选择题检测载脂蛋白常用的方法是

⑴ 检验技师/士考试知识点

检验技师/士考试知识点

通过考试取得的资格代表了相应级别技术职务要求的水平与能力，作为单位聘任相应技术职务的必要依据。下面是我为大家带来的检验技师/士考试知识点。欢迎阅读。

1、α-1,4-糖苷键是下列哪种物质分子中的主要化学键

A.蛋白质B.脂肪C.氨基酸D.淀粉E.以上都不是

答案：D

2、静息状态下，体内耗糖量最多的器官是

A.肝B.心C.脑D.骨骼肌E.红细胞

答案：C

3、人体内主要运输铁的蛋白质是

A.细胞色素类B.肌红蛋白C.血红蛋白D.转铁蛋白E.铁蛋白

答案：D

4、人体内含铁总量最多的蛋白质是

A.铁蛋白B.转铁蛋白C.血红蛋白D.肌红蛋白E.细胞色素类

答案：C

5、低密度脂蛋白中含量最多的载脂蛋白是

A.ApoAIB.ApoA IIC.ApoBD.ApoCIIE.ApoE

答案：C

6、载脂蛋白AI是下列何种脂蛋白的主要结构蛋白

A.HDLB.LDLC.VLDLD.CME.IDL

答案：A

7、载脂蛋白AI能激活下列哪种酶

A.脂蛋白脂肪酶B.卵磷脂胆固醇酰基转移酶C.肝脂肪酶D.脂肪组织脂酶E.胰脂酶

答案：B

8、脂蛋白各组份中密度最低的是

A.HDLB.LDLC.IDLD.VLDLE.CM

答案：E

9、CK是由2个亚单位组成的二聚体，产生的同工酶有

A.2种 B.3种 C.4种D.5种E.6种

答案：B

10、CK-MB主要存在于

A.脑组织B.肝脏C.心肌D.骨骼肌E.红细胞

答案：D

11、结合胆红素和非结合胆红素的区别是与下列何种物质结合

A.Y蛋白B.葡萄糖酸C.胆汁酸D.6-磷酸葡萄糖E.葡萄糖醛酸

答案：E

12、下列哪种胆红素增加可能引起核黄疸

A.未与葡萄糖醛酸结合的游离胆红素B.单葡萄糖醛酸结合胆红素C.双葡萄糖醛酸结合胆红素

D.与血清白蛋白牢固结合胆红素E.蛋白非结合型胆红素

答案：E

13、血液氨主要通过何种途径来清除

A.合成谷氨酰胺B.合成尿素C.尿中排泌D.从汗液排出E.粪便

答案：B

14、有关甲状腺疾病实验室检查的下列叙述何种是错误的

A.T3诊断甲亢比T4灵敏B.第一代TSH测定可用于原发性甲状腺功能减退的诊断

C.超敏TSH测定是原发性甲状腺功能亢进诊断好指标

D.TBG发生改变时，可测定游离T3和游离T4反映甲状腺功能 E.rT3是发挥生理作用的重要甲状腺激素之一

答案：E

15、凝胶过滤层析分离物质的基础是利用

A.各组分分子的大小不同B.各组分溶解度的不同C.各组分的带电荷的不同D.各组分沉降率的不同

E.各组分密度的不同

答案：A

16、关于斑脂糖凝胶电泳的叙述错误的是

A.为大网孔型凝胶B.是区带电泳C.适用于大分子核酸与蛋白质分离D.有分子筛效应

E.其透明度好，电泳后可直接扫描

答案：D

17、关于等电聚焦电泳，下列叙述哪个是错误的

A.是目前电泳技术中分辨率较好的方法之一 B.特别适用于分子量不同而电荷相同的蛋白质的分离

C.利用具有线性pH梯度的电泳介质来分离物质 D.适用于分子量相同而电荷不同蛋白质或多的分离

E.等电聚焦电泳还可以用于酶学研究

答案：B

18、一个用于确定诊断的方法最希望有

A.高灵敏度B.高特异性C.重复性好D.总有效率高E.准确度高

答案：B

19、有关β2微球蛋白测定的叙述，何者是错误的

A.血β2微球蛋白是反映肾小球滤过率的指标之一B.血β2微球蛋白受肾前性因素的影响大

C.尿β2微球蛋白是反映肾近曲小管重吸收功能的指标D.β2微球蛋白在尿中稳定

E.由于尿中β2微球蛋白含量极微，目前多采用放射免疫法进行测定

答案：D

20、人是牛带绦虫的哪种宿主

A.中间宿主B.终宿主C.转续宿主D.保虫宿主E.以上均可以

答案：B

21、棘球蚴在人体寄生最常见的部位是

A.肺B.脑C.肝D.骨髓E.皮下

答案：C

22、蝇蛆属于

A.兼性寄生虫B.偶然寄生虫C.永久性寄生虫D.暂时性寄生虫E.以上均不是

答案：B

23、细菌的死亡菌数远远大于活菌数的阶段是

A.迟缓期 B.对数生长期C.衰亡期D.稳定期E.都不是

答案：C

24、病原菌来自患者自身的体表或体内的感染称为

A.外源性感染B.内源性感染C.混合感染D.医院感染E.以上都不是

答案：B

25、细菌产生的一种侵袭性酶，其作用能使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白，使血浆发生凝固。请问这种侵袭性酶是

A.透明质酸酶B.血浆凝固酶C.过氧化氢酶D.胶原酶E.链激酶

答案：B

26、葡萄球菌经革兰染色后呈

A.红色B.黄色C.绿色D.紫色E.灰色

答案：D

27、墨汁染色要用于检测

A.白色念珠菌 B.新型隐球菌C.热带念珠菌 D.烟曲霉菌E.镰刀菌

答案：B

28、关于细菌L型，下列哪一项是错误的

A.细菌L型是遗传性变异的细菌B.细菌L型是细菌失去细胞壁所形成的细胞壁缺陷型

B.C.细胞壁的缺陷主要是聚糖的缺陷D.细菌L型在脱离诱导剂后可回复为原来的细菌

E.凡能破坏聚糖结构或抑制其合成的物质都能损伤细菌细胞壁而形成细菌L型

答案：A

29、常用于检测高压蒸气灭菌效果的商品菌片是

A.枯草芽胞杆菌黑色变种(ATCC9372)B.大肠埃希菌(ACTT25922)C.铜绿假单胞菌(ATCC27853)

D.嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC7953)E.金黄色葡萄球菌(ATCC25923)

答案：D

30、下列哪种显微镜观察细菌动力的效果最好

A.普通光学显微镜 B.暗视野显微镜 C.荧光显微镜D.电子显微镜E.解剖显微镜

答案：B

31、病毒与立克次体主要相同点是

A.繁殖方式B.细胞内寄生C.对抗生素敏感D.核酸类型E.可在人工培养基生长

答案：B

32、下列关于病毒错误的是

A.由单一核酸和蛋白外壳组成B.属于原核细胞型微生物C.体积微小

D.只能在活的细胞内生长繁殖E.能通过滤菌器

答案：B

33、抗原抗体复合物吸引在一起依靠

A.分子了间吸引力 B.流体静力吸引力C静电吸引力D.A+CE.B+C

答案：A

34、外周免疫器官包括

A.脾脏、胸腺和淋巴结 B.肺、骨髓和胸腺C.脾脏、黏膜相关淋巴组织和胸腺

D.淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织E.脾脏和骨髓

答案：D

35、与免疫原混合/结合后可提高免疫应答的物质称为

A.载体分子B.免疫佐剂C.激活剂D.催化剂E.抑制剂

答案：B

36、肿瘤特异性抗原一般表达于

A.胚胎细胞表面 B.胚胎细胞核内C.肿瘤细胞表面D.肿瘤细胞核内E.B+D

答案：C

37、Rh血型属于

A.异种抗原B.异嗜性抗原C.同种异型抗原D.自身抗原E.变应原

答案：C

38、抗体的免疫效应不包括

A.病毒抗体与病毒结合，阻止病毒吸附于易感细胞B.细菌抗体与细菌结合，促进细菌被裂解或吞噬

C.引起同种器官移植时发生排斥反应D.介导NK细胞和巨噬细胞等的ADCC作用E.A+B+D

答案：C

39、在人B淋巴细胞膜上的最具特征性的受体有

A.膜表面免疫球蛋白分子(SmIg) B.羊红细胞受体C.C3受体D.IgGFc受体E.丝裂原受体

答案：A

40、抗原分子诱导社会成员主产生免疫应答的能力称为

A.宿主反应性B.免疫原性C.免疫反应性D.抗原刺激性E.以上均不对

答案：B

41、免疫学主要研究的是

A.机体排除抗原性异物的功能B.机体消除损伤和衰老细胞的'功能C.机体识别、杀灭与消除自身突变细胞的功能

D.机体自我识别和排除抗原性异物的功能E.A+B+C

答案：D

42、人的IgM分子主要特征是

A.通过经典途径激活补体B.能通过胎盘C.成人接受抗原刺激后最先出现的抗体

D.比IgG移向阳极快E.血清含量最高

答案：C

43、哪种抗体是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白

A.IgDB.IgEC.IgGD.IgAE.IgM

答案：C

44、补体活化经典途径开始于

A.C1的活化B.C2的活化 C.C3的活化D.C4的活化E.C5的活化

答案：A

45、能合成大多数补体的细胞主要是

A.肝细胞和巨噬细胞B.骨髓细胞和胸腺细胞C.骨髓细胞和B细胞D.胸腺细胞和B细胞E.T细胞和B细胞

答案：A

46、补体

A.为豚鼠血清中的一种耐热的蛋白质B.由四种成分组成 C.经免疫接种可以增加

D.可与任何一对抗原抗体复合物结合E.是一组性质稳定的糖蛋白

答案：D

47、血小板在止血过程中的作用，下列哪项是错误的

A.黏附功能B.聚集功能C.释放反应D.促凝作用E.活化Ⅻ因子，启动内源凝血途径

答案：E

48、血小板α颗粒内容物为

A.纤维蛋白原、vWF和ADPB.纤维蛋白原、vWF和ATPC.纤维蛋白原、vWF和β-TG

D.纤维蛋白原、β-TG和5-HTE.纤维蛋白原、PF4和5-HT

答案：C

49、关于出生后造血，以下哪项是错误的

A.淋巴器官产生淋巴细胞B.出生后红细胞、白细胞、血小板均由骨髓产生

C.5～7岁以下幼儿几乎全部骨髓参与造血活动即为红髓

D.长骨骨髓腔为脂肪细胞所代替称为黄髓，即失去造血功能E.正常情况下，成人主要的造血器官是骨髓

答案：C

50、某细胞胞体直径为15～20μm，圆形，边缘有瘤状突起;胞核圆形，核染色质呈颗粒状;核仁1～2;胞浆量少，呈油墨蓝。该细胞为

A.原粒细胞B.原巨核细胞C.原红细胞D.原淋巴细胞E.原浆细胞

答案：C

51、尿中高浓度VitC对尿糖试带法可造成(A1型题)“基础知识”

A 不影响B 假阳性C 假阴性D 影响同班氏法E 正干扰

[本题答案] C

52、对尿液酮体检查，错误的叙述是(A1型题)“专业知识”

A Rothera法能检出乙酰乙酸B Rothera法能检出丙酮C Rothera法能检出β-羟丁酸

D 不同厂家的试带对乙酰乙酸和丙酮的灵敏度不一E Rothera法对乙酰乙酸最敏感

[本题答案] C

53、Rothera法检测尿酮体时，加入浓氨水后两液交界面立即呈淡紫红色，而后转为深紫色，结果应判断为(A1型题)“专业实践能力”

A 强阳性B 阳性C 弱阳性D 可疑E 阴性

[本题答案] B

54、尿胆红素的确证试验是(A1型题)“专业知识”

A Smith试验B Harrison法C 干化学试带法D 泡沫试验E 碘氧化法

[本题答案] B

55、尿中胆红素主要来自

A Hb的代谢产物B 白细胞的代谢产物C 脂肪的代谢产物D 铁蛋白的代谢产物E 卟啉的代谢产物

[本题答案] A

56、关于尿胆原代谢的错误叙述是

A 结合胆红素排入肠道后被转化为尿胆原B 尿胆原在肠道下端被氧化成尿胆素

C 大部分尿胆原在肠道被重吸收D 少部分尿胆原进入血液由尿中排出

E 尿胆原、尿胆素检查常称为“尿二胆”

[本题答案] E

57、当尿中尿胆原、尿胆素完全阴性时，应考虑(A1型题)“专业知识”

A 肝细胞性黄疸B 阻塞性黄疸C 溶血性黄疸D 药物性黄疸

E 肠梗阻

[本题答案] B

58、Ehrlich法测定尿胆原时，尿液与Ehrlich试剂的比例为(A1型题)“专业实践能力”

A 1:1B 1:2C 1:4D 1:5E 1:10

[本题答案] E

59、关于Ehrlich法测定尿胆原，错误的说法是(A1型题)“专业实践能力”

A 尿标本需新鲜，久置后呈假阳性反应B 尿液中如含有胆红素，应先加入氯化钙去除后再测定

C 反应时尿液与Ehrlich试剂的比例为10:1D 尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛反应，生成樱红色化合物

E 操作完毕后放置10min后呈樱红色，结果报告为阳性

[本题答案] A

60、在酸性条件下，与尿中卟胆原生成红色缩合物的试剂是(A1型题)“专业实践能力”

A 对二甲氨基苯甲醛B 氯仿C 苏丹D 40%甲醛E 75%乙醇

61、常用于乳糜微粒染色的是(A1型题)“专业知识”

A 甲基红B 苏木素C 苏丹ⅢD 中性红E 伊红

[本题答案] C

62、反映肾小管功能损害最敏感的酶是(A1型题)“基础知识”

A 尿溶菌酶B 尿淀粉酶C 尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶D 触酶E LD

[本题答案] C

63、最常见的尿结石是(A1型题)“专业知识”

A 草酸盐结石B 磷酸盐结石C 碳酸钙结石D 尿酸盐结石E 黄嘌呤结石

[本题答案] A

64、尿hCG的化学性质是(A1型题)“基础知识”

A 糖蛋白B 粘蛋白C 球蛋白D 清蛋白E 纤维蛋白

[本题答案] A

65、孕妇分泌hCG通常从受精后的第几天开始(A1型题)“基础知识”

A 第5天B 第6天C 第7天D 第8天E 第9天

[本题答案] B

66、妊娠妇女血清中hCG浓度达到高峰的时间为(A1型题)“相关专业”

A 妊娠第1wB 妊娠第2～3 wC 妊娠第4～6 D 妊娠第8～10 wE 妊娠第11～12 w

[本题答案] D

67、检测尿hCG最灵敏的方法是(A1型题)“专业知识”

A 胶乳凝集抑制试验B 血凝抑制试验C 放射免疫试验D酶联免疫吸附试验E 单克隆抗体胶体金试验

[本题答案] C

68、目前临床上最常用的hCG检查方法是(A1型题)“专业知识”

A ELISAB 单克隆抗体胶体金试验C 放射免疫试验D 胶乳凝集抑制试验E 血凝抑制试验

[本题答案] B

69、用单克隆抗体胶体金试验检测尿hCG，其结果判断中正确的是(A1型题)“专业知识”

A 试带上质控线和检测线均不显紫红色为阳性B 试带上质控线为紫红色，检测线为紫红色为阳性

C 试带上仅检测线为紫红色为阴性 D 试带上质控线和检测线均为紫红色为阴性

E 试带上仅质控线为紫红色为阳性

[本题答案] B

70、ELISA法检测hCG，包被在反应板上的是(A1型题)“专业知识”

A hCG抗原B α-hCG抗体C β-hCG单抗D 酶标β-hCG单克隆抗体E 酶标β-hCG抗原

[本题答案] C

71、关于人绒毛膜促性腺激素，正确的叙述是(A1型题)“专业知识”

A hCG是由子宫的合体滋养层细胞分泌的一种激素

B hCG的β亚单位氨基酸数量与序列几乎与TSH、FSH和LH的β亚单位相同

C hCG的α亚单位的组成有很少部分与LH相同 D hCG的β亚基氨基端最后的28～32个氨基酸是独特的

E 组成hCG的两个亚基只有连接成完整的化合物才具有活性

[本题答案] E

72、关于放射免疫法检测hCG，错误的说法是(A1型题)“专业知识”

A 利用放射标记的hCG作为放射性核素标记抗原B 此法灵敏度最高，可定量C 常用于临床常规检查

D 本法操作烦琐，存在放射性核素污染的问题E 本法检测血清hCG较尿液更准确、且稳定

[本题答案] C

73、关于hCG检查，错误的判断是(A1型题)“专业知识”

A 不全流产时，hCG可呈阳性，也可呈阴性 B 完全流产或死胎时，hCG由阳性转为阴性

C 在保胎治疗过程中，如hCG不断增高，说明保胎有效D 当hCG阴性时，不会发生异位妊娠

E 尿液hCG维持在较高水平，一般不会发生难免流产

[本题答案] D

多选题(X型题)

1、尿的颜色生理性影响因素有 “基础知识”

A 代谢产物B 大量饮水C 药物的影响D 盐类结晶E 尿素

[本题答案] ABCD

2、影响尿液颜色的主要代谢产物是“基础知识”

A 尿色素B 尿胆红素C 尿胆原D 尿卟啉E 尿素

[本题答案] ABCD

3、尿量的变化受机体的哪些因素影响“基础知识”

A 内分泌功能B 精神因素C 活动量D 饮水量E 性别

[本题答案] ABCD

4、高比密尿常见于 “专业知识”A 高热B 脱水C 心功能不全D 周围循环衰竭E 尿崩症

[本题答案] ABCD

5、有关渗透压测定，正确的说法是“专业知识”

A 尿和血清渗透压可以用冰点降低法测定B 渗透压使用前应用标准品标化

C 测定血浆渗透压时，抗凝剂应选枸橼酸钠 D尿标本测定前应离心除去不溶性颗粒及尿中有形成分

E 加入的尿量要准确

[本题答案] ABDE

6、尿液化学一般检查包括 “基础知识”

A 尿液颜色B 尿蛋白质C 尿糖D 尿激素E 酸碱度

[本题答案] BCE

7、属于生理性蛋白尿的是 “专业知识”

A 功能性蛋白尿B 老年性蛋白尿C 妊娠性蛋白尿D 直立性蛋白尿E 重金属中毒性蛋白尿

[本题答案] ABCD

8、肾病综合症患者尿液分析特点有“专业知识”

A 蛋白定性3+～4+B 以Alb增加为主C 蛋白定量常>3.5g/dayD 以α2-球蛋为主E 尿沉渣中常可见管型

[本题答案] ABCE

9、蛋白尿是指尿中蛋白质含量超过“专业知识”

A 50mg/LB 100mg/LC 150mg/24hD 200mg/24hE 250mg/24h

[本题答案] BC

10、肾小管性蛋白尿以什么蛋白增加为主“专业知识”

A α1-微球蛋白B β2-微球蛋白C γ球蛋白D T-H蛋白E 清蛋白

[本题答案] AB

11、肾小管性蛋白尿以什么蛋白增加为主 “专业知识”

A α2-MGB β2-MGC 溶菌酶D AlbE γ球蛋白

[本题答案] ABCD

12、可导致磺基水杨酸法尿蛋白定性试验出现假阳性的物质有“专业知识”

A 大剂量青霉素钾盐B 小剂量对氨基水杨C 有机碘造影剂D 高浓度草酸盐E 高浓度尿酸盐

[本题答案] ACDE

13、有关尿蛋白定性试验，正确的说法是“专业知识”

A 加热醋酸法中若加入的醋酸过多，可使阳性减弱B 加热醋酸法加入醋酸是使尿pH接近蛋白质等电点

C 磺基水杨酸法可使本周蛋白沉淀D 大剂量青霉素可使磺基水杨酸法测定尿蛋白出现假阳性反应

E 干化学试带法是利用指示剂的蛋白质误差原理

[本题答案] ABDE

14、尿本-周蛋白常见于 “专业知识”

A 多发性骨髓瘤 B 巨球蛋白血症C 原发性淀粉样变性D 肺结核E 急性粒细胞性白血病

[本题答案] ABC

15、班氏法尿糖试验可检出 “专业知识”

A 葡萄糖B 半乳糖C 果糖D 木糖E 蔗糖

[本题答案] ABC

16、Rothera法可检出尿中“专业知识”

A 丙酮B β-羟丁酸C 乙酰乙酸D 戊酸

E 胆红素

[本题答案] AC

17、引起酮尿常见的原因包括 “相关专业”

A 糖尿病酮症酸中毒B 严重腹泻、呕吐C 磷中毒D 过量服用降糖药E 输入糖盐水后

[本题答案] ABCD

18、与酮尿形成有关的因素是 “基础知识”

A 糖代谢障碍B 脂肪分解增加C 蛋白分解增加D血清酮体升高E 血酮浓度高于肾阈值

[本题答案] ABDE

19、VitC对尿液分析的干扰，正确的说法是“专业知识”

A VitC可导致Benedict法尿糖定性呈假阳性反应B VitC可导致干化学法尿糖定性呈假阴性反应

C 消除VitC干扰最简单的方法是将尿液煮沸几分钟再测定D VitC可导致Ehrlich法尿胆原定性呈假阳性反应

E 含碘酸盐层的干化学试带可自动破坏VitC的干扰

[本题答案] ABCE

20、尿液中溶菌酶含量增高见于“专业知识”

A 肾小管损坏B 肾移植早期C 肾小球炎症D 急性单核细胞性白血病化疗后E 溶骨性损害

[本题答案] ABD

21、按SDS-PAGE尿蛋白电泳结果，可将蛋白尿分为 “专业知识”

A 假性蛋白尿B 低相对分子质量蛋白尿C 中相对分子质量蛋白尿D 高相对分子质量蛋白尿

E 混合性蛋白尿

[本题答案] BCDE

22、尿纤维蛋白降解产物增加常见于“专业知识”

A 原发性纤溶亢进B 肾小管微血栓C DICD 血栓性疾病E 肾结石

[本题答案] ABCD

23、关于尿结石，正确的说法是“专业知识”

A 高蛋白、高脂、低纤维素饮食人群易患尿结石B 女性尿结石少于男性C 黑种人比黄、白种人更易患尿结石

D 最多见的尿液结石是磷酸盐结石E 临床上结石检查目前仍以化学法为主

[本题答案] ABE

24、结石的核心可以是“专业知识”

A 细菌B 草酸钙结晶C 血块D 血浆E 组织坏死产物

[本题答案] ABCE

25、形成尿液结石的因素包括 “专业知识”

A 草酸代谢异常B 钙代谢异常C 肾小管酸中毒D 尿路感染E 低蛋白、低脂肪饮食

[本题答案] ABCD

26、尿液结石形成的机制有“专业知识”

A 肾钙斑学说B 过饱和学说C 抑制物缺乏学说D 基质学说E 草酸钙学说

[本题答案] ABCD

27、hCG检测可用于”专业知识”

A 早期妊娠诊断B 流产的诊断和监察C 胎儿性病的诊断

D 妊娠滋养细胞疾病的诊断与病情观察E 可作为肿瘤标志物

[本题答案] ABDE

28、为避免hCG检测假阳性，应采取 “专业实践能力”

A 尽量采用单克隆抗体二点酶免疫法 B 育龄期妇女应于排卵后三天留尿检查

C 双侧卵巢切除的患者可肌注丙酸睾丸酮后再留尿检查D 每批试验都做阴性对照

E 每批试验都做阳性对照

[本题答案] ABC

29、人绒毛膜促性腺激素可存在于孕妇的“基础知识”

A 血液B 尿液C 初乳D 羊水E 唾液

[本题答案] ABCD

30、可与hCG α亚基发生交叉反应的激素有 “基础知识”

A LHB FSHC TSHD ACTHE T3

[本题答案] ABC

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⑵ 脂蛋白代谢的生物化学检验

脂蛋白代谢的生物化学检验

脂蛋白代谢的生物化学检验知识你了解吗?你知道应该如何对脂蛋白代谢进行化学检验吗?下面是我为大家带来的脂蛋白代谢的生物化学检验的知识，欢迎阅读。

一、血浆脂质测定

(一)总胆固醇(TC)

是血液中各脂蛋白所含胆固醇之总和，分为酯化型胆固醇(CE)和游离型胆固醇(FC)， 其中CE占60%～70%， FC占30%～40%，两种类型的比例在健康个体或个体之间是恒定的。

【测定方法】目前常规应用酶法测定，快速准确。

【参考范围】 2007年《中国成人血脂异常防治指南》规定成人TC水平：

①在5.18mmol/L(200mg/dl)以下为合适范围;②在5.18～6.19mmol/L(200～239mg/dl)范围属于边缘升高;③在6.22mmol/L(240mg/dl)以上为TC升高。

【临床意义】

1、TC浓度增高，冠心病等心血管疾病发生的危险性增高。影响TC水平的因素：

①年龄与性别：新生儿TC很低，哺乳后很快接近成人水平，之后常随年龄而上升，但到70岁后不再上升甚或有所下降。中青年期女性低于男性，女性绝经后TC水平较同年龄男性高。

②饮食习惯：长期高胆固醇、高饱和脂肪酸摄入可造成TC升高。

③种族：黑人的总胆固醇水平要高于白人。

④遗传因素。

2、TC并不是越低越好，研究显示：①TC水平降低时增加心衰时的死亡率，而增高时可增加生存率;②在冠心病中，低血总胆固醇会增加死亡率;③TC水平升高可能可以防止痴呆。

(二)总脂质

主要包括FC、CE、PL和TG等。所采用的测定方法不同，正常参考值有一定的差异

【测定方法】 脂质抽提法和直接测定法

【参考范围】成人4.0～7.5g/L;儿童3.0～6.0 g/L。

【临床意义】

1、升高：高脂血症、动脉粥样硬化、糖尿病、糖原贮积病、肾小球肾炎、肾病综合征、甲状腺功能减退、高血压等。

2、降低：甲状腺功能亢进症、急性肝炎、肝硬化、恶病质、吸收不良综合征等。

二、甘油三酯(TG)

构成脂肪组织，参与TC、CE合成及血栓形成。

【测定方法】 建议酶法(如GPO-PAP法)作为临床实验室测定血清TG的'常规方法。

【参考范围】目前《中国成人血脂异常防治指南》仍沿用1997年《血脂异常防治建议》的标准规定我国成人TG水平：①在1.7mmol/L(150mg/dl)以下为合适范围;②1.7～2.25mmol/L(150～199mg/dl)为边缘升高;③2.26mmol/L(200mg/dl)以上为升高。

【临床意义】

1.生理性改变： TG受生活条件和饮食方式、年龄、性别等因素影响。如高脂肪饮食后TG升高;运动不足、肥胖可使TG升高。成年后随年龄增大TG水平上升(中青年时，男性高于女性，50随后反之)。人群中血清TG水平呈明显的正偏态分布。

2.病理性改变： 轻至中度升高者，即2.26~5.63mmol/L(200~500 mg/dl)，患冠心病的风险增加。重度升高者，即≥5.63mmol/L(500mg/dl)时，常可伴发急性胰腺炎。

3.低TG血症：是指TG≤0.56mmol/L。原发性者见于无/低 β脂蛋白血症，为遗传性疾病;继发性者见于继发性脂质代谢异常，如消化道疾病(肝病、吸收不良综合征)内分泌疾病(甲亢、慢性肾上腺皮质功能不全)、癌症晚期、恶病质及药物的应用(如肝素等)。

三、血浆脂蛋白测定

(一)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)

高密度脂蛋白是血清中颗粒最小密度最大的一组脂蛋白,被视为人体内具有抗动脉粥样硬化的脂蛋白，同时大量的流行病资料表明，血清HDL-C水平与冠心病发病成负相关,因而HDL-C被称为“好的胆固醇”。

【测定方法】直接测定法。

【参考范围】

①合适范围为>1.04mmol/L(40mg/dl)，

②1.55mmol/L(60mg/dl)以上为升高，

③1.04mmol/L(40mg/dl)以下为降低。

【临床意义】随着HDL-C水平降低，缺血性心血管病发病危险增加，HDL-C<1.04mmol/L的人群与HDL-C≥1.55mmol/L的人群相比，缺血性心血管病危险增加50%。

(二)低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)

【原理】参考方法为超速离心法。

可供选择的方法：表面活性剂清除法(SUR法)，过氧化氢酶清除法(CAT法)，杯芳烃法(CAL法)，可溶性反应法(SOL法)和保护性试剂法(PRO法)

【参考范围】

①合适范围为<3.37mmol/L(130mg/dl)，

②边缘升高(危险阈值)为3.37~4.12mmol/L(130mg/dl~159mg/dl)，

③升高为>4.14mmol/L(160mg/dl)。

NCEP ATP Ⅲ：高脂血症患者血LDL-C的治疗目标值定为2.6mmol/L(100mg/dl)以下。

【临床意义】LDL-C水平与缺血性心血管病发生相对危险及绝对危险上升趋势及程度与TC相似。

LDL-C水平增高见于家族性高胆固醇血症(TC增高，LDL-C增高，伴有HDL-C减低)，Ⅱa型高脂蛋白血症(TC增高，LDL-C增高，TG正常或轻度增高)。

(三)脂蛋白(a)，即Lp(a)

【测定方法】 免疫浊度法和ELISA

【参考范围】 健康成人血清Lp(a)<300mg/L。

【临床意义】

1、生理性改变：一般认为Lp(a)对同一个体相当恒定，但个体间差异很大，波动范围在0～1.0mg/L。Lp(a)水平高低主要有遗传因素决定，基本不受性别、年龄、饮食、营养和环境影响;

2、病理性增高：缺血性心脑血管疾病 、心肌梗死、外科手术 、急性创伤、急性炎症 、糖尿病肾病等

3、病理性减低：肝脏疾病(慢性肝炎除外)

(四)血清载脂蛋白AⅠ和B100

【参考范围】

ApoAⅠ：1.00 g/L～1.50g/L。ApoB100：0.50 g/L～1.10g/L。

ApoAⅠ/ApoB100：1.0~2.0。

【临床意义】

1、血清ApoAⅠ主要存在于HDL中，一般情况下，它可反映HDL的水平，与HDL-C呈明显正相关，其临床意义与HDL-C基本相同。

2、ApoB100主要存在于LDL中，其含量主要代表LDL水平，与LDL-C成显着正相关，其临床意义与LDL-C基本相同。

3、临床上常将Apo AⅠ/Apo B100﹤1.0作为冠心病的危险指标。

此外，研究发现：

1、TC/HDL-C比值比非HDL-C更能预示冠心病的危险。

2、TG/HDL-C比值有效测量血脂异常、高血压和代谢综合征

3、TC/HDL-C、TG / HDL-C、Apo B / Apo A-I、LDL-C/HDL-C比值可能比单项血脂检测更具临床意义，而Apo B/Apo A-I可能是其中最具说服力的指标。

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⑶ 血清脂蛋白分离纯化方法

脂蛋白分离纯化

一、分离脂蛋白

血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆（血清）中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL，再经脱脂除去脂蛋白中的脂质，剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。

二、脱脂

由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同，脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。

1．Warnick等法

将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷（-20℃）的丙酮：无水乙醇（1：1，V/V）混合液中，脱脂液的量为样品的20倍，不断搅拌，然后在-20℃冰箱放置过夜，4℃离心沉淀，将沉淀重复脱脂一次，用氮气吹干或真空干燥，脱脂物0℃贮存待用。

2．Scanu等法

将脂蛋白加入到预冷的（-15℃）无水乙醇：无水乙醚（3：2）混合液中，不断搅拌，以12h过夜，在-10℃或4℃离心（2000r/min），去上清留沉淀，再重复脱脂一次。用N2或真空干燥，0℃贮存待用。

⑷ 载脂蛋白E的检测方法

等电聚焦（IEF）
由于三种主要ApoE异构体E2、E3和E4的等电点（pⅠ）分别为5.89、6.02和6.68，E4比E3多一个正电荷，而E2比E3少一个正电荷。因此，可应用1EF检测这些异构体间电荷差异而确定不同ApoE表型。传统ApoE表型检测方法多采用超速离心法或化学沉淀法分离VLDL，脱脂后进行IEF，然后进行染色分析。这种方法需要血清量较多，昂贵、费时，又需要大型设备，不适合大规模研究。ApoE异构体之间染色程度之间差异及电泳过程中泳动距离的变异性也造成结果的不稳定性。 免疫印迹法（immunoblotting）
血清脱脂后，经IEF电泳将ApoE与其他蛋白质分离，然后将凝胶中蛋白质转移到硝酸纤维素（NC）膜上，用抗ApoE抗体作为一抗进行免疫印迹反应或采用直接的免疫固定法，即可灵敏而特异地显示出ApoE区带的位置，从而确定ApoE表型。此方法利用抗原-抗体的特异反应，排除了血清其他蛋白质的干扰，不需超速离心分离VLDL，血清用量少，是国内外实验室检测ApoE表型常用的方法之一。但此类方法亦存在一些缺点，如对于存在与普遍异构体具有相同电荷的罕见异构体标本，或在糖尿病等病理状态时，由于转录后修饰引起蛋白质变化的标本检测时，就会给出错误的结果。 双相电泳（two-dimensional electrophoresis）
第一相应用IEF电泳将等电点不同的蛋白质分离；第二相根据蛋白质分子量不同及浓度的差异，应用SDS-PAGE进行分离，由此确定ApoE表型。此技术能解决IEF遇到的一些转录后修饰的问题，临床标本用量也很少，并且可以同时进行定性和定量分析，但由于成本昂贵而且费时，有时也难以清晰地分辨表型，故临床上应用较少。

⑸ 蛋白质的提取方法有哪些

众所周知，人的生命活动不能缺少蛋白质，很多食物里面都含有蛋白质成分，正常的饮食可以为身体补充蛋白质。实际上，在生物化学研究领域，蛋白质的分离提取技术具有广泛的应用，想要把蛋白质提取出来非常不容易，需要经过很多工序，并且要找到专业的操作技术，现在有下列这些方法可以提取蛋白质。
1、超速离心法
此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内，达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。
用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时，除个别成分外，极难将某一抗原成分分离出来，故只用于少数大分子抗原的分离，如IgM、C1q，甲状腺球蛋白等，以及一些比重较轻的抗原物质如载脂蛋白A、B等。多数的中、小分子量蛋白质采用此种方法很难纯化。
2、选择性沉淀法
其原理多根据各蛋白质理化特性的差异，采用各种沉淀剂或改变某些条件促使蛋白质抗原成分沉淀，从而达到纯化的目的。最常用的方法是盐析沉淀法。
盐析法的原理
蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目，亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。蛋白质溶液中加入中性盐后，由于中性盐与水分子的亲和力大于蛋白质，致使蛋白质分子周围的水化层减弱乃至消失。同时，中性盐加入蛋白质溶液后由于离子强度发生改变，蛋白质表面的电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。由于各种蛋白质在不同盐浓度中的溶解度不同，不同饱和度的盐溶液沉淀的蛋白质不同，从而使之从其他蛋白分离出来。最常用的盐溶液是33%～50%饱和度的硫酸铵。盐析法简单方便，可用于蛋白质抗原的粗提，丙种球蛋白的提取，蛋白质的浓缩等。盐析法提纯的抗原纯度不高，只适用抗原的初步纯化。
3、凝胶层析法
凝胶层析是利用分子筛作用对蛋白质进行分离。凝胶是具有三维空间多孔网状结构的物质，经过适当的溶液平衡后，装入层析柱。一种含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶层析柱时，大分子物质不易进入凝胶颗粒的微孔，只能分布于颗粒之间，因此在洗脱时向下移动的速度较快，最先被洗脱。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，洗脱时向下移动的速度较慢，随后被洗脱。因此，蛋白质分子按分子大小被分离。
4、离子交换层析法
离子交换层析的原理是利用一些带离子基团的纤维素或凝胶，吸附交换带相反电荷的蛋白质抗原。由于各种蛋白质的等电点不同，所带的电荷量不同，与纤维素（或凝胶）结合的能力有差别。当梯度洗脱时，逐步增加流动相的离子强度，使加入的离子与蛋白质竞争纤维素上的电荷位置，从而使吸附的蛋白与离子交换剂解离。
在离子交换色谱技术中常用的离子交换剂有以下几种
①具有离子交换基团的纤维素，如羧甲基（CM）纤维素、DEAE-纤维素
②具有离子交换基团的交联葡聚糖、琼脂糖和聚丙烯酰胺
③凝胶合成的高度交联树脂。
5、亲和层析
亲和层析是利用生物大分子的生物特异性，即生物大分子间所具有专一亲和力而设计的层析技术。例如抗原和抗体、酶和酶抑制剂（或配体）、酶蛋白和辅酶、激素和受体、IgG和葡萄球菌蛋白A（SPA）等物质间具有一种特殊的亲和力。例如提纯IgG时，可将SPA吸附在一个惰性的固相基质（如Speharose2B、4B、6B等）上，并制备成层析柱。当样品流经层析柱时，待分离的IgG可与SPA发生特异性结合，其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度或pH值，IgG与固相基质上的SPA解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的IgG。

⑹ 载脂蛋白CII的介绍

脂蛋白的蛋白部分是一种特殊蛋白，因与脂质结合担负在血浆运转脂类的功能，故称为载脂蛋白（apoprotein）。已发现有 20 多种。常用的分类法是 Aiaupovic 提出的 ABC 分类法，按载脂蛋白的组成分为 ApoA 、 B 、C、 D 、 E 。

⑺ 血脂检查的测定方法

医院中开展的血脂检查，主要是对血液（血浆）中所含脂类进行的一种定量测定方法。常用的检查项目一般包括以下几类：①总胆固醇（Tch或TC）和胆固醇酯（chE）测定 。
②三酰甘油（TG）测定。
③脂蛋白组分和亚组分测定。又可再分为高密度脂蛋白（HDL，亦称为高密度胆固醇，HDL-C），低密度脂蛋白（LDL，亦称为低密度胆固醇，LDL-C）和极低密度脂蛋白 (VLDL，亦称为极低密度胆固醇，VLD-C）三类。
④磷脂（PL），主要是磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和神经磷脂等测定。
⑤非脂化脂肪酸（又称游离脂肪酸，FFA）测定。
⑥微量的类固醇激素和脂溶性维生素测定。
⑦载脂蛋白测定。

⑻ 血脂各指标测定方法有哪些

在生化检查的时候，经常会查血脂四项，就是甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇。
一般甘油三酯的正常范围是小于1.7mmol/L，如果超过2.3mmol/L，就可能会带来身体的损害。高密度脂蛋白胆固醇是一个好的胆固醇，能够从外周把血管内皮上的胆固醇运回肝脏，所以称它为能清除外周胆固醇的胆固醇水平，所以它的水平增高，心血管疾病的风险是降低的，正常值一般是要在1.0mmol/L以上。
低密度脂蛋白胆固醇是肝脏合成的脂蛋白所携带的胆固醇，它把胆固醇运送到周围组织来供给它们使用，低密度脂蛋白胆固醇水平增高，心脑血管疾病的风险就会增加，所以低密度脂蛋白胆固醇有不同的正常范围。如果这个人没有心脑血管疾病的风险，一般认为低密度脂蛋白胆固醇的水平只要小于3.4mmol/L就是可以的。
但是如果本身是糖尿病、高血压，或者已经出现了颈动脉斑块形成，这部分患者的正常范围就可能是在2.6mmol/L以下了，需要在1.8~2.6mmol/L。如果更严重的一些患者，已经出现了血管病变，比如冠心病、下肢血管闭塞，或者颈动脉狭窄70%以上，这部分人群的正常范围就应当是在1.8mmol/L以下。因此不同人群有一个不同的正常范围，或者有不同的适宜范围，可能更合理一些。

⑼ 常用生化检测项目分析方法举例及参数设置

常用生化检测项目分析方法举例及参数设置

常用生化检测项目有哪些你知道吗?你对常用生化检测项目了解吗?下面是我为大家带来的关于常用生化检测项目分析方法举例及参数设置的知识，欢迎阅读。

一、常用生化检测项目

1.终点法检测常用的有总胆红素(氧化法或重氮法)、结合胆红素(氧化法或重氮法)、血清总蛋白(双缩脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、总胆汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白胆固醇(直接测定法)、钙(偶氮砷Ⅲ法)、磷(紫外法)、镁(二甲苯胺蓝法)等。以上项目中，除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外，其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法，包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用。

2.固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。

3.连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等，也可用连续监测法。

4.透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目，多数属免疫比浊法，载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗"O"、类风湿因子，以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。

二、分析参数设置

分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等，其程序均已经固化在存储器里，用户不能修改。各种测定项目的分析参数(analysisparamete)大部分也已设计好，存于磁盘中，供用户使用;目前大多数生化分析仪为开放式，用户可以更改这些参数。生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道，由用户自己设定分析参数。因此必须理解各参数的确切意义。

一、分析参数介绍

(一)必选分析参数

这类参数是分析仪检测的前提条件，没有这些参数无法进行检测。

1.试验名称 试验名称(test code)是指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。

2.方法类型(也称反应模式) 方法类型(assay)有终点法、两点法、连续监测法等，根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。

3.反应温度 一般有30℃、37℃可供选择，通常固定为37℃。

4.主波长 主波长(primary wavelength)是指定一个与被测物质反应产物的光吸收有关的波长。

5.次波长 次波长(secondary wavelength)是在使用双波长时，要指定一个与主波长、干扰物质光吸收有关的波长。

6.反应方向 反应方向(response direction)有正向反应和负向反应两种，吸光度增加为正向反应，吸光度下降为负向反应。

7.样品量 样品量(sampling volum)一般是2μl～35μl，以0.1μl步进，个别分析仪最少能达到1.6μl。可设置常量、减量和增量。

8. 第一试剂量 第一试剂量(first regengt volum)一般是20～300μl，以1μl步进。

9. 第二试剂量 第二试剂量(second regengt volum)一般也是20～300μl，以1μl步进。

10.总反应容量 总反应容量(total reacting volum)在不同的分析仪有一个不同的规定范围，一般是180～350μl，个别仪器能减少至120μl。总反应容量太少无法进行吸光度测定。

11.孵育时间 孵育时间(incubate time)在终点法是样品与试剂混匀开始至反应终点为止的时间，在两点法是第一个吸光度选择点开始至第二个吸光度选择点为止的时间。

12.延迟时间 延迟时间(delay time)在连续监测法中样品与反应试剂(第二试剂)混匀开始至连续监测期第一个吸光度选择点之间的时间。

13.连续监测时间 连续监测时间(continuous monitoring time)在延迟时间之后即开始，一般为60～120s，不少于4个吸光度检测点(3个吸光度变化值)。

14.校准液个数及浓度 校准曲线线性好并通过坐标零点的，可采用一个校准液(calibrator);线性好但不通过坐标零点，应使用两个校准液;对于校准曲线呈非线性者，必须使用两个以上校准液。每一个校准液都要有一个合适的浓度。

15.校准K值或理论K值 通过校准得到的K值为校准K值(calibrate coefficient)或由计算得出的K值为理论K值。

16.线性范围 即方法的线性范围(linearity range)，超过此范围应增加样品量或减少样品量重测。与试剂/样品比值有关。

17.小数点位数 检测结果的小数点位数(decimal point digit)。

(二)备选分析参数

这类分析参数与检测结果的准确性有关，一般来说不设置这类分析参数，分析仪也能检测出结果，但若样品中待测物浓度太高等，检测结果可能不准确。

1.样品预稀释 设置样品量、稀释剂量和稀释后样品量三个数值，便可在分析前自动对样品进行高倍稀释。

2.底物耗尽值 底物耗尽值(substrate exhaust limit)在负反应的酶活性测定中，可设置此参数，以规定一个吸光度下降限。若低于此限时底物已太少，不足以维持零级反应而导致检测结果不准确。

3.前区检查 免疫比浊法中应用，以判断是否有抗原过剩。将终点法最后两个吸光度值的差别(ΔA)设置一个限值，如果后一点的吸光度比前一点低，表示已有抗原过剩，应稀释样品后重测。

4.试剂空白吸光度范围 超过此设定范围表示试剂已变质，应更换合格试剂。

5.试剂空白速率 连续监测法中使用，是试剂本身在监测过程中没有化学反应时的变化速率。

6.方法学补偿系数 用于校准不同分析方法间测定结果的一致性，有斜率和截距两个参数。

7.参考值范围 对超过此范围的测定结果，仪器会打印出提示。

(三)某些参数的特殊意义

1.最小样品量 最小样品量是指分析仪进样针能在规定的误差范围内吸取的最小样品量。一般分析仪的最小样品量是2μl，目前也有小至1.6μl的。在样品含高浓度代谢产物或高活性酶浓度的情况下往往需采用分析仪的最小样品量作为减量参数，从而使分析仪检测范围(与线性范围不同)的上限得以扩大。

2.最大试剂量 方法灵敏度很高而线性上限低的检测项目，如血清白蛋白的溴甲酚氯法测定，以往手工法操作时样品量10μl，试剂量4ml，这样试剂量/样品量比例(R/S)为200，线性上限则为60g/L。此法移植到分析仪上后，R/S却很难达到200，致使线性上限变低。因此对这类检测项目最大试剂量非常重要。

3.弹性速率 在酶活性测定中，当酶活性太高，在连续监测期中已不呈线性反应时，有些仪器具有弹性速率(flexrate)功能，能自动选择反应曲线上连续监测期中仍呈线性的吸光度数据计算结果，使酶活性测定的线性范围得以扩大。如AST可从1000U/L扩展至4000U/L，从而减少稀释及重测次数、降低成本。

4.试剂空白速率 当样品中存在胆红素时，胆红素对碱性苦味酸速率法或两点法测定肌酐有负干扰。因为胆红素在肌酐检测的波长505nm有较高光吸收，而且胆红素在碱性环境中可被氧化转变，因而在肌酐反应过程中胆红素的光吸收呈下降趋势。若在加入第一试剂后一段时间内设置试剂空白速率，因为此段中苦味酸尚未与肌酐反应，而胆红素在第一试剂的碱性环境中已同样被氧化转变，因而以第二试剂加入后的速率变化，减去试剂空白速率变化，便可消除胆红素的负干扰，见图7-8。

二、单波长和双波长方式

(一)概念

采用一个波长检测物质的光吸收强度的`方式称为单波长(mono-wavelength)方式。当反应液中含有一种组分，或在混合反应液中待测组分的吸收峰与其它共存物质的吸收波长无重叠时，可以选用。在吸光度检测中，使用一个主波长和一个次波长的称双波长方式。当反应液中存在干扰物的较大吸收、从而影响测定结果的准确性时，采用双波长方式更好。

(二)双波长的作用

双波长(di-wavelength)测定优点是①消除噪音干扰;②减少杂散光影响;③减少样品本身光吸收的干扰。从光源，到比色杯、单色器、检测器的整个光路系统中，均存在着随时间发生变化的不稳定的检测信号，即噪音，而双波长检测是同时进行的，两种波长检测产生的噪音基本上相同，因而能消除噪音干扰。当样品中存在非化学反应的干扰物如甘油三酯、血红蛋白、胆红素等时，会产生非特异性的光吸收，而干扰测定结果的准确性。采用双波长方式测定可以部分消除这类干扰，提高检测的准确性。

(三)次波长的确定方法

当被测物的主波长确定之后，再选择次波长。如根据甘油三酯等干扰物吸收光谱特征，选择次波长，使干扰物在主、次波长处有尽可能相同的光吸收值，而被测物在主、次波长处的光吸收值应有较大的差异。一般来说，次波长应大于主波长100nm。以主波长与次波长吸光度差来计算结果。

(四)双波长的具体应用

对于某些反应速度快且无法设置为两点终点法的分析项目，尤其是单试剂分析中，可以利用双波长的方式来部分消除样品本身的光吸收干扰。目前用单试剂法测定的项目应用双波长的为血清总蛋白(双缩脲法)主波长500nm，次波长576nm;血清白蛋白(溴甲酚氯法)主、次波长分别为600和700nm;钙(偶氮砷Ⅲ法)主、次波长分别为 660、770nm;磷(紫外比色法)主、次波长为340、405nm，镁(二甲苯胺蓝法)主、次波长为505和 600nm。

三、单试剂和双试剂方式

反应过程中只加一次试剂称单试剂方式，加两次试剂便为双试剂方式。目前的生化分析仪大多可用双试剂方式分析，其优点是：①可提高试剂的稳定性，多数双试剂混合成单一工作试剂时，其稳定时间缩短;②能设置两点终点法，来消除来自样品本身的光吸收干扰;③在某些项目检测时能消除非特异性化学反应的干扰。如血清ALT测定，血清中的内源性丙酮酸及其它酮酸也可与试剂中的指示酶(乳酸脱氢酶)起反应，使结果偏高。若先加入缺乏α-酮戊二酸的第一试剂，使其它酮酸与指示酶反应之后再加入含有α-酮戊二酸的第二试剂，启动真正的ALT酶促反应生成丙酮酸，而丙酮酸与乳酸脱氢酶的反应消耗的NAD+能真正反映ALT的活性，从而消除以上副反应的影响。

四、测定过程的自动监测

各种自动生化分析仪或多或少都具有对测定过程进行各种监测的功能，以便在没有人"监督"化学反应的情况下提高检测的准确性。高档分析仪的监测功能更强。

1.试剂空白监测 每种试剂都有一定的空白吸光度范围，试剂空白吸光度的改变往往提示着该试剂的变质：如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因酚被氧化为醌而变为红色;碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或硝基苯胺而变黄;有些试剂久置后变浑浊。这些情况均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应检测项目，其试剂在放置过程中空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降等。

试剂空白的测定方法有两种：①每瓶试剂在使用前通过对试剂空白校准来确定试剂空白吸光度，这种方式适用于先取样品后加试剂的分析仪。②每个样品测定前均检测试剂空白吸光度，适用于先加试剂后取样品的分析仪。

2.试剂空白变化速率监测 一些酶试剂在反应温度下不稳定，其空白吸光度可随着时间逐渐发生变化，这种变化的主要原因与工具酶或辅酶的纯度有关，且因试剂的组成和生产厂家的不同而不同。这种变化会影响测定结果的准确性，一般使结果偏高。如果设置此项监测，分析仪在结果计算时会自动减去试剂空白变化速率。在以监测NAD(P)H减少为指示反应的酶活性测定中，空白速率可监测并消除由NADH自身氧化所造成的吸光度下降;在色素原为底物的酶活性测定中，空白速率可监测并消除底物自身分解造成的吸光度升高。有关空白速率监测在胆红素对碱性苦味酸速率法测定肌酐负干扰消除中的作用，已如前述。

3.样品信息监测 由于样品的溶血、脂浊、黄疸会对测定结果产生非化学反应的干扰。根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性，用双波长或多波长检测其性质和程度，一般是测定样品在600nm/570nm、700nm/660nm和505nm/480nm吸光度比值的大小来分别判断样品溶血、脂浊和黄疸程度。然后在结果计算时自动减去这部分干扰，这将有利于提高分析结果的可靠性。

4.结果可靠性监测

(1)终点监测：终点法测定要判断所选的测光点是否到达终点或平衡点。一些分析仪在所选终点后再选一个测光点，比较这两点吸光度的差异来判断反应是否到达终点。

(2)线性期监测：连续监测法选择时间-吸光度反应曲线上的线性期来计算酶活性或被测物浓度，因此仪器要确定此连续监测期是否呈线性。其监测方法为①将连续监测到的各吸光度值进行线性回归，计算出各点的方差，根据方差值的大小来判断是否呈线性;②取连续监测期开始若干点的变化速率与连续监测期最后若干点的变化速率进行比较，来判断是否为线性期。

5.底物消耗的监测 在连续监测法测定酶活性时，如果在监测期内吸光度上升或下降超过其底物耗尽值，则说明该样品酶活性非常高，底物将被耗尽，监测期的吸光度将偏离线性，使测定结果不可靠。此时不打印结果或打印结果同时也打印出底物耗尽提示，该样品应稀释一定的倍数重新测定。此监测对于采用负反应分析酶活性的方法甚为重要。见图7-9

6.方法线性范围监测 每种待测物分析都有一个可测定的浓度或活性范围，样品结果若超过此范围，分析仪将显示测定结果超过线性范围的提示，多数分析仪会自动将样品减量或增量重新测定。

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