(300g/L)??"起依法操作。试样吸光度减去零管吸光度后与曲线比较或代入回归方程求得含量。