氯霉素的检测方法

⑴ 蜂蜜中氯霉素药物的残留如何快速检测，用哪个品牌的比较好

可以用美正生物的氯霉素快速检测试纸条，本产品用于快速检测蜂蜜中氯霉素药物的残留，适用于各类企业、检测机构、监督部门的现场快速检测。
检测步骤
【样品处理】
1. 称取3.0±0.03g样本至50mL聚苯乙烯离心管中，加入3mL去离子水振荡5分钟，使其充分溶解；
2. 加入6mL乙酸乙酯振荡30秒～1分钟；
3. 室温4000r/min 离心5分钟（如离心后出现乳化现象，可手动摇晃后继续离心5分钟或置于热水中待溶解后再次离 心）；
4. 移取4mL上层有机相至离心管中（离心管可根据氮吹仪 型号选择不同规格），于50～60℃氮气流下吹干； 5. 加入800μL氯霉素样本稀释液，充分振荡后，取200 μL进行分析。
【检测步骤】
1. 使用前将试纸条、微孔试剂、样本稀释液和待检样本恢复 至室温（20～25℃）；一次检测样本数量不要超过8个； 如果一次检测样本数量超过8个，请按照8个一组，分批检测。
2. 取所需数量的微孔和试纸条，并做好标记，将微孔置于40℃干式加热器上。
3. 用移液器取200μL振荡混匀的待检样本加入微孔并反复 吸打直至红色固体充分混匀进行孵育，计时3分钟。
4. 将试纸条立即插入微孔中进行反应，计时5分钟。
5. 取出试纸条去除下端样品垫并在1分钟内根据图示进行 判读或者配合仪器判读。
注意事项
1. 不同批次试纸条、微孔、二维码均不能混用。
2. 枪头与离心管等耗材不可混用，以免交叉污染。
3. 产品为一次性消耗品，请在有效期内使用。
4. 请勿触摸试纸条中央白色膜区，检测时避免阳光直射和风 直吹，如不小心接触后请遗弃。
5. 微孔打开时不要用力过猛，以免有粉末飞出。已开封的产 品请按照要求密封储存，并尽快使用，以免影响检测结果。
6. 请勿用自来水、纯水及蒸馏水等做阴性对照。
7. 遇到样本检测结果呈阳性，建议重复测试一次。
8. 试纸条检测线出现明显断点，会影响检测结果，建议重复测试一次。
9. 反应后，务必立即去掉试纸条下端的样品垫，并在1分钟内判读结果，因为试纸条干燥后颜色深度会有变化，影响最后的结果。
10. 试剂从试剂桶取出后，请立即盖好试剂桶盖。如果一次用不完8个微孔，需将剩余微孔立即放回到装有干燥剂的试 剂桶中密封保存。
11. 本产品检测结果仅供参考，如需确证，请参照国家相关标准方法。

⑵ 氯霉素的检测方法有哪些啊

液相色谱（LC）法
气相色谱（GC）法
液—质联用（LC/MS)
气—质联用（GC/MS)法

⑶ 猪肉中氯霉素残留的检测

可参照赛分科技的一个检测方法
（一）样品准备
1、 称取10g待检猪肉样品于50mL具塞离心管中；
2、 加入2~3g无水硫酸钠和30 mL乙酸乙酯，均质1 min，以5000rpm 离心5min后，用吸管吸出上层乙酸乙酯于浓缩瓶中，残渣用15 mL乙酸乙酯重复提取，合并提取液；
3、 提取液在50℃水浴中旋转蒸发（或氮气吹干）；
4、 加入1mL 甲醇-氯化钠溶液（20%甲醇：4g/100mL氯化钠溶液=20 : 80, v/v）和4 mL 正己烷，充分振摇后，转移至10mL具塞离心管中，用1mL甲醇-氯化钠溶液清洗浓缩瓶，合并清洗液；
5、 涡旋0.5min，经3000rpm离心3min后，用吸管吸去正己烷，加入4 mL正己烷，重复以上操作；
6、 加入4mL乙酸乙酯提取水相2次，将乙酸乙酯提取液在50oC下浓缩至干（或氮气吹干），用10mL水溶解残渣。
注：本步骤参考《GB/T 9695.32-2009 肉与肉制品 氯霉素含量的测定》
（二）SPE净化
1. 活化：取固相萃取小柱H2P 60mg/3mL（订货号：SSH2P063），用2mL 甲醇，2mL水活化。
2. 上样：取1mL提取液上样
3. 淋洗：1mL的20%甲醇
4. 洗脱：2mL甲醇
5. 浓缩：氮气吹干，1mL 流动相溶解，0.45μm 滤膜过滤
（三）液相检测
采用赛分BR-C18，120Å, 5μm，4.6×250mm色谱柱（订货号：102185-4625）进行检测，流动相为50%甲醇，流速为1ml/min，检测波长为278nm，进样量为20μL。
H2P固相萃取小柱可除去样品中大部分的杂质，避免了杂质对实验结果的干扰，同时延长了色谱柱的使用寿命。回收率测定表明氯霉素的回收率保持在95%-105%的高水平上。

⑷ 氯霉素检测的反应原理

ELISA法：
氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。在整个反应当中，如果样品中的氯霉素残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。

⑸ 怎样检测氯霉素

（组织）氯霉素(CAP)j胶体金快速检测卡用于快速检测水产品（鱼虾蟹等）、畜禽肉及水体沉积物中的氯霉素残留，整个检测过程只需要30分钟左右，本试纸条为定性检测，检测卡灵敏度为0.2ppb。

（水体）氯霉素(CAP)j胶体金快速检测卡用于快速检测水体中的氯霉素残留，整个检测过程只需要10分钟左右，本试纸条为定性检测，灵敏度为0.3ppb。

检测原理：

氯霉素检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样品中的氯霉素在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线（T）上氯霉素－蛋白偶联物的结合。如果样品中氯霉素含量大于0.2ppb，检测线（T）线显色比C线浅，结果为阳性；反之，检测线（T）显色比质控线（C）深或者一样深，结果为阴性。

结果判定：

1、 阴性（-）：检测线（T）显色比质控线（C）深或者一样深，表示样品中氯霉素浓度低于检测限或者不含氯霉素。

2、 阳性（+）：检测线（T）线显色比C线浅，或者检测线（T）不显色，表示样品中氯霉素残留浓度大于检测限。

3、 无效：质控线（C）不显色；可能是操作不当或者检测卡失效。用新的检测卡重新检测。

⑹ 氯霉素定量及定性检测的方法有哪些

氯霉素残留检测的主 要方法。阐述了微生物法检测氯霉素的优缺点,比较了免疫学方法中放射免疫法(RIA)和酶标免疫法(EIA),指出了免疫学方法适合于大规模推广使用为一 种快速筛选方法,可以采用该方法进行样品筛选;对色谱学方法中液相色谱(LC)法、气相色谱(GC)法、液质联用(LC/MS)法和气质联用(GC /MS)法的研究做了综合、比较,指出了它们各自的优缺点,并认为色谱学方法中气质联用(GC/MS)法和液质联用法可同时定量和定性,灵敏度高、检测限 低,将是今后氯霉素残留最主要的检测方法。

⑺ 氯霉素检测的注意事项

1、使用前先将氯霉素标准溶液6瓶，浓缩萃取稀释液，浓缩洗涤液，酶标记物，底物溶液及微量测试孔条置于室温下，回温30分钟。
2、原倍萃取稀释液及洗涤液配制
用蒸馏水将10倍浓缩萃取稀释液及浓缩洗涤液分别以1： 9的比例稀释(即1mL浓缩液+9mL蒸馏水)，即可作为样品萃取稀释液与微孔板清洗液。
3、回温后，取出所需微量测试孔条，将剩余板条立即放回铝箔袋中用胶带封好，置于40℃保存。 针对以下抗生素进行交叉反应之测试，结果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1% 生乳(添加1.0ppb)104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb)90~110%
虾及鱼肉(添加0.5ppb)95~110%
鸡肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb)100~120%
内脏(添加1.0ppb) 100~120%
饲料(添加2.0ppb)80~110%

⑻ 氯霉素检测的主要方法

氯霉素检测方法包括微生物法、色谱法、免疫测定法。微生物法易操作，费用低，但灵敏度低，特异性差。色谱法精确可靠、灵敏度高，检测极限可达到0. 1μgPkg ，但前处理步骤多，回收率偏低 。免疫测定具有灵敏度高、特异性强、对仪器设备和人员素质要求低以及样品前处理简单等优点，适于现场监控和大规模样品筛选。

⑼ 检测氯霉素的行业标准

氯霉素检验方法 －－这是我们公司现在使用的方法，发上来大家指导指导
1. 试剂与材料
1.1氯霉素试剂盒，德国r-Biopharm公司
1.2乙酸乙酯，分析纯
1.3双蒸水
2.仪器与设备
2.1微孔板酶标仪，MuLtisKan Ascent,芬兰Labsystens公司。
2.2 8道移液器，50-300uL
2.3 单道移液器，5-50ul,20-200ml,100-1000ul,1-5ml
2.4 离心机。
2.5 旋转蒸发器，配真空冷却系统。
2.6 液体混匀器。
3.样品前处理
3.1样品提取 称取约2g（准确至0.01g）蜂蜜于20ml具塞试管中，加入用4ml双蒸水溶解，再加4ml乙酸乙酯，在混匀器上混匀10分钟。将上述样液转至10ml离心管中，以4000转/分离心12分钟
3.2净化 从上述离心管中移取1ml上层的乙酸乙酯（相当于0.5样品）至另一试管中，60℃以下减压旋转蒸干，残留物用0.5ml缓冲液1溶液，此为样品溶液，供酶标仪测定
4.测定
4.1 酶标仪测定条件
酶标仪测定波长为450nm
4.2 酶标测定（以下操作在20-24℃室温条件下进行）
4.2.1测定之前的准备工作
将氯霉素酶试剂盒附带的所有试剂回升至室温20-24℃。其中氯霉素酶标记物、氯霉素抗体用缓冲液1以1；11的比例稀释，在吸取浓缩液之前，要仔细振摇使之充分混匀
4.2.2 标准应用的制备；50uL标准浓缩液（氯霉素试剂盒附带）用450uL缓冲液1稀释并混合均匀用玻璃不能用塑料瓶
标准应用液1：50uL标准浓缩液1用450uL缓冲液1稀释oppt
标准应用液2：50uL标准浓缩液2用450uL缓冲液1稀释50ppt
标准应用液3：50uL标准浓缩液3用450uL缓冲液1稀释150ppt
标准应用液4：50uL标准浓缩液4用450uL缓冲液1稀释450 ppt
标准应用液5：50uL标准浓缩液5用450uL缓冲液1稀释1350ppt
标准应用液6：50uL标准浓缩液6用450uL缓冲液1稀释4050ppt
4.2.3.测定程序：
取出实验需要数量的微孔板条，按顺序加入50ul标准或处理好的样品到各自的微孔中，加入50ul稀%@FI
释了的酶标记物到微孔底部，加入50ul稀释了的抗体溶液到每一个微孔中充分混合（轻轻振荡板并在桌面上做圆周运动以混均）用薄膜覆盖板上在室温孵育2小时（注意在加入抗体的过程中移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体，避免交叉污染）
倒出孔中的液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打（拍打4次）以保证完全除去孔中的液体，用250ul蒸馏水充入孔中（轻轻振荡板并在桌面上做圆周运动），再次倒掉微孔中液体，重复操作两遍。注意在洗板过程中加洗涤水的移液器管尖必须置于微孔板上方约1厘米处打出洗涤水。洗板后立即进行下一步
操作不要让板孔干燥。
迅速加入50ul基质及50ul发色剂到每一个孔中，轻轻振荡板并在桌面做圆
周运动以混均。室温孵育微孔板30分钟，注意暗处避光放置。在恒温孵育期间准备好反应停止液
加入100ul反应停止液，混匀。立即测量，如果不能立即测量请放置在暗处并于60分钟内450nm测量OD值
5.试剂空白
以2 ml双蒸水代替样品，按上述步骤提取
6结果与计算
6.1绘制标准曲线法
所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准（0标准）的吸光度值再乘以100，因此0标准等于100%，吸光度值的百分比表示。
标准（或样品）的吸光度值360
×100 ＝ %吸光度
0标准的吸光度值

计算标准的值并绘成一个以氯霉素浓度（ng/kg）为半对数坐标系统的曲线图，曲线在50-1350ng/kg(ppt)范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度（ng/kg）可以从校正曲线上读出。为了获得样品中氯霉素的实际浓度（ng/kg）,从校正曲线上读出的浓度值必须乘以相对应的稀释系数。（可采用Labsystens公司提供的MuLtisKan Ascent软件，从计算机上编制测定程序并进行数据处理，可直接读取样品氯霉素的浓度值）。7.方法的检出限、回收率
7.1本方法氯霉素的检出限为125ng/kg(ppt)
7.2 回收率: 90%
对蜂蜜样品进行的回收率实验,结果如下表示.
样品本底值(ng/kg)添加值(ng/kg)测定值回收率
蜂蜜

⑽ 水产品中的氯霉素残留用什么方法检测比较好

氯霉素主要液质联用和气质联用的方法 一般用液质方法好点 气质方法需要衍生化，衍生化的方法对定量都有一定的风险。
GB/T 20756-2006 可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
SN/T 1864-2007 进出口动物源食品中氯霉素残留量的检测方法 液相色谱-串联质谱法
农业部781号公告-2-2006 动物源食品中氯霉素残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法

如果你实在要用气质联用方法
农业部781号公告-1-2006 动物源食品中氯霉素残留量的测定 气相色谱-质谱法
农业部958号公告-14-2007 水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素残留量的测定 气相色谱-质谱法
SC/T 3018-2004 水产品中氯霉素残留量的测定 气相色谱法

当然还有酶联免疫 半定量的方法
DB34/T 821-2008 动物组织中氯霉素的残留测定——酶联免疫吸附法
SN/T 1604-2005 进出口动物源性食品中氯霉素残留量的检验方法 酶联免疫法
农业部1025号公告-26-2008 动物源食品中氯霉素残留检测 酶联免疫吸附法

我们一般都是用液质联用的检测方法 检出限比较低 而且定量结果比较稳定可靠。