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赖氨酸的检测方法

发布时间:2022-12-08 13:36:02

Ⅰ 谁知道赖氨酸盐酸盐的检测原理啊

名称:L-赖氨酸盐酸盐
产品含量:99%
CAS 编号: 657-27-2
质量标准:食品级
包装规格:25KG/纸板桶
中文产品名称:L-赖氨酸盐酸盐
英文产品名称:L-Lysine monohydrochloride
化学分子式:C6H14N2O2·HCL
化学名称:
特性与用途:白色或近白色自由流动性的结晶性粉末。几乎无臭。263~264℃熔化并分解。通常较稳定,高湿度60%以下稳定,60%以上则生成二水合物。与维生素C和维生素K3共存则易着色。碱性条件及直接与还原糖存在下加热则分解。易溶于水(40g/ml,35℃),水溶液呈中性至微酸性,与磷酸、盐酸、氢氧化钠、离子交换树脂等一起加热,起外消旋作用。赖氨酸为必需氨基酸,无法在体内合成,如缺乏则引起蛋白质代谢障碍及功能障碍,导致生长障碍、发育不全、体重下降、食欲不振、血中蛋白减少等。D-型赖氨酸无生理效果。
质量标准:GB 10794--89,强制性国际
项目 质检标准
含量(以干基计) ≥98.0%
重金属(Pb计) ≤0.001%
透光度(E10%1cm:400nm) ≥95%
干燥失重(105℃,3h) ≤1.0%
砷(以As计,GT-3) ≤0.0001%
灼烧残渣 ≤0.2%
比旋光度[α]25D 19.0°~ +21.5°
PH(10%水溶液) 5.0~ 6.0
功用:营养增补剂。用于强化食品中的赖氨酸。黑麦、米、玉米、花生粉等所含赖氨酸为限制氨基酸,小麦、芝麻、燕麦等所含赖氨酸为第一限制氨基酸。尚可用于蛋黄酱、牛乳、方便面食品等。亦可用作调味料,以改善风味。
推荐使用量及注意事项:
成人每日最小需要量(以L-赖氨酸计):男性约0.8g,女性约0.4g,青年12~32mg/kg,幼儿180mg/kg(1g 赖氨酸相当于 L-赖氨酸盐酸盐1.25g)
毒性:可安全用于食品中
包装与运输:
包装:本品采用双层包装:内层用食用聚乙烯塑料袋密封,外用纸板箱包装。每箱净含量为25kg,还可根据用户需要包装。
运输:应轻装轻卸。防止日晒、雨淋,不能与有毒、有害物品混运、本品为非危险品,可按一般化学品运输。
贮存: 应贮存在干燥清洁避光的环境中,严禁与有毒物质混放,以免污染。保质期为两年。

Ⅱ 赖氨酸高产菌种的筛选与分离,一般产生菌是哪些菌,怎么鉴定啊,产生赖氨酸以后怎么检测求高手详细啊

现在大生产上有竞争力的赖氨酸生产菌种均是基因工程菌(例如E.COLI)。自然界的细菌不会积累赖氨酸。菌种的鉴定可以查相关的手册如伯杰士手册上的方法进行鉴定。赖氨酸的检测可以用氨基酸分析仪的方法,也可以用茚三酮显色的方法。

Ⅲ 测定该转基因玉米种子中的赖氨酸的含量可以选用双缩脲试剂吗

可以的 测定该转基因玉米种子中的赖氨酸的含量 用双缩脲试剂,是可以测试出来的

Ⅳ 蛋白药物生物学活性检测方法有哪些

一、MTT比色法检测细胞活性
(一)原理
活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。
(二)试剂准备
1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2O中,抽滤除菌。
2、L15基础培养基:1000mlL15培养基,加2g碳酸氢钠,10ml 100X青链霉素,5mlHEPES。
3、MTT液:5mg/ml溶于L15基础培养基。
4、SDS处理液:20gSDS,50μl二甲基甲酰胺,加双蒸水50ml溶解。
5、L-多聚赖氨酸:50μg溶于1ml双蒸水中。
6、L15基础培养基溶解的不同浓度的蛋白液。
(三)操作步骤(以背根神经节细胞培养为例)
1、无菌条件下取新生一天的SD大鼠背根神经节(DRG)。
2、镜下去除神经根和外膜,放入1ml 0.1%胶原酶中37℃消化30min,每5min摇匀一次。
3、洗去胶原酶,吹打分散后,接种于预先涂有L-多聚赖氨酸的96孔培养板中,每孔含100μl无血清L15培养基,细胞约800个。
4、实验组分别加入纯化的表达蛋白(分别以不同的蛋白浓度),阴性对照加入等体积表达蛋白的溶剂。
5、37℃ 5%CO2培养48hr后,每孔加入10μl MTT,37℃ 5%CO2孵育4hr。
6、加入100μl 20%的SDS处理液,37℃孵育20hr。
7、用EL×800微孔酶标仪测定OD570值,数据分析。

Ⅳ 求助:赖氨酸的检测方法

饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量的测定: 试样预先在105℃干燥至恒重,称取干燥试样式0.2g,称准至0.0002g,加3ml甲酸和50ml冰乙酸,再加入5ml乙酸汞的冰乙酸溶液,加入10滴a-萘酚苯基甲醇指示液,用0.1mol/L高氯酸的冰乙酸标准溶液滴定,试样液由橙黄色变为黄绿色即为滴定终点。用同样方法另作空白试验以校正之。 计算公式:赖氨酸盐酸盐的百分含量按下式计算:0.09132*C*(V-V0)/m 式中:c为高氯酸标准溶液之浓度(mol/L);V为试样消耗高氯酸标准液之体积(ml);V0为空白试验消耗高氯酸标准溶液之体积(ml);m为试样之质量(mg);0.09132为每毫摩尔赖氨酸盐酸盐之质量(g)。两个平行试样测定结果之差不得大于0.2%,以求算术平均值。

Ⅵ 检验氨基酸用什么方法

1.茚三酮反应,氨基酸与其发生反应缩合成蓝色物质。除开脯氨酸和羟脯氨酸,他们与其反应生成黄色衍生物。
2.桑格反应,氨基酸与其反应会生成黄色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。
3.艾德曼反应(DNFB反应),即氨基酸与苯异硫氰酸反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸。

Ⅶ 赖氨酸含氮量或者粗蛋白怎么测要打官司

赖氨酸的含量为19.2%,折成粗蛋白质的含量应是120%,因系数6.25是按氨基酸的平均含氨量16%计算的,如是赖氨酸盐酸盐或硫酸盐还得进行相应的换算

Ⅷ 蛋白质中活性赖氨酸的评价实验

给你拷了个方法过来,可参考一下:

赖氨酸(lysine, Lys)作为猪的第一限制性氨基酸,从20世纪50年代开始一直是动物营养学研究的热点之一。Lys在动物饲料中用量大、成本较高,因此必须精确地确定动物最佳生长发育的最低需要量。另一方面许多原料经过加热、加压、磨粉、碱处理或贮存时间过长,均可导致Lys的є-氨基与其它物质发生反应,形成脱氧酮糖化合物,该物质虽能被动物吸收,但无营养价值(Eichner 等, 1994),从而导致部分Lys不能被动物利用。只有准确评价Lys的有效率,才能合理利用Lys,从而避免蛋白质资源的缺乏和浪费,减少动物对氮的排放和环境污染。准确测定饲料和回肠末端食糜活性Lys含量,将有利于动物对Lys需要量的研究。
1 活性Lys(Reactive lysine)的定义
Lys的基本结构为丙胺酸(如图1),丙胺酸的β-碳原子上带有一个丙胺基,ε-氨基比α-氨基具有较高的pKa(多肽为10.5),从而使得Lys侧链的亲核性下降。特殊环境作用能够降低Lys侧链的pKa,使之变得活跃。活性Lys是指Lys上的є-氨基能与其他物质发生反应的Lys,可利用Lys是指食入的Lys能够被动物吸收并可用于蛋白质合成的Lys,可消化氨基酸是指食入的Lys经消化后被吸收的Lys,从实用角度,可以把可消化Lys和可利用Lys同等对待,但活性Lys与可消化Lys或可利用Lys有着本质的区别。
图1 赖氨酸的基本结构
2 活性Lys的测定方法
饲料活性Lys的测定方法有多种,每一种方法都有各自的优缺点,许多研究者对各种方法分别进行了论述(见表1)。
2.1 1-F-2,4-二硝基苯法(FDNB法)
Carpenter(1960)用FDNB法连接Lys残基,酸水解之后用分光光度计测定DNP-Lys含量,当样品含有碳水化合物时,会生成一些不稳定的化合物,导致过高估计活性Lys含量(Matheson,1968)。Holm(1971)在碳水化合物水解时,试图使用色谱法从受到干涉的氨基酸和其他化合物中分离出DNP-Lys。Peterson和Warthesen(1979]使用高效液相色谱来分析活性Lys,检测波长为436 nm,C18毛细柱,20%乙氰和80% 0.01M醋酸盐缓冲液(pH 4.0)作为流动相,该法首先应用在分析二硝基苯基化棉籽蛋白的水解产物。Catherine等(1997)[11]应用上述方法未能很好地测定DNP-Lys,并得出DNP-Lys紫外线最大吸收峰在364 nm,而不是在436 nm,并对此分析方法做了改进,用20%乙氰和80%0.01M邻苯二甲酸氢钾缓冲剂(pH3.9)混合物作为流动相,在此条件下,DNP-Lys和其它化合物能很好地得到分离。Qin等(1998)报道,用FDNB法测定中国大豆和阿根廷大豆活性Lys,加热到100℃和118 ℃时,FDNB-活性Lys变化规律不明显,但当加热到136℃,两种大豆中活性Lys含量随加热时间的延长而降低。近年来,很多学者用高效液相色谱法测定以谷物为主的婴儿食物、婴儿配方食品和其他食品DNP-Lys含量,但是没有进一步与动物试验结果进行比较(castillo等,1997;Alala-Hurtado等,1999;Fernandez-Artigas等1999;Hermandez等,2001)。

2.2 胍基反应法 (Guanidination)
胍基反应法是Mauron和Bujard(1964)建立一种活性Lys分析方法,这种方法根据ε-氨基在碱性条件下与邻-甲基脲胍基反应形成同型精氨酸,经过水解后同型精氨酸可以用离子交换层析法测定,该测定方法尽管反应时间较长(几天)、温度控制严格(室温),但分析结果可靠,因此现在还普遍使用。Mao等(1993)用葡萄糖或碱处理大豆活性Lys,结果表明,与总Lys分析比较,葡萄糖处理组总Lys含量下降17%~40%,活性Lys含量下降78%~85%。用胍基反应证实了热碱处理损害活性Lys更为真实, 其原因是在酸水解时重新除去一些被反应的Lys(如美拉德反应起始物果糖-Lys)。Imbeah 等(1996)在酪蛋白和大豆粉中得到胍基反应的最佳反应条件,得到可溶奶蛋白Lys转化率为100%,大豆稍低于80%。 Ravindran(1996)等研究了饲料原料胍基反应,以确定内源氨基酸的分泌量,主要集中棉籽蛋白最佳转化的研究,64% Lys转化为同型精氨酸。Moughan(1996) 在上述相同的试验条件下,用胍基反应法与FDNB法测定了热处理酪蛋白/乳糖混合物中活性Lys含量;Rutherfurd(1997 a)用胍基反应法和FDNB法对血粉、小麦粉、肉骨粉、豆粉、棉子粉活性Lys含量进行比较。两者结果表明,胍基反应法测出活性Lys含量等于或高于用FDNB法(见表2)。因此,Rutherfurd(1997a, b)、Moughan(1996)指出该方法在消化试验中能更加精确地确定Lys消化率,因为在分析粗原料和食糜Lys时,没有减去蛋白质水解前所破坏的Lys。从表3可见,在血粉、豆粉、肉骨粉、干燥玉米、热脱脂乳粉以及棉籽粕中,常规氨基酸分析法测定回肠真消化率明显低于可消化Lys含量。

2.3 荧光计分析法(OPA法)
Goodno等 (1981)设计了一种荧光计分析法,用邻苯二甲醛(OPA)来估价蛋白质活性Lys。Vigo等(1992报道美拉德反应前后,不同富含碳水化合物奶产品,其活性Lys含量可用OPA分光光度计法进行测定(表4),从FDNB法测得的数据可以看出,透析前活性Lys明显低于透析后,无透析样品损失了活性Lys,可能是由于糖含量较高。当有糖存在时,FDNB法测量活性Lys会过低。从OPA法测得的结果来看,透析与不透析的差异不明显。所以在有高水平糖存在时,用OPA法分析饲料或食物活性Lys应该是可行的。


※样品1 未加热, 样品2 60°C加热20小时, 样品3 100°C加热1小时, 样品4 120°C加热45分钟; 表中数据为平均±标准差。
与其它化学方法比较,用OPA法估计奶产品活性Lys有以下几个优点:1)糖不会干涉;2)分析样品量少;3)操作简单;4)没有严格的处理,如蛋白质水解、加热或溶剂萃取,可以在短时间内完成。
2.4 化学计量染色法
Ibolya和Margit (1985)使用化学计量染色法确定大豆蛋白活性Lys含量,根据蛋白质自由碱性基团与1-苯-2萘酚-6, 8二磺酸(OG)反应来确定。蛋白质游离的部分碱性基团(组氨酸、精氨酸和Lys)来确定总氮含量,部分碱性基团通过美拉德反应来确定总氮变化。根据两个分子结构不同而作出的假设,OG颜色敏感性只有AO-12(十二烷基二甲基氧化铵)的一半。因为OG含氮载体能够结合两个氨基,而AO-12只能结合一个氨基。染料与蛋白质比通常小于1, AO-12测定活性Lys是直接根据它的染色能力。
染色法是测量蛋白质热反应最方便的方法,具有便宜、省时省力、不需要水解蛋白质等优点。3 小结
FDNB法、胍基反应法、荧光计分析法和化学计量染色法四种方法各有优缺点。在实际生产中,为了检测活性Lys的结果更加准确,应根据不同饲料原料选择不同的方法。通过测定饲料和回肠食糜活性Lys含量,我们能够精确估计饲料成本,更有效地选择饲料原料,从而为配制高效日粮提供理论依据,进一步改善日粮蛋白质的利用效率,为节约蛋白质资源开辟新的道路。
参考文献
1 Swaisgood, HE and Catignani, GL. Digestibility of modified milk proteins: nutritional implications. J. Dairy Sci. 1985, 68, 2782-90.
2 Carpenter, KJ.. The estimation of the available lysine in animal protein foods. J. Biochem. 1960, 77, 604-10.

Ⅸ 荧光检测赖氨酸的荧光增强的原理

赖氨酸在不同溶剂中荧光强度发生变化。根据查询赖氨酸的相关资料得知,荧光检测赖氨酸的荧光增强的原理赖氨酸在不同溶剂中荧光强度发生变化。通过与精氨酸和甘氨酸的对比实验,赖氨酸在可见光区有较强的荧光,且其吸收也相对较强,同时对赖氨酸的荧光寿命进行了分析测定。实验结果表明,赖氨酸的荧光性质明显区别于其它氨基酸,这与其特殊6-氨基官能团密切相关,且可归属于氮原子的本质荧光。

Ⅹ 饲料原材料检验标准和方法是

CCGF 403.1-2008 配合饲料
CCGF 404.3-2008 饲料加工机械
DB 11-T 257-2005-饲料用籽粒玉米生产技术规程
DB 33T 701-2008 配合饲料中磺胺类药物的测定高效液相色谱法
DB 34 T 201-2000饲料用低硫甙菜籽粕
GB 6435-86 饲料水分的测定方法
GB 13078.1-2006 饲料卫生标准饲料中亚硝酸盐允许量
GB 17890—1999 饲料用玉米
GBT5530-2005 ISO660-1996动植物油脂 酸值和酸度测定
GBT5538-2005 ISO3960-2001动植物油脂 过氧化值测定
GBT 5009.123-2003 食品中铬的测定
GBT 5528-1995 植物油脂水分及挥发物含量测定法
GBT 5537—85 植物油脂检验磷脂测定法
GBT 5918-1997 配合饲料混合均匀度的测定
GBT 6432-94 饲料中粗蛋白测定方法
GBT 6432-94 饲料中粗脂肪测定方法
GBT 6433-2006 饲料粗脂肪测定方法
GBT 6434-2006 饲料中粗纤维测定方法
GBT 6435-2006 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定
GBT 6436-2002 饲料中钙的测定
GBT 6437-2002 饲料中总磷的测定分光光度法
GBT 6438-2007 饲料中粗灰分的测定
GBT 6439-2007 饲料中水溶性氯化物的测定
GBT 8622-2006 饲料用大豆制品中尿素酶活性的测定
GBT 13079-2006 饲料中总砷的测定
GBT 13080-2004 饲料中铅的测定 原子吸收光谱法
GBT 13081-2006 饲料中汞的测定
GBT 13082-91 饲料中镐的测定方法
GBT 13083-2002 饲料中氟的测定离子选择性电极法
GBT 13084-2006 饲料中氰化物的测定
GBT 13085-2005 饲料中亚硝酸盐的测定 比色法
GBT 13088-2006 饲料中铬的测定
GBT 14608-1993 小麦粉湿面筋测定法
GBT 15398-94 饲料有效赖氨酸测定方法
GBT 17481-2008 预混料中氯化胆碱的测定
GBT 18246-2000 饲料中氨基酸的测定
GBT 18872-2002 饲料中水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、赖氨酸、蛋氨酸快速测定 近红外光法
GBT 20193-2006 饲料用骨粉及肉骨粉
GBT 20411-2006 饲料用大豆
GBT 21108-2007 饲料中氯霉素的测定 高效液相色谱串联质谱法
GBT 21517-2008 饲料添加剂 叶黄素
GBT 21695-2008 饲料级沸石粉
GB-T 18823-2002 饲料检测结果判定的允许误差
HG 2860-1997 饲料级 磷酸二氢钾
HG 2939-2001 饲料级 碘化钾
HG 2941-1999 饲料级 氯化胆碱
HGT 2861-2006 饲料级 磷酸二氢钙
HGT 3776-2005 饲料级 磷酸一二钙
ISO 660-1996 动植物油脂 酸价和酸值的测定
ISO 3960 2001 动植物油脂 过氧化值的测定
ISO 17059-2007 油料脂肪酸组成
NY 644-2002 饲料粉碎机安全技术要求
NY T 1457-2007 饲料中氟哌酸的测定 高效液相色谱法
NY T 1458-2007 饲料中盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、地西泮、盐酸硫利达嗪和奋乃静的同步测定 高效液相色谱法和液相色谱质谱联用法
NY T 1497-2007饲料添加剂 大蒜素(粉剂)
NYT 126-2005 饲料用菜籽粕
NYT 211-92 饲料用次粉
NYT 212-92 饲料用碎米
NYT 215-92 饲料用胡麻籽粕
NYT 685-2003 饲料用玉米蛋白粉
NYT 915-2004 饲料用水解羽毛粉
NYT 930-2006 饲料级甲酸
NYT 931-2005 饲料用乳酸钙
NYT 1372-2007 饲料中三聚氰胺的测定
NYT 1563-2007 饲料级 乳清粉
SBT 10212-1994 饲料用血粉
SC T 3032-2007水产品中挥发性盐基氮的测定
SCT 2002-2002 对虾配合饲料
SCT 3504-2006饲料用鱼油
DB33T 459-2003 饲料添加剂 饲料用复合酶制剂
GB 10381-89 饲料用花生饼
GB 10382-89 饲料用花生粕
GB 10385-89 饲料用豌豆
GB 10387-89 饲料用蚕豆
GB 10388-89 饲料用木薯叶粉
GB 10389-89 饲料用首蓿草粉
GB 10390-89 饲料用白三叶草粉
GB 10391-89 饲料用甘薯叶粉
GB 1535-2003 大豆油代替
GB1536-2004 菜籽油
GB-T 19542-2007 饲料中磺胺类药物的测定 高效液相色谱法
GBT 12098-1989 淀粉粘度测定方法
GBT 5009.12-2003 食品中铅的测定
GBT 5009.15-2003 食品中镉的测定
GBT 5009.33-2003 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定
GBT 5413.31—1997 脲酶的定性检验
GBT 8607-88 高筋小麦粉
SCT -3504-2006饲料用鱼油
SCT 3011-2001 水产品中盐分的测定确无误

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