白细胞链球菌检测方法

㈠ 链球菌用什么培养基培养

无乳链球菌又称B族练球菌
一般血培养就可以，97%左右有溶血环
也可以用梅里埃的显色培养基，成本较贵，咨询过可能要20-30元一块，显色率同溶血（显色的基因与溶血基因相关）
有一些增菌液可提高检测率
不知楼主做什么研究，我自己也没具体做过。通常GBS定植与胃肠道，临床意义较小。本来想做孕妇的GBS筛查，所以学习了一下。

㈡ 抗链球菌溶血素O（ASO）临床常用的检测方法是

正确答案:C
解析：ASO临床常用的检测方法是胶乳凝集试验和免疫散射比浊法
。

㈢ 链球菌是什么

链球菌(Streptococcus)是化脓性球菌的另一类常见的细菌，广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部，引起各种化脓性炎症，猩红热，丹毒，新生儿败血症，脑膜炎，产褥热以及链球菌变态反应性疾病等。

㈣ 怎样检测链球菌感染

链球菌属 (Streptococcus) 细菌侵入人体引起的疾病。分2类﹕一类是感染性疾病﹐如急性扁桃体炎﹑猩红热﹑脓皮病﹑肺炎等﹔另一类为变态反应性疾病﹐如风湿热﹑急性肾小球肾炎等﹐链球菌感染为人类常见疾病﹐不仅遍及世界各地﹐而且四季均可发生。1960年以来﹐B族链球菌发病率有增加的趋势﹐特别是新生儿败血症及脑膜炎发生率明显增加﹐病死率也较高。防止上呼吸道感染及人体各种防御功能受损对链球菌感染均有预防作用﹐若集居的青少年及幼儿连续发病﹐则应临时对易感者注射长效青霉素。肺炎链球菌旧称肺炎双球菌(Diplococcus pneumoniae)﹐ 存在于正常人体的口﹑鼻﹑咽腔﹐人体抵抗力降低时方致病﹐主要引起大叶性肺炎(见肺炎)。本文讨论化脓性链球菌感染。

病原学 链球菌属是链球菌科的成员之一﹐链球菌是圆形或卵圆形的革兰氏阳性细菌。无芽胞﹐无动力﹐过氧化氢酶阴性﹐不耐热(55～60℃30分钟即可杀死)﹐在液体培养基中生长时为成对或成链状排列的球菌。易被各种常用消毒药杀灭﹐但对各种自然因素却有一定的抵抗力。在痰﹑渗出物及动物排泄物中可生存数周﹐在尘埃中无日光照射时可生存数日﹐广泛分布于自然界﹐从水﹑尘埃﹑乳汁﹑健康人的鼻咽部﹑人及动物粪便中皆可检出。链球菌的分类至今尚未统一﹐目前常将链球菌属按溶血能力分为甲型溶血性链球菌﹑乙型(β型)溶血性链球菌﹑丙型(γ型)溶血性链球菌3类﹐甲型链球菌致病力弱﹐为上呼吸道的正常寄生菌﹔丙型链球菌为口腔﹑鼻咽部及肠道的正常菌群﹐通常为非致病菌﹔乙型溶血性链球菌为链球菌感染中的主要致病菌。这一分类法简单﹐临床使用方便。乙型溶血性链球菌可根据其细胞壁中特异性抗原(多糖体)的不同﹐分为A～H﹑K～T共18个族﹔又根据其表面蛋白质M﹑K﹑T﹑S抗原的不同﹐将各族细菌分为若干个血清型。对人类有致病力者90％为A族﹐A族链球菌又称化脓性链球菌﹐B﹑C﹑D﹑G族也偶致病。D族和O族链球菌和唾液型链球菌﹑轻型链球菌和粪链球菌(肠链球菌)等是亚急性细菌性心内膜炎的致病因子。根据对氧需要与否分为需氧链球菌﹑厌氧链球菌﹑兼性厌氧链球菌。厌氧链球菌常寄居于口腔﹑肠道及阴道中。此类细菌型别繁多﹐人体曾感染过某型细菌后产生的抵抗力﹐对其他型细菌并无作用﹐故链球菌感染可发生多次。

链球菌致病除与人体防御能力的降低﹑变态反应的发生﹑感染细菌的数量有关外﹐细菌对自然界的抵抗力﹐特别是与其所产生的毒素及酶的关系更为密切。溶血素(包括溶血素D﹑S)能溶解红细胞﹐破坏白细胞及血小板﹐对细胞及细胞内溶酶体膜均有作用。溶血素O作用于细胞膜的胆固醇﹐而心脏细胞含胆固醇较多﹐故溶血素O对心脏有特异毒性作用。溶血素S则常作用于肾小球﹑关节内膜等处含有较多磷脂质的细胞膜﹐引起炎症。红疹毒素由噬菌体介导产生﹐可致皮肤发生红色皮疹﹐使表皮坏死脱落﹐还有致热作用及增强心脏﹑关节囊内膜﹑肾小球变态反应的作用。链激酶又名溶纤维蛋白酶﹐可溶解血块及阻止血浆凝固﹔透明质酸酶又名扩散因子﹐可溶解组织间的透明质酸﹔脱氧核糖核酸酶能分解细胞中脱氧核糖核酸﹐使脓液黏稠度下降﹔这些酶的作用均有利于细菌在组织中扩散﹐因而增加了细菌对人体的侵袭作用。

临床表现 链球菌引起的感染性疾病和变态反应性疾病临床表现各异。

感染性疾病 常见的有以下几类﹕

1、A族乙型溶血性链球菌经呼吸道侵入人体﹐致扁桃体炎﹑急性咽炎或喉炎。婴幼儿及年老体弱者约半数可并发支气管炎﹑肺炎。若侵入咽部的链球菌能产生红疹毒素﹐或原不产生红疹毒素的A族乙型溶血性链球菌经产生红疹毒素的A族链球菌的噬菌体作用后﹐变为能产生红疹毒素者﹐便可引起猩红热。其病原体通过飞沫传播﹐病原菌侵入咽部致局部炎症﹐发病急骤﹐红疹毒素进入血流﹐引起猩红热的一系列表现。红疹毒素还能使机体出现变态反应﹐故病后2～4周可出现心﹑肾损害。

2、B族乙型溶血性链球菌为人类泌尿生殖道及鼻咽部的寄生菌﹐主要引起肾盂肾炎﹑肺炎﹑子宫内膜炎﹔此菌亦已成为产褥热﹑新生儿感染的主要病原菌。若产妇带菌﹐分娩过程中羊膜破裂后﹐胎儿可被污染的羊水经呼吸道感染﹐亦可在经过产道时被感染﹔新生儿还可因吸入医护人员及产妇呼吸道带菌者的飞沫而被感染。新生儿的B族乙型溶血性链球菌感染的临床表现分早发型(败血症型)和迟发型(脑膜炎型)。前者出生后数小时至5天内急剧发病﹐患儿有呼吸困难﹑呼吸停顿﹑昏睡﹑惊厥﹑休克等﹐病死率高﹔后者产后7～10天发病﹐患儿发热﹑昏睡﹑昏迷等﹐脑脊液中细胞数增多﹑蛋白质增多﹑含糖量减少﹐可检出病原菌及抗原﹔病死率较败血症型低﹐但可发生神经系统后遗症。

3、甲型溶血性链球菌常致牙周炎(见牙周病)﹑牙龈脓肿﹑扁桃体炎。当施行拔牙﹑扁桃体摘除等手术时﹐细菌可从伤口侵入血流﹐正常情况下﹐细菌将被血内具有防御功能的细胞迅速杀灭﹐若部分菌未被消灭﹐该患者心脏内膜又有缺陷(如先天性心脏病)或损伤(如风湿性心瓣膜病)时﹐病原菌可在受损部位立足并繁殖而引起心内膜炎。D族乙型链球菌也可引起心内膜炎。此菌为人类肠道正常菌群﹐多从肠道或泌尿系统侵入血液﹐约半数患者原来无心脏疾患﹐这表明此类细菌可侵袭正常心内膜。患者出现长期发热﹑畏寒﹑进行性贫血﹐因部分细菌及血内物质(纤维蛋白)沉积在心瓣膜上形成大小不等的赘生物﹐赘生物可脱落﹐在血流中形成栓子﹐导致栓塞﹐尤其以脑﹑脾﹑肾栓塞为常见﹐产生瘫痪﹑脾肿大﹐尿中出现红细胞。若栓塞现象发生于皮下或黏膜﹐则可见皮肤黏膜瘀点﹑奥斯勒氏小结﹐赘生物的形成及脱落也常致心音发生相应改变。

变态反应性疾病 A族乙型链球菌感染后﹐由于变态反应形成的疾病有风湿热﹑急性肾小球肾炎。这是由于链球菌或其部分成分具有抗原性﹐能刺激人体免疫系统产生免疫反应物质(包括抗体及致敏淋巴细胞)﹐抗原与相应的免疫物质可发生特异性结合或反应﹐这样可清除抗原而防止细菌的侵袭﹐若这一反应超过了正常人的生理水平﹐即是变态反应﹐它可引起人体组织或器官的损害﹐由此产生的疾病称为变态反应性疾病。

诊断 主要依据链球菌感染的流行状况与患者接触史及特征性的临床表现。有的只根据其临床表现即可确诊﹐如丹毒﹔有的则需对感染部位分泌物及血液进行细菌培养方可确诊﹔检测细菌毒素及酶等抗原物质致使患者产生的相关抗体﹐如抗链球菌溶血素O﹑抗链酶等血清学检查对诊断甚有帮助。

治疗 急性期卧床休息﹐给予易消化的食物﹐必要时予以输液等对症治疗。最重要的是立即给以足量的抗菌药物﹐可首选青霉素﹐对青霉素过敏者可改用红霉素﹑林可霉素﹔对新生儿脑膜炎患者﹐大剂量青霉素或氨苄青霉素应用疗效均较好。无论选用哪种药物﹐疗程不应少于10天。

㈤ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

㈥ 溶血性溶血性链球菌怎么做微生物实验

脓汁：直接涂片— 局部化脓性疾病 / 分离培养 — 全身感染
血清：抗链O试验 — 超敏反应性疾病 / 血清总补体和C3含量测定
痰标本（肺炎链球菌）：直接涂片 / 血平板→菊糖发酵＋、胆汁溶菌＋、Optochin敏感试验＋，动物致病性试验
（一）病原学检验
取材：脓汁、穿刺液、咽拭子、血液、等
直接镜检：Gram stain／抗原检测
分离培养和鉴定：
β溶血：触酶试验（与金葡相区别）、杆菌肽敏感试验（A群）、CAMP试验（B群）、其它
α溶血：菊糖发酵／胆汁溶菌／ Optochin敏感试验（肺炎链球菌）、VP／脲酶精氨酸等（草绿色链球菌）
γ溶血：胆汁七叶苷试验（牛链球菌）
药敏试验
（二）血清学检验
抗“O”试验（ASO test）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO 乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。
原理：中和试验 / 方法：间接凝集 / 结果：效价大于400单位
意义：风湿热及其活动性的辅助诊断

㈦ A链球菌群感染需要做什么检查

主要依据细菌培养。除做溶血反应外，应以血清分类法确定其群别及型别。检测患者血清中抗链球菌溶血素O抗体，效价在1∶400以上有诊断意义。 此外，当出现中毒性休克综合征(TSS)是也可以进行以下诊断检查 1.细菌培养 咽拭或伤口等处分泌物或渗出物有A组链球菌生长。恢复期血清可检测抗链球菌溶血素O等抗体。由侵袭性A组链球菌所致TSS，其血培养阳性率可高达60%。 2.尿常规 高热病人可出现蛋白尿，并发肾炎时尿蛋白增加，并出现红细胞和管型，无并发症者尿液异常在热退后消失。 3.周围血象 白细胞总数及中性粒细胞均增高，有化脓性并发症者更高，感染严重者，如TSS病人细胞分类可呈左移，猩红热者出疹后嘈酸性粒细胞可增高至5%～10%。TSS病人血小板计数起病时可正常，继而下降。

㈧ 食品中链球菌检测方法

MM_FS_CNJ_0352出口食品 B群链球菌 CAMP试验法

MM_FS_CNJ_0352

出口食品中B群链球菌检验方法

1.适用范围

本方法适用于出口肉类、奶和奶制口中B群链球菌的检验。其他食品可参照使用。

2.主要试剂和仪器

2.1.主要试剂(包括培养基)

Todd,Hewitt肉汤〔参见附录A(补充件)A1〕;

牛心汤培养基〔参见附录A(补充件)A2〕;

牛心汤增菌培养基〔参见附录A(补充件)A3〕;选择性

牛心汤琼脂〔参见附录A(补充件)A4〕;

绵羊血琼脂平板〔参见附录A(补充件)A5〕;

β-溶血素带〔参见附录A(补充件)A6〕;

溶血素带〔参见附录A(补充件)A7〕; β-

绵羊血球〔参见附录A(补充件)A8〕;

生理盐水:灭菌的0.85,NaCl;

(补充件)A9〕; 革兰氏染色液〔参见附录A

接触酶(过氧化氢酶)试验〔参见附录B(补充件)〕。

2.2.仪器

离心机5000r,min，离心管50mL，10mL;

蔡氏滤器;

微孔滤膜，孔径0.45μm;

玻璃抽滤瓶;

玻璃水循环真空泵;

电热恒温箱;温度20,60?;

显微镜;

定性滤纸;

不锈钢厌氧菌培养罐;

电冰箱;

乳钵、研棒或均质器;

L形玻璃棒;

金黄色葡萄球菌菌体ATCC,25923。

3.样品的制备

3.1.肉类

3.1.1.冷冻产品应在2,5?过夜解冻，或在45?及以下经15min解冻，立即检验。若不能及时检验，应置于,15?左右暂存。其他非冷冻易腐的食品，亦应置于4?冰箱保存。

3.1.2.以无菌操作称取剪碎的肉类样品25g，置于灭菌之乳钵内或均质杯内，加入25mL灭菌生理盐水进行研磨或均质(8000,10000r,min，均质1min)，移

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入盛200mL生理盐水的5000mL广口瓶内，混合均匀，制成1?10稀释液。

3.2.奶和奶制品类

3.2.1.鲜奶、酸奶:以无菌手续去掉瓶罩纸盖，瓶口经火焰灭菌后，用无菌操作吸取25mL检样，放入装有225mL灭菌生理盐水的三角烧瓶内，振摇均匀。

3.2.2.奶粉:以无菌手续开封取样，称取25g放入盛有225mL温热的灭菌生理盐水且装有适量玻璃珠的灭菌广口瓶内，振摇使其充分溶解混匀。

3.2.3.奶酪:先用灭菌刀削去部分表面封蜡，然后用点燃的酒精棉球灭菌表面后，用灭菌刀切开奶酪，再用无菌操作切取表层和深层检样25g，置于灭菌乳钵内切碎，加入25mL生理盐水研成糊状，移入盛有200mL灭菌生理盐

水的广口瓶内，混合均匀。制成1?10的稀释液。

3.3.其他食品

样品的制备取决于食品的种类和状态。固体或半固体食品按3.1.2或3.2.3进行。液体食品按4.2.1进行。

4.过程简述

.1.增菌培养 4

将上述制备的检样各取10mL分别接种于100mL牛心汤培养基内，如检样污染较严重，可同时按上述量接种于选择性牛心汤增菌液内，经35?1?培养15h，

-带或CAMP-点试验。 再进行CAMP

4.2.CAMP试验的条件

?1?培将CAMP试验的绵羊血琼脂平板置于不锈钢厌氧菌培养罐内，在35养。

4.3.CAMP-带试验

取β-溶血素带1,2条平行轻贴于绵羊血琼脂平板上，间距20mm，将样品或经过增菌的培养物直接在β-溶血素带两侧(相距3,5mm)处垂直划线3,4条或涂布接种，经14,18h培养后观察结果。如在接种线与β-溶血素带周围朦胧溶血区重叠处能见到协同产生清晰的“箭头”状的增强溶血区为阳性反应，可鉴定为B群链球菌。不见增强溶血为阴性反应，判为B群链球菌阴性。

4.4.CAMP-点试验

将样品或经过增菌的培养物直接划线或用L形玻璃棒涂布接种于绵羊血琼脂平板上，经14,18h培养后，用接种环取β-溶血素滴加在圆形突起，细小的可疑为链球菌的单个菌落边缘，再将平板进行孵育，分别在30，45，60min检查溶血变化情况。在滴加β-溶血素的菌落边缘有协同产生“扇形”增强溶血区的为阳性反应，可鉴定为B群链球菌。不出现增强溶血现象的为阴性反应，判为非B群链球菌。

每次检验时都要用已知阳性菌株作为对照试验。 4.5.CAMP-带或CAMP-点试验阳性反应，再进行革兰氏染色，镜检和接触酶试验，以此来与其他溶血性细菌如李斯特氏菌，肉毒梭状芽胞杆菌和葡萄球菌等区别开。

㈨ 微生物致病菌有哪些怎么检测

常见致病菌有
1，致病球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌。
2，致病杆菌：埃希菌属（ 大肠埃希菌）、志贺菌属 （ 痢疾志贺菌）、沙门菌属 （ 伤寒沙门菌）、克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌）、变形杆菌属（普通变形杆菌）、摩根菌属（摩氏摩根菌）、枸橼酸菌属（弗劳地枸橼酸杆菌）、肠杆菌属（ 产气杆菌）、沙雷菌属（粘质沙雷菌）、耶尔森菌属（鼠疫耶尔森菌）。前面为菌属，括号内为代表菌。
这么多菌，想知道检测方法，只能自己查。在这里写不过来。