1. 用什么溶液可以检测葡萄糖
氢氧化钠跟硫酸铜混合起来的斐林试剂可以检测葡萄糖
也可以检测还原糖
2. 如何测定葡萄中的葡萄糖含量
葡萄糖氧化酶法。
1.原理
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质,该有色物质在625 nm波长下与葡萄糖浓度成正比。通过侧定蓝色物质的吸光度值可计算样品中葡萄糖的含量。
2.仪器
①实验室常用设备。
②722型分光光度计。
3.试剂
除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
①三氯乙酸(40%):称取4.0 g三氯乙酸,用水溶解并稀释至100 mL。
②无水乙醇。
③2 mol·L-1NaOH溶液:称取8 g NaOH,用水溶解并稀释至100 mL。④1%邻联甲苯胺溶液:称取0.1 g邻联甲苯胺溶解于10 mL无水乙醇中,倒人棕色瓶中,4℃冰箱保存。
⑤乙酸缓冲液(pH5.O):称取14.28 g乙酸钠(CH。COONa.3H20)溶于水中,加入2.7mL冰乙酸,使pH为5.O,用水定容至1L。
⑥葡萄糖氧化酶溶液:称取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma公司)用水溶解,使酶含量为100U/mL。4℃冰箱保存一周。
⑦过氧化物酶溶液:0.010 g辣根过氧化物酶溶于10 mL7J(~,4℃冰箱保存一周。
⑧酶溶液:取100 mL乙酸缓冲液,分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各l mL,混匀。4℃冰箱可保存7周。
⑨酶空白液:取100 mI。乙酸缓冲液,分别加人邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各l mL,混匀。4℃冰箱保存1周。(注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶)
⑩葡萄糖标准液:将葡萄糖标准品(纯度大于99%)于80℃干燥至恒量。精确称取O·050 g,用水移人100 mL容量瓶中,定容至刻度线。此标准液相当于浓度为0.5 mg.mI。_。。
4.操作步骤
①样品处理
a.固体样品:称取0.5~5 g已粉碎的样品于锥形瓶中,加入50 mL水后沸水浴15 min。冷却后,转移至100 mL容量瓶中并用水定容至刻度,反复摇动混匀样品,过滤,弃初始几滴滤液。收集滤液,如果滤液澄清,可直接用于测定或稀释后用于测定。如果滤液浑浊,吸取20mL滤液转移至另一容量瓶中,加人无水乙醇至刻度。混合后静置至少30 min,过滤,滤液用于测定。
b·液体样品或少糖、淀粉等碳水化合物水解液:吸取2~10 mL样品或水解液,加入4倍
量无水乙醇(使乙醇最终浓度为80%,以沉淀不溶性多糖和部分蛋白质),混合。静置至少30
min,过滤后滤液定容备用(如果过滤后滤液仍浑浊,或样液体积过少,可于3 000 r/min离心15
min,上清液备用)。
c.新鲜牛乳等样品:吸取0.5~2 mL样品,用水稀释,加入3 mL 40%三氯乙酸溶液(用于沉淀蛋白质),用水定容至100 mL,过滤。吸取5 mL滤液,用2 m01.L一,NaOH调节pH至中性,用水定容至i0 mL,备用。
②测定
a-标准空白管的制备:在试管中加入0.5 mL水和5 mL酶溶液。
b·标准管的制备:5支试管中先分别加入葡萄糖标准液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL,再分别加入水0.4、0.3、0.2、0.1.0.0 mL,最后各加入酶溶液5 mL。
c·样品空白管的制备:在试管中加人0.5 mI。样品提取液和5 mI。酶空白液。
d·样品测定管的制备:在试管中加人0.5 mL样品提取液和5 mL酶溶液。
将上述各试管中溶液混合后于37℃水浴反应15 rain,625nm测定吸光度值。(注意:反应时间应严格控制,因葡萄糖与酶溶液的成色反应与反应时间密切相关,
5.计算
根据吸光度值求出葡萄糖标准曲线的回归方程,采用插入法求出测定管中葡萄糖含量,再根据稀释定容体积和称样量,计算出样品中葡萄糖含量。
6.说明
①此法适用于谷类、乳类、饮料、酒类等食品样品和血液样品。检出量为0.02 mg。
②此方法中的酶溶液只能和葡萄糖反应,特异性强,灵敏度高。
③如果样品提取液为无色,不需做样品空白。有色样品或样品提取液浑浊,则应做样品空白以减少干扰。
3. 葡萄糖原料药项下乙醇溶液的澄清度与颜色的检查目的和方法分别是什么
一、澄清度是检查药品溶液的浑浊程度,即浊度。药品溶液中如存在细微颗粒,当直射光通过溶液时,可引致光散射和光吸收的现象,致使溶液微显浑浊;所以澄清度可在一定程度上反映药品的质量和生产工艺水平。二、药物溶液的颜色及其与规定颜色的差异能在一定程度上反映药物的纯度。本法系将药物溶液的颜色与规定的标准比色液相比较,以检查其颜色。品种项下规定的“无色或几乎无色”,其“无色”系指供试品溶液的颜色相同于所用溶剂,“几乎无色”系指浅于用水稀释1倍后的相应色调1号标准比色液。
4. 怎样测葡萄酒中的糖度,用什么仪器最简单有效,仪器怎样用,要注意什么
您好,
手持式折射仪最为简单,只需滴上一滴在载物片上,就可以读出数值,但是这种方法只能测出葡萄酒大概的范围,和实际相差还是比较大的。
还可以用,高效液相色谱法,原理是利用样品中各种组分在液固两项分配系数的不同,令其通过液相色谱柱,而将葡萄酒中的果糖,葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。然后利用示差折光检测器进行鉴定,用外标法定量。用高效液相色谱法,其中也有2中检测方案,有细微差别。这种检测方法需要的仪器有高效液相色谱仪,示差折光检测器。
一般各大葡萄酒生产厂家,质量检测部门化验室的化验人员是用直接滴定法和间接碘量法来检测葡萄酒中糖分的含量。
具体步骤:
预备试验:250ml容量瓶,加入菲林试剂A,B各5.00ml,加蒸馏水50ml,摇匀,电炉上加热至沸,在沸腾的状态下用试样滴定,当溶液的蓝色消失呈红色时,加2滴次甲基蓝指示液,继续滴至蓝色消失,记下消耗的试样体积V0
正式试验:250ml容量瓶,加入菲林试剂A,B各5.00ml,加蒸馏水50ml,再加入比预备试样少1ml的试样V3=V0-1,摇匀,电炉上加热至沸,并保持2min,滴定,加2滴次甲基蓝指示液,滴至蓝色消失。测干葡萄酒样品时,需要用葡萄糖标准溶液滴定至终点V2。
计算:总糖或还原糖含量X=(F-G×V2)÷((V1-V2)/V3)×1000
F----菲林A、B液各5ml相当于葡萄糖的克数,g
V1---吸取样品体积
V2---消耗试样的体积
V3--消耗试样总体积
G---葡萄糖标准溶液的准确浓度
好长时间不做化验了,都快记不清了,这种方法最为精准,酒厂化验员都是采用这种方法进行化验。
5. 有几种方法测定葡萄糖含量各自的原理是什么
有两种方法来测定。
第一种用菲林试剂来测定,原理为:
CH2OH(CHOH)4CHO+2[Ag(NH3)2OH](水浴加热)→CH2OH(CHOH)4COONH4+2Ag↓+3NH3+H2O
注意事项:⑴ 试管内壁必须洁净
⑵ 银氨溶液随用随配不可久置;
⑶ 水浴加热,不可用酒精灯直接加热;
⑷ 可加入氢氧化钠,以促进反应进行;
⑸ 银镜可用稀HNO3浸泡洗涤除去。
加热还原生成的银附着在试管壁上,形成银镜,所以,这个反应也叫银镜反应。
第二种用新制的氢氧化铜溶液来测定,原理为:
葡萄糖溶液与新制氢氧化铜悬浊液反应生成砖红色沉淀。(浓度高时生成黄色沉淀)
CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O
注意事项:⑴ 新制2Cu(OH)2悬浊液要随用随配、不可久置。
⑵ 配制新制Cu(OH)2悬浊液时,所用NaOH溶液必须过量。
⑶ 反应液必须直接加热至沸腾。
⑷ 葡萄糖分子中虽然含有醛基,但是d-葡萄糖中不含有醛基。
葡萄糖是自然界分布最广且最为重要的一种单糖,它是一种多羟基醛。
纯净的葡萄糖为无色晶体,有甜味但甜味不如蔗糖(一般人无法尝到甜味),易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚。天然葡萄糖水溶液旋光向右,故属于“右旋糖”。
葡萄糖在生物学领域具有重要地位,是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物,即生物的主要供能物质。植物可通过光合作用产生葡萄糖。在糖果制造业和医药领域有着广泛应用。
化学性质
它是自然界分布最广泛的单糖。葡萄糖含五个羟基,一个醛基,具有多元醇和醛的性质。
用途:
生物培养基。金属还原剂。滴定硼酸的络合物形成剂。微量分析。测定全血葡萄糖。可直接被人体吸收。
正常人体每分钟利用葡萄糖的能力为每公斤体重6毫克。是一种能直接吸收利用,补充热能的碳水化合物,是人体所需能量的主要来源,在体内被氧化成二氧化碳和水,并同时供给热量,或以糖原形式贮存。能促进肝脏的解毒功能,对肝脏有保护作用。是生物体内最为常见的能源物资。
6. 葡萄糖的特殊杂质检查都检查什么
葡萄糖的特殊杂质检查:1、溶液的澄清度与颜色。2、亚硫酸盐和可溶性淀粉。3、蛋白质。4、乙醇溶液的澄清度。
7. 怎样鉴定葡萄糖
1 如果检测的是食物中是否有还原糖,如葡萄糖
用菲林试剂!由0.1g/ml的NaoH 和0.05g/ml的CuSO4 混合制成
通过水域加热!
如果有葡萄糖
就会出现砖红色沉淀!
2 如果是检测尿液中是否有葡萄糖
则一般用班氏糖鉴定试剂
也要通过水域加热,如果有葡萄糖
同样会出现砖红色沉淀!
3 浙江版本的生物书中一般用的是本尼迪特试剂来鉴定还原糖!包括葡萄糖
8. 葡萄糖澄清度检查用10ml40℃左右的水溶解不完全,静置白色分层,难倒是
液面的高度为40mm,在浊度标准液制备后5分钟,同置黑色背景上,在漫射光下,从比浊管上方向下观察、比较;或垂直置于伞棚灯下,照度为1000lx,从水平方向观察、比较;用以检查溶液的澄清度或其浑浊程度。
正文中规定的“澄清”,系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂,或未超过0.5号浊度标准液
9. 葡萄糖的鉴定
葡萄糖是还原糖,最常用斐林试剂检测:将0.1g/ml的NaoH 2ml和0.05g/ml的CuSO4 4-5滴混合制成斐林试剂,加入葡萄糖混匀后水浴加热,出现砖红色沉淀。斐林试剂要现配现用。班氏试剂、本尼迪特试剂也可鉴定葡萄糖,试剂成分和反应后颜色有区别,如有需要,可以追问。