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蛋白脂肪检测方法

发布时间:2022-08-10 15:50:08

‘壹’ 生物学上,检验还原糖,蛋白质,脂肪。常规的方法可以有哪些

您好!生物化学里学过,下面全面正确的答案!谢谢采纳!一,实验原理:
,可溶性还原糖+斐林试剂
砖红色沉淀
,脂肪+苏丹III
橘黄色
脂肪+苏丹IV
红色
3,蛋白质+双缩脲试剂
紫色反应
[实验一]生物组织中可溶性还原糖,脂肪,蛋白质的鉴定
1.可溶性还原糖的鉴定原理:
生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖,果糖,麦芽糖,蔗糖.前三种糖分子中都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基,因此叫还原性糖,而蔗糖的分子中没有,因此叫非还原性糖.
斐林试剂(淡蓝色的Cu(OH)
2)与可溶性还原糖在加热的条件下,生成砖红色的Cu2O沉淀.如用沸水浴加热,Cu2O沉淀颗粒较大,呈现砖红色;如用酒精灯直接加热,Cu2O沉淀颗粒较小,呈现黄色.
[实验一]生物组织中可溶性还原糖,脂肪,蛋白质的鉴定
2.脂肪的鉴定原理:
当苏丹染料在脂肪类物质中的溶解度大于在其它溶剂(如酒精,丙酮)中的溶解度时,苏丹染料便大量进入脂肪类物质的结构内,在脂滴中溶解,积累,并吸附在脂肪颗粒结构上,呈现出橘黄色或红色.苏丹Ⅳ与脂肪的亲和力大于苏丹Ⅲ,因此染色时间短.
[实验一]生物组织中可溶性还原糖,脂肪,蛋白质的鉴定
3.蛋白质的鉴定原理:
在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NCO-NH-CONH2)能与Cu2+作用,可形成紫色或紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应.凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物,都能进行双缩脲反应,这是特定的颜色反应.蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键(两个相邻的肽键与双缩脲结构相似),因此又称为肽键反应.

‘贰’ 如何检测油脂中的蛋白质和脂肪含量

油脂中脂肪含量的测定:酸性乙醚提取法
原理:食品样品经盐酸水解后,用乙醚提取脂肪,然后在沸水浴中回收和除去,称重而获得游离和结合的脂肪含量。
蛋白质测定用双缩脲法。

‘叁’ 检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的方法

还原糖的鉴定:
1、向试管内注入2ml待测组织样液。
2、向试管内注入1ml菲林试剂(甲液和乙液混合均匀后再注入)。
3、将试管放入盛有50-65摄氏度温水的大烧杯中加热约2分钟。
4、观察试管中出现的颜色变化。
脂肪的鉴定:
方法一:
1、向待测组织样液中滴加3滴苏丹三染液,观察样液被染色的情况。
方法二:
制作子叶临时装片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况(以花生为例)
取材——取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。
切片——用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水
的培养皿中待用。
制片——从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央,在花
生子叶薄片上滴2-3滴苏丹三染液,染色3分钟(如果用苏丹四染
液,染色1分钟);用吸水纸吸去染液,再滴加1-2滴体积分数为
50%的酒精溶液,洗去浮色,用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,
滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。
观察——在低倍物镜下找到花生子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调
节清楚;换高倍物镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰
可见。
蛋白质的检验:
1、向试管内注入2ml待测组织样液。
2、向试管内注入双缩脲试剂A液1ml,摇匀。
3、向试管内注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀。
4、观察试管中出现的颜色变化。
现象:
还原糖:试管中出现砖红色沉淀。
脂肪:脂肪颗粒被苏丹三染液染成橘黄色(或被苏丹四染液染成红色)
蛋白质:试管中出现紫色。

‘肆’ 生物中检验脂肪和蛋白质

检验蛋白质方面,定性的话可以用双缩脲法,定量的话可以用电泳法,分光光度法,分离的话可以用凝胶层析等,(方法有很多,具体问题具体分析,根据蛋白质的特性以及检验要求来选择最适合的)
脂肪的话可以用加碘加盐加氧化剂等方法去检验
希望能帮到你啦

‘伍’ 检验脂肪以及蛋白质的方法及原理

检验蛋白质用费林试剂就是新制氢氧化铜
原理:与蛋白质中的醛基反应
检验脂肪用苏丹III
原理:苏丹III将脂肪染成红色

‘陆’ 如何动手检测食物中的蛋白质、脂肪、淀粉,并写出简单的检测方法(任选两种物质)

蛋白质专业检测法是把它配成溶液,加入双缩脲试剂后有紫色沉淀。不专业的是加硝酸加热,会变黄的。家里检测就可以滴碘酒,变棕黄色。
淀粉,加碘酒或碘水就好啦,会变蓝色的。
脂肪的专业检测是用苏丹3染液染色,然后在显微镜下就可以看到被染成橘红色的脂肪滴。一般检测可以在吸水性较好的纸上轻按一下,会有油印子的。

‘柒’ 如何检测生物组织中的糖类,脂肪,和蛋白质

一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应.
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀.即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色).
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应.(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应.)
4.淀粉遇碘变蓝色.
三.实验材料
1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨.(因为组织的颜色较浅,易于观察.)
2.做脂肪的鉴定实验.应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3-4小时(也可用蓖麻种子).
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清.
四、实验试剂
斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水.
五、方法步骤
(一) 可溶性糖的鉴定
1.制备组织样液.
苹果或梨组织液必须临时制备,因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖.
2.注入2mL组织样液.
3.注入1mL新制的斐林试剂,振荡.
(现配现用、先混后加)
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、
乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测.
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加热:试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 → 棕色 → 砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者.
也可用酒精灯对试管直接加热.
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间.
(二)脂肪的鉴定
取材、切片、制片:花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水.

干种子要浸泡3-4小时,新花生的浸泡时间可缩短.
浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形.切片要尽可能薄些,便于观察.
染色:在子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ(染色3分钟)或苏丹Ⅳ染液(染色1分钟).
染色时间不宜过长.
漂洗:用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察.同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴.
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片.
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡.
镜检:先低后高(高倍镜用法:移物换器时针反),低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒.
装片不宜久放.
时间一长,油滴会溶解在乙醇中.
三、蛋白质的鉴定
制备组织样液.(浸泡、去皮研磨、过滤.)黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间.加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3-4滴,摇匀,溶液变紫色.
A液和B液也要分开配制,储存.鉴定时先加A液后加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提
供一个碱性的环境.A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效.
否则CuSO4蓝色会遮盖反应的真实颜色.可用蛋清代替豆浆.蛋清要先稀释.
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净.
附:淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化.碘液不要滴太多,以免影响颜色观察

‘捌’ 检测生物体内糖类,脂肪,蛋白质 所有实验步骤和注意事项,

一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应.
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀.即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色).
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应.(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应.)
4.淀粉遇碘变蓝色.
三.实验材料
1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨.(因为组织的颜色较浅,易于观察.)
2.做脂肪的鉴定实验.应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3-4小时(也可用蓖麻种子).
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清.
四、实验试剂
斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水.
五、方法步骤:
(一) 可溶性糖的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
1.制备组织样液.
(≠组织液、≠细胞液)
苹果或梨组织液必须临时制备
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,
将产生的颜色掩盖.
2.注入2mL组织样液.
3.注入1mL新制的斐林试剂,振荡.
(现配现用、先混后加)
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、
乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测.
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70-900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无
Cu ( OH ) 2生成.
4.水浴加热:试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 → 棕色 → 砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者.
也可用酒精灯对试管直接加热.
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间.
(二)脂肪的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
取材、切片、制片:花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水.
干种子要浸泡3-4小时,新花生的浸泡时间可缩短.
浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形.切片要尽可能薄些,便于观察.
染色:在子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ(染色3分钟)或苏丹Ⅳ染液(染色1分钟).
染色时间不宜过长.
漂洗:用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察.同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴.
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片.
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡.
镜检:先低后高(高倍镜用法:移物换器时针反),低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒.
装片不宜久放.
时间一长,油滴会溶解在乙醇中.
三、蛋白质的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
制备组织样液.
(浸泡、去皮研磨、过滤.)
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,
也可购新鲜豆浆以节约实验时间.
加样液约2ml于试管中,
加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3-4滴,摇匀,溶液变紫色.
A液和B液也要分开配制,储存.鉴定时先加A液后加B液.
CuSO4溶液不能多加.
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提
供一个碱性的环境.A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效.
否则CuSO4蓝色会遮盖反应的真实颜色.
可用蛋清代替豆浆.
蛋清要先稀释.
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内
壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净.
附:淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化.
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察

‘玖’ 怎样检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质

糖类中还原糖(例葡萄糖、果糖、麦芽糖等)可用斐林试剂检测。先准备组织样液,再准备0·1g/ml的氢氧化钠溶液、0.05g/ml硫酸铜溶液。方法步骤:1.(1)取2ml组织样液加入1支洁净的试管。
(2)再另取2支试管,分别加入2mlNaOH与硫酸铜溶液,再把硫酸铜溶液倒入氢氧化钠溶液的试管,振荡混合均匀,即为斐林试剂。
(3)把新配制的斐林试剂与组织样液,等体积混合,振荡摇匀,然后放入50~60度水浴中保温,观察颜色变化。如出现砖红色沉淀,即说明有还原糖。
非还原糖(淀粉用碘液检测即可)碘遇淀粉变蓝。
脂肪用苏丹三或苏丹四检测,材料可用浸泡过"的花生种子,先制成临时装片,再用显微镜观察。或者把试剂滴加到组织样液中,观察颜色变化。
临时装片制作:用刀片先在花子叶切开,然后做徒手切片,放在清水中,然后用毛笔蘸取最薄的一片放在载玻片中央,滴加苏丹三溶液染色3到5分钟,用吸水纸吸取多余染液,再用体积分数为50%酒精洗去浮色,盖上盖玻片。放在显微镜下观察。脂肪粒被苏丹三染成橘黄色、苏丹四染成红色。(上述徒手切片做不好,可在花生子叶上
刮取少量粉末,直接涂在载玻片上来替代。

蛋白质用双缩脲试剂来检测。双缩脲是由A液(0.1g/ml的氢氧化钠)、B液(O.01g/mL的硫酸铜溶液组成。)
使用时取组织样液(用蛋清稀释液或豆浆)一2mL加入洁净试管,然后先滴加1mLA液,振荡试管摇匀,再滴加3~4滴硫酸铜溶液,摇匀。蛋白质遇双缩脲生成紫色。

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