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巴氏染色液使用方法

發布時間:2022-10-02 00:23:13

㈠ 我的下面有個問題~!

尖銳濕疣屬於中醫「疣瘡」、「疣目」、「臊瘊」等范疇。男性好發於冠狀溝、龜頭、包皮、系帶、尿道口,少數見於陰莖體部,同性戀者可發生於肛周及直腸。但很少見於陰囊。女性好發於大陰唇、小陰唇、陰蒂、女性後聯合、肛周、宮頸和陰道,偶見於腋窩、臍窩、乳房等處。尤其易發生於有慢性淋病、白帶多及包皮過長者。除以上部位外,人體的其他部位也可患病,如口腔、腋窩、臍窩、乳房下部、足趾間等。也可以從身體的其它部位自身接種到生殖器部位,但很少見。男性為乳頭樣、菜花樣突起,紅色,濕潤柔軟。女性為瘤樣、菜花樣皮損,如病程長,可相互融合,呈一串葡萄。
通常分兩型:Ⅰ型,表現為孤立的或多發的菜花或雞冠狀突起,多在外陰、肛周等部位;Ⅱ型,為乳頭狀、指狀或丘疹狀病變,多分布於雙小陰唇內側、處女膜環、前庭、舟狀窩等粘膜。
流行病學資料表明,尖銳濕疣與生殖器癌之間有著密切的關聯。利用核酸雜交方法,在不同類型的生殖器腫瘤中測到了人類乳頭瘤病毒,同時在尖銳濕疣病損的組織中也測到該病毒。有報告5%~10%的外陰、宮頸和肛周的尖銳濕疣經過一段時期後可出現間變和發展為原位癌或浸潤癌。還發現15%陰莖癌、5%女性外陰癌是在原尖銳濕疣的基礎上發生的,特別是宮頸癌,發生惡變者尤其與HPV-16、18、31、33型有關。巨大尖銳濕疣可繼發癌變。許多實驗室研究也進一步表明,HPV、尖銳濕疣和生殖器癌三者之間存在著因果關系。外陰、陰莖或肛周的尖銳濕疣可以轉化為鱗狀細胞癌。這種轉化通常要5-40年。所以患尖銳濕疣後,一定要積極治療,徹底根治。找專科醫師治療是最佳的選擇,否則不適當的治療和刺激可加快惡變。
尖銳濕疣的臨床表現
臨床表現多種多樣。在生殖器溫度較低而且乾燥部位的損害常常表現為小而扁平狀,而在溫熱、濕潤部位者常呈絲狀或乳突瘤狀。初起為細小淡紅色丘疹,後逐漸增大加多相互融合,表面凹凸不平,濕潤柔軟,呈乳頭瘤樣,雞冠樣,草樣,蕈樣或菜花樣突起,紅色或污灰色,根部常有蒂,且易發生糜爛滲液,易出血。皮損裂縫間常有膿性分泌物郁積其中,致有惡臭,自覺有癢感且每因搔抓而引起繼發感染。由於不斷受到局部潮濕與慢性刺激的作用,往往迅速增長。有的女性患者甚至從外陰至陰道、宮頸等處都長滿了一片毛棘或很多小菜花狀突起,好似玫瑰色的芒刺或雞冠花。濕疣的數目少則數個,多則十餘個,數十個以至百個之多。極少數病人由於治療不及時,使濕疣長得很大,成為巨大濕疣,可向深部穿透,產生很多瘺管通向尿道或經5-40年惡變為癌腫。發生在直腸內大的濕疣可引起里急後重感。當妊娠期體內激素水平劇變時,生殖器的供血豐富,機體免疫功能又有所下降,故生殖器疣的體積也迅速增大,甚至達到阻塞產道的程度。分娩時往往使疣體摩擦撕裂出血,由於其組織脆弱,會給縫扎止血帶來困難。有的濕疣在妊娠末或分娩後可以自然縮小以至消退。一般無明顯自覺症狀,介有瘙癢感,潮濕感或摩擦感。如有繼發感染時可伴有疼痛,陰道和宮頸有損害時表現為白帶增多或性交後出血。巨大皮疹可引起局部異物感或因摩擦而引起疼痛。性交時症狀可能加重。
部分病例為亞臨床感染或HPV病毒攜帶者,無肉眼可見的臨床表現。孕婦患尖銳濕疣後,人乳頭狀瘤病毒可通過分娩過程傳染給嬰兒,使之發生喉頭疣及引起喉部乳頭狀瘤。即使母體感染後無臨床症狀,病毒也可通過血液或胎盤傳播給胎兒,所以患有此病的婦女足月妊娠時,以做剖腹產術為妥。

【組織病理】
角化不全,棘細胞層高度肥厚,呈乳頭瘤狀增生,表皮增厚延長呈假上皮瘤樣,基底層棘層細胞可見多數核分裂像,頗似癌瘤、但細胞排列規則,真皮與表皮境界清楚,顆粒盡和棘層有空泡細胞,該細胞胞漿著色淡,中央有深嗜鹼性大而圓的核。
真皮毛細血管擴張,血管周圍有緻密慢性炎細胞浸潤。

【診斷】
尖銳濕疣常需與生殖器癌、扁平濕疣、假性濕疣、生殖器鮑溫樣丘疹病及珍珠樣丘疹病鑒別。
(1)生殖器部位癌 皮損較硬,邊界不清,鱗狀上皮瘤有明顯的向深部浸潤,常形成潰瘍,有時應進行病理組織學檢查。尖銳濕疣一般呈乳頭狀生長,病變淺表,很少浸潤面。
(2)扁平濕疣 為梅毒二期皮疹。扁平濕疣多發生於肛周及外生殖器周圍,基底寬,無蒂,外觀扁平,疣面潮濕、光滑。暗視野顯微鏡檢查可找到梅毒螺旋體,梅毒血清反應為陽性。詳見梅毒部分。
(3)假性濕疣 又稱女性絨毛狀小陰唇,在成年女性的小陰唇內側上出現魚卵狀或細小絨毛狀、排列規則的增生物,互不融合,長期不變,醋酸白試驗陰性。
(4)生殖器鮑溫樣丘疹病 本病較少見,主要與人類乳頭瘤病毒16型感染有關。表現為生殖器部位多發性棕紅色小丘疹,直徑2~10mm。臨床上很像尖銳濕疣,但組織學上類似鮑溫病的改變。作出這一診斷必須是專科醫師。
(5)珍珠樣丘疹病(珍珠狀陰莖丘疹病) 發生於男性的龜頭,沿龜頭冠狀溝有排列整齊的大小一致的珍珠樣丘疹。米粒大小、圓頂、平滑,互不融合,長期不變。
(6)皮脂腺異位症:丘疹在粘膜內無重疊生長,多為淡黃色。
(7)傳染性軟疣:單個不融合的皮色半球形丘疹,周圍光滑,中央可擠出軟疣小體。
(8)軟下疳:外生殖器皮膚損害為不規則形潰瘍,伴痛性橫痃。潰瘍面滲出物塗片可能查到杜克雷桿菌。
尖銳濕疣的診斷辨認多靠醫生的臨床經驗,但由於性病在我國絕跡多年,臨床醫生的經驗有限,難免有判斷失誤的情況,據報告有些基層醫院的誤診率可達50-80%;尖銳濕疣多位於大小陰唇內側、陰道口及肛門部位,病變呈淡紅、鮮紅或暗紅色米粒大或豆粒大突起的疣狀增生物,疣體濕潤、柔軟,可單個或多個並存,有時呈菜花樣典型皮損。與尖銳濕疣相類似的疾患還有假性濕疣或絨毛狀小陰唇,後者多見於小陰唇內下側,刺狀突出物與陰唇顏色相仿,狀似天鵝絨一般,但病人多無症狀,只是白帶增多。其他容易誤診的還有處女膜贅狀物、扁平濕疣(二期梅毒疹)、皮脂腺增生等。
要准確辨別這幾種不同疾患,十分實用而簡便的辦法就是醋白試驗,即用5%冰醋酸液塗在病變部位,3分鍾後疣體發白者為尖銳濕疣,否則另當別論。或以浸有3—5%冰醋酸溶液的紗布包在可疑病變處3—5分鍾,若患處變白,則說明是亞臨床感染。
還可以做碘黃試驗,即用魯戈氏液塗後3分鍾,發黃者可以確診為尖銳濕疣。當然更可靠的辦法是做組織病理學檢查。近兩年,國內雜志已有多篇報告談到假性濕疣的鑒別診斷問題,特別提到醋白試驗。但組織病理學檢查的診斷也並非易事,有時也很難確診,仍然有賴於檢驗者的業務水平和經驗。本病的明確診斷有賴於有效的病毒培養系統的建立、組織免疫化學和分子生物工程技術DNA探針的發展,那時就不會把假性濕疣擴大化,誤診為尖銳濕疣了。
發生於陰道或宮頸內的濕疣可能不大明顯,且變化多端,僅靠臨床檢查,可能誤診,常需做細胞學、陰道鏡及組織病理學檢查。
a.細胞學檢查:用陰道或宮頸濕疣組織塗片作巴氏染色,若發現角化不良細胞和空泡細胞混合存在,對本病有診斷價值。
b.免疫組織化學檢查:過氧化酶-抗過氧化酶抗體復合技術(即PAP法)是一種免疫學方法,採用特異性HPV的抗血清用來顯示病毒蛋白,籍此證明濕疣中的病毒抗原,較常規電鏡方法更為迅速、有效。
病理檢查有助於診斷,經棘細胞中上層出現空泡細胞最具診斷意義。
多聚酶鏈式反應(PCR)等分子生物學技術檢測HPV,此法還可用作亞型測定。但國內大多數醫療機構的PCR實驗由於條件不足,誤診現象太多,已經不足以作為診斷工具。現gopla正試圖採用基因晶元技術診斷尖銳濕疣,但由於成本仍高,並且依賴PCR將結果放大,只適用於實驗室研究,在近年難以推廣。

【治療】
目前治療尖銳濕疣主要是以外治為主,內治為輔。外治的方法很多,有葯物治療、冷凍治療、激光治療、微波治療、電燒治療、手術治療等。葯物治療方便,易於操作,但一般需要重復數次,而且有些葯物,如三氯醋酸,有灼傷粘膜的可能。
一、葯物治療。對於較小較少的損害。
(1)5%5-Fu軟膏 5-Fu是一種常用的抗腫瘤葯物,它能抑制細胞的增殖,力量較為溫和,一般需治療2~3周。
(2)疣敵:用單孔或多孔的塑料小棒,將0.5%「疣敵」溶液滴於濕疣上,並使葯液慢慢滲透到疣基底,點葯後的濕疣紫色,待自干後即可,注意點葯不可過多,以避免葯液流到正常組織。點葯4小時後用清水洗去。
(3)醋酸:三氯醋酸是一種強酸,可用來燒灼疣體,一般用於治療Ⅱ型病變。塗抹前先用棉球醮2%的卡因貼敷於病變局部3 ̄5分鍾後,用棉簽醮50%三氯醋酸塗抹病變,使葯液達基底部;塗葯時注意勿傷及周圍健康粘膜組織,經期勿用;每周用葯2次。或用20%柳酸冰醋酸外搽。
(4)1-3%的肽丁胺霜 外搽本葯,每日2次,無不良副作用,尚可用於陰道內的尖銳濕疣。或先用1:5000過錳酸鉀洗凈患處,再用霜厚層外塗,並以紗布包紮,每日換葯一次。4周為一療程。力量溫和,目前未發現毒副作用,需長期治療。
(5)疣脫欣(鬼臼毒素溶液) 為新的高效的治療尖銳濕疣的葯物,無刺激性,外用局部,每日1次,連續3~5天即可。
(6)20-25%的足葉草酯酊(或0.5%足葉草脂毒素液)或液體石蠟制劑,直接搽於皮損處。或用20--25%足葉草脂溶於安息香酸酊或礦物油,於局部塗擦。每周用1~2次,不足6周可脫痂痊癒。因其毒性較大,每次的用葯量應限制在0.5ml以下,用葯面積不得超過10cm2,塗葯1-4小時後洗清局部。本葯有副作用,局部表現為紅斑,糜爛,燒灼痛,嚴重者可致潰爛和壞死改變。要注意保護周圍皮膚粘膜,初次塗葯2~4小時後用肥皂水洗去,重復塗葯時在6-8小時後也應洗掉,以免燒傷皮膚。有致畸作用,孕婦禁用。搽葯時注意保護周圍正常皮膚,可預先在正常皮膚上塗用凡士林做預防。此法用後疼痛較重,往往需要用止痛葯。可引起全身中毒反應,頭暈,嗜睡,昏迷,嘔吐等,用量多後有危險,可發生復發性神經炎、感覺異常、發熱、白細胞和血小板減少、昏迷甚至死亡。孕婦不得使用。
(7)爭光黴素、平陽黴素兌生理鹽水,外塗患處,每周用葯2~3次。
(8)無環鳥苷膏
(9)保持患處清潔乾燥,用3%過氧化氫溶液或1:5000高錳酸鉀溶液等清洗。
(10)1-5%氟尿嘧啶霜或2%氟尿嘧啶溶液外搽,每日1次,每次只搽幾個病損,以免陰囊和粘膜發生糜爛反應。
(11)0.25%皰疹凈軟膏,每日2次。連續2周為一療程。
(12)克疣。目前比較好的外用葯品。毒性小,治療徹底,少留疤痕。(可找安貞醫院泌尿科)治癒後3月復查,以防復發。
(12)1%酉丁胺膏塗控,一日三次,堅持6周亦可望治癒。
二、微波治療。這是進入90年代後興起的治療方法。它的原理是利用微波的高頻震動,使疣體內部水分蒸發,壞死脫落。微波治療的特點是,疣體破壞徹底,不易復發,但創面恢復較慢,容易繼發感染。所以微波治療特別適用於治療疣體較大的,孤立、散在的,同時要遠離包皮系帶的尖銳濕疣,以防損傷包皮系帶,影響男性的性功能。
三、冷凍治療:液氮或二氧化碳乾冰冷凍,使疣組織(即皮膚損害局部)壞死。尖銳濕疣是由於尖銳濕疣病毒的感染,導致皮膚粘膜的良性增生。它有大量的小血管,增殖迅速。用冷凍的方法可使尖銳濕疣內結冰,形成組織局部的高度水腫,從而破壞疣體。冷凍治療的最大好處是局部不留痕跡,治癒率約70%左右。治療過程中除局部紅腫,疼痛及水皰反應外,一般無明顯後遺症。可用噴霧法或直接接觸法,適用於平坦較小的疣體。一般每周冷凍1次,連續2~3次。一般月經後治療。
四、激光治療:對外陰、肛門周圍等表淺的濕疣合適;它的特點是見效快,在治療的當時,疣體即可脫落。常用的是二氧化碳激光,燒灼疣體,一般1次即可使疣體脫落。但是,由於激光的光束過於集中的原故,激光治療只適用於疣體較小的尖銳濕疣,如疣體較大,激光治療很容易復發。治癒率可達80%。
五、電灼治療:電燒灼是較老的一種治療方法。過去皮膚科醫師常用高頻電刀或電烙鐵燒灼尋常疣、色素痣及其他皮膚贅生物。它的特點是操作簡單,見效快。高頻電刀能直接切除和乾燥疣體,治療也較徹底,但是,電燒灼瘡面癒合較緩慢。綜上所述,電燒灼治療,可用於任何尖銳濕疣的治療,但是對施術者的技術要求較高,燒灼太過或不足都是有害的。同時要注意無菌操作,預防感染。高頻電刀或電針,對宮頸或陰道較小病損治療較合適。較大的疣則需分批電灼。
六、手術切除:對帶蒂的較大、孤立的疣體可考慮手術切除。尖銳濕疣一般不主張手術切除,因為手術治療後,尖銳濕疣很容易復發,使治療失敗。但對帶蒂的較大的疣體或疑有惡變者,可考慮手術切除。有的患者尖銳濕疣生長過於迅速,或大如菜花,其他治療十分困難,可考慮手術治療。為防止復發,術後配合其他治療。根據疣塊、覆蓋面積,選擇病灶切除或外陰切除。
七、手術刮除法:治療時左手將病變部位的皮膚或粘膜綳緊,或手持消毒刮匙自根部稍用力將病變組織刮除;關徹底清除創面的殘余病變組織,然後用33%三氯醋溶液或純碳酸溶液或3%氯化鐵液塗局部。
八、手術結扎法:適用於單個有蒡的小病灶,局部消毒和局麻後;用鑷子將疣組織提起,用止血鉗夾根部,再用1號絲線扎基基底部,一般於結扎後3-5天,疣體即可脫落。
干擾素:100萬單位天肌肉注射,連續治療10-14天然後改為每周注射3次,應用4周左右。2、局部注射:採用干擾素在病灶的基底部直接浸潤注射,一周2次。
聚肌胞(誘生劑):一次20mg肌注,第周兩次。2-4周為一療程。

它們各有其適應症,其治癒率在50%~80%之間。須遵醫囑。

尖銳濕疣一般不需要內治。但是,有些患者存在著一定程度的免疫缺陷,多次施用各種外治方法都宣告失敗,這時可配合一定的內治方法,以達到內外兼治的目的。
對尖銳濕疣的內治,主要是提高機體的免疫力和抗病毒兩個方面。西醫一般可予聚肌胞注射液2mL,肌注,隔日1次。或干擾素100~300萬單位,肌注,每周3次。前者可誘導機體產生干擾素,而干擾素具有抗病毒、抗增殖的作用。gopla在臨床中發現,α-2b干擾素的副作用相對較小,療效也不錯。另據其它專家的研究,有報告IFN-β治療尖銳濕疣的不良反應較其他型干擾素輕。由沈陽三生挑起,現在干擾素正在進行價格戰,價格跌幅超過50%,其應用將會越來越普及。

傳統的物理治療方法,如冷凍,激光,電烙,手術等,僅僅能夠破壞疣體表面組織,術後必須另外進行抗病毒治療,患者痛苦大,治療時間長,費用昂貴,也容易因為人體自身免疫能力下降而反復發作。資料顯示表明,如果單純採用激光等方法治療,47.5%的病人在七天以後即復發,並留下巴痕,影響愈後正常的夫妻生活,給患者帶來長期的精神痛苦。三氮醋酸,或其他腐蝕性及強的化合物,以單純腐蝕消除疣體為目的。雖然見效快,價格低廉,但與物理治療方法一樣,雖然能在短時間內消除疣體,但治標不治本,極易復法。

中醫治療主要是辨證論治,根據不同的患者體質,給予清熱解毒、除濕消疣的葯物進行治療。
依據中醫理論,尖銳濕疣主要是由於濕熱蘊毒引起。不但認識到尖銳濕疣的傳染性,而且特別認識到尖銳濕疣患者的體質,內因和外因相互作用才發生疾病。(1)濕熱之體 由於素喜肥甘厚味,嗜好煙酒,濕熱內蘊下注皮膚粘膜,使前後二陰局部潮濕,蘊久成毒,發為尖銳濕疣。(2)外染毒邪 多由於不潔性交,感染濕濁毒邪,發為尖銳濕疣。
中醫根據患者的體質和疣體的大小,結合全身症狀,常劃分為3型論治。它們是濕熱下注證、外染毒邪證和氣血瘀滯證。濕熱下注證常發生於素體肥胖,陰部潮濕的患者;外染毒邪證常發生於不潔性交的患者;而氣血瘀滯證主要見於濕疣日久,疣體灰暗的患者。
濕熱下注證或有肛周皮損潮濕紅潤,或有包皮過長,或有白帶過多或其他皮膚病。常伴口苦、口粘、口渴不喜飲水,大便粘滯不暢,小便黃。舌紅苔黃膩,脈弦數。這是由於肝膽濕熱下注,循經流注陰部所致。治療宜清利濕熱,解毒消疣,方葯如下:蒼術10g 黃柏10g 生苡仁30g 土茯苓30g 丹皮10g 通草10g 澤瀉10g 馬齒莧30g。方中蒼術、黃柏清下焦濕熱;生苡仁健脾除濕,具有抗病毒的功能;配土茯苓、丹皮、通草、澤瀉、馬齒莧解毒除濕,活血化瘀。如濕熱重者,可加入龍膽草10g;大便不通者,可加入蘆薈10g。
外染毒邪證常見疣體增大迅速,或合並梅毒、淋病,有明確的不潔性交史。自覺症狀常較輕或無,舌脈亦可正常。這是由於外染毒邪,毒氣蘊滯,故疣體增大迅速。治療宜清熱解毒,常用方葯為去疣三號方加減:馬齒莧60g 敗醬草15g 紫草15g 大青葉15g 木賊草15g。方中馬齒莧為主葯,清熱解毒;配合敗醬草、紫草、大青葉、木賊草加強清熱解毒、活血散結之效。如皮損灰暗,或病程較長,酌加蜂房、丹參、紅花等活血化瘀之品。
氣血瘀滯證見於皮損暗紅或暗褐色,增長緩慢,經久不消,或有疼痛的患者。舌暗淡,苔薄白,脈細澀。這是由於毒邪結聚日久,阻滯氣機,致氣血瘀阻所致。治療宜理氣活血、化瘀散結,常用方為桃紅四物湯加減:桃仁10g 紅花10g 川芎10g 當歸10g 丹參10g 蜂房10g 柴胡10g 夏枯草30g。方中取桃仁、紅花、川芎、當歸、丹參、蜂房活血化瘀;柴胡疏肝理氣,引葯直達病所;夏枯草清熱解毒,軟堅散結。如患者為氣虛者,可加入生黃芪30g,補氣解毒,提高機體免疫力;疣體堅硬者,可加入生龍牡各30g以軟堅散結。
中醫在漫長的實踐中發現了很多有效的中葯外洗方和一些有效的中葯制劑。下面介紹幾首中醫效驗方:
(1)外用熏洗 取馬齒莧60g,枯礬30g,朴硝100g。煎水熏洗,每日1~2次,每次20分鍾。熏洗後以青黛散合六一散混合撒疣體上,保持乾燥清潔。
(2)鴉膽子油外塗 鴉膽子是一種常用的中草葯,搗爛即可得鴉膽子油,它具有清熱解毒,點灼疣體的功能。若疣體小者點塗患處,或用鴉膽子仁一份,花生油三份,浸泡半月後,塗於患處。
(3)水晶膏外塗 水晶膏是中醫的傳統外用葯,它是以生石灰和糯米調成的膏葯,具有點灼疣體的作用。可取水晶膏直接塗於患處,每日1次,連用3~5天。
(4)木賊草膏 木賊草200g,水煎後濾出液再加熱濃縮成糊狀,將紗布條在葯液中浸泡2天後取出敷於患處,每日3次。現代研究證明,木賊草具有良好的抗病毒作用,它已被廣泛應用於扁平疣、尋常疣及尖銳濕疣的治療中〔隋少庚.中國中西醫結合雜志 1993;13(6)∶334 〕。
(5)坐浴方 明礬、白鮮皮、黃芩、板藍根各30g,蛇床子、川椒、地膚子、芙蓉花各15g,上葯用紗布包,加水煎至2000mL,濾渣,降溫至40℃,坐浴。本方適用於女性尖銳濕疣或男性尖銳濕疣范圍廣泛者〔王興周.中國中西醫結合雜志 1993;13(5)∶280〕。
(6)復方粉霜 方由粉霜、輕粉、黃柏、生甘草各6g,密陀僧、老黃丹各9g,冰片5g組成。研細末,以凡士林調成25%軟膏,以之點塗患處〔陳慈根.浙江中醫雜志 1994;29( 7)∶301〕。
(7)中葯外用劑 西胡椒30g,薄荷水5g,五倍子20g,共研細末,過100目篩備用。用時取少許葯粉敷患處,用手揉搓片刻,局部有麻涼、蟄痛等感覺,其程度因人而異,一般持續15~ 60分鍾,每日用葯數次〔張述文.中國皮膚性病學雜志 1993;7(2)∶121〕。
(8)疣靈擦劑 板藍根、苦參、生香附、木賊草、露蜂房各250g,陳醋500mL。使用方法:將上葯置容器內,加水5000mL,煮1小時,去渣過濾,得澄清液2000mL,兌入陳醋,即成;分裝,每瓶50mL,密封避光備用;用時,先用棉簽將疣體及其周圍正常皮膚擦乾,用0.1%新潔爾滅溶液消毒,然後將葯液塗於疣體上,待干。每日3次,2周為1療程〔王炳炎.江蘇中醫 1991;(2)∶22〕。
(9)消瘤丸,每次3~6克,每日2~3次,溫開水送服。
在中醫書籍中,有很多的食療方有助於尖銳濕疣的康復。它們的共同特點是具有清熱解毒、除濕消疣的作用。
(1)蛇舌草飲(《中葯大辭典》):白花蛇舌草30~60g水煎取汁,去渣,調入蜂蜜適量,頻飲。適應證:尖銳濕疣中醫辨證屬毒熱者。
(2)菝葜飲(《中葯大辭典》)菝葜根500g、甘草25g,水煎2次,濾液合並,再以文火濃縮至100mL,每服50mL,每日2次。適應證尖銳濕疣中醫辨證屬毒熱者。
(3)馬齒莧250克,麵粉150克,製成包子蒸食,分餐食用。
家庭自療:
1.敷貼:①代赭石40克,枯礬5克,冰片5克。共研成細末,用時干撲於患處,每天2次,直至病癒。②滑石30克,甘草5克,枯礬粉12克。共研細末,在熏洗後把粉撒在疣體上,以保持乾燥。
2.熏洗:①馬齒莧60克,大青葉30克,明礬20克,丹皮20克,煎水先熏後洗,每日2次。②苡仁、大青葉、板藍根、牡蠣各30克,敗醬草、夏枯草、赤芍各15克。水煎先熏後洗,每次15~20分鍾,每日2次。

1/3尖銳濕疣患者同時伴發一種或多種性傳播疾病,如淋病、滴蟲病、梅毒、衣原體感染。因此,即使無症狀也應進行常規檢查。對已經治癒的患者,仍應定期仔細檢查、防止復發。反復復發的濕疣,要注意有無癌變,需有組織病理學檢查結果。
保持易致病部位乾燥清潔。

㈡ 液基細胞耗材包括哪些耗材哪個廠家比較全、質量好

液基細胞TCT耗材包括取材部分、製片部分、染色部分耗材;康乃欣生物專注液基10年,是液基細胞試劑專業廠家,規格、型號非常齊全,包括:一次性采樣器、細胞保存液、細胞梯度離心液、緩沖液、沖洗液、超強粘附細胞載玻片、巴氏染色液、沉降倉、吸嘴、離心管、過濾網、蓋玻片等

㈢ 巴氏染色的巴氏染色的操作方法及注意事項

染色有4個步驟:1、固定;2、核染色;3、胞漿染色;4、透明。
主要達到以下要求:1、核的結構清晰;2、透明度高;3、分色恰當。 固定的目的細胞製片的迅速固定是製片過程中關鍵的一步,否則會影響細胞學診斷的准確性。對於不同的標本需要不同的固定方法。最為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細胞內的酶捋蛋白質分解而自容,並凝固細胞內的物質如蛋白質、脂肪和糖類等,使其保持與組織生活相仿的成分,從而使細胞各部分,尤其核染色質易於著色。對於巴氏染色來說,酒精固定最為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳,可造成細胞的人為變化,並可導致假陽性或假陰性的診斷。
1、固定方法濕固定法:作為用95%酒精固定液固定的細胞學標本一定使用濕固定法。製片制備完後,趁標本新鮮而又濕潤時,立即放入盛有95%酒精的固定缸內。製片在固定液內至少保持15-30min。固定時間通常不超過1周。這種製片染色後,顏色鮮艷,結構清晰。如果細胞製片需要送至另一實驗室或郵寄他處染色時,可以固定15min後,把製片取出後立即密封的容器中或者使用甘油防止製片乾燥。因為無論固定前或固定後的製片,如果發生乾燥後都會影響染色的效果。
2、固定注意事項固定液的過濾:為了防止細胞污染,凡是使用過的固定液,必須過濾後才能再使用。使用過長的固定液,必須用酒精相對密度計測定,酒精濃度低於90%時應該及時更換新液。濕固定的重要性:標本再新鮮時及時固定時保證染色效果的重要因素。如蘇木素對細胞核的染色,巴氏染色中胞漿的特殊著色作用,均可因標本乾燥後固定而大受影響。製片標本的郵寄:標本再固定15min後取出,立即加甘油數滴於製片上,裝入密封的小盒中。實驗室在收到標本後,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再進行染色。 1、 蘇木素液浸染時間一般在3-5min,但是必須隨氣溫和染料情況而酌情改變。夏季或放置較久的蘇木素染液容易著色,時間要縮短;冬季或新配製的蘇木素染液和應用已久較稀釋的蘇木素液不易著色,時間要延長。在使用蘇木素染色時,一般有2種方法:
1)過染法:首先有意識地進行深染,然後通過鹽酸酸化過程使核染色趨於合適。這種方法能夠在酸化過程中把胞漿內黏附多餘的蘇木素染料去掉,使胞漿染色更為鮮艷、清晰、多用於黏液多的標本。
2)淡染法:在核染色過程中,嚴格掌握染色時間,使核染色適宜而不用鹽酸酸化,但是胞漿中少量的蘇木素會影響EA染色的質量。主要用於黏液少的標本,避免在酸化和自 來水沖洗的過程中使細胞成片地脫落。在使用蘇木素染色時,一定要每日進行過濾,否則蘇木素結晶會影響染色的質量。一般蘇木素染液可以使用較長時間,所以每日增加少量新鮮染液即可。
2、鹼化鹼化亦稱返藍過程,可以使用飽和碳酸鋰或3%氨水鹼化,目的使蘇木素及早顯色,時間約數秒。更重要的是流水沖洗,可使藍色顯的更鮮艷。鹼性溶液亦需要充分漂清才不會妨礙下一步的胞漿著色及標本製成後的顏色保存。分化和鹼化溶液至少每天更換新液。 (1)細胞核著色過淺:
1)鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長鹼化時間;每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配製蘇木素液。
2)在固定之前製片乾燥。所以對巴氏染色的製片需要嚴格遵守濕固定的原則。
3)自來水的PH值偏酸性。使用鹼性溶液。
(2)細胞核著色過深:
1)鹽酸溶液濃度不夠。適當加入幾滴鹽酸以增加濃度。
2)製片用高於95%以上濃度的酒精固定後可以出現染色過深。應用95%酒精固定。 (1)如果全片內胞漿都淡染,則需要延長染色時間或更換新液。
(2)如果胞漿不分色,均為淺紅色。製片在固定前乾燥或製片被有大量球菌樣細菌影響胞漿染色。此情況可以適當增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。
(3)胞漿染成灰色或紫色,是由於蘇木素染色時間過長或鹽酸分化不佳。經過褪色後重新蘇木素可以糾正。
(4)由於標本的不同,同樣配方的EA染液可造成偏藍、偏綠和偏紅,對不同的標本應該使用不同的EA染液。一般認為,EA36和EA50用於婦科標本,而EA65或改良EA用於非婦科標本。
(5)胞漿不分色的另一重要原因是由於EA染液的PH值不恰當所致。如染色為紅色,可以加少許磷鎢酸溶液糾正;如染色均為藍色或綠色,可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。對於改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸後染色效果更佳;染液使用更持久。

什麼是巴氏染色巴氏染色的操作方法

巴氏染色有4個步驟,分別是固定、核染色、胞漿染色和透明,那麼你對巴氏染色了解多少呢?以下是由我整理關於什麼是巴氏染色的內容,希望大家喜歡!

巴氏染色的操作 方法 及注意事項
染色有4個步驟:1、固定;2、核染色;3、胞漿染色;4、透明。

主要達到以下要求:1、核的結構清晰;2、透明度高;3、分色恰當。

固定

固定的目的細胞製片的迅速固定是製片過程中關鍵的一步,否則會影響細胞學診斷的准確性。對於不同的標本需要不同的固定方法。最為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細胞內的酶捋蛋白質分解而自容,並凝固細胞內的物質如蛋白質、脂肪和糖類等,使其保持與組織生活相仿的成分,從而使細胞各部分,尤其核染色質易於著色。對於巴氏染色來說,酒精固定最為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳,可造成細胞的人為變化,並可導致假陽性或假陰性的診斷。

1、固定方法濕固定法:作為用95%酒精固定液固定的細胞學標本一定使用濕固定法。製片制備完後,趁標本新鮮而又濕潤時,立即放入盛有95%酒精的固定缸內。製片在固定液內至少保持15-30min。固定時間通常不超過1周。這種製片染色後,顏色鮮艷,結構清晰。如果細胞製片需要送至另一實驗室或郵寄他處染色時,可以固定15min後,把製片取出後立即密封的容器中或者使用甘油防止製片乾燥。因為無論固定前或固定後的製片,如果發生乾燥後都會影響染色的效果。

2、固定注意事項固定液的過濾:為了防止細胞污染,凡是使用過的固定液,必須過濾後才能再使用。使用過長的固定液,必須用酒精相對密度計測定,酒精濃度低於90%時應該及時更換新液。濕固定的重要性:標本再新鮮時及時固定時保證染色效果的重要因素。如蘇木素對細胞核的染色,巴氏染色中胞漿的特殊著色作用,均可因標本乾燥後固定而大受影響。製片標本的郵寄:標本再固定15min後取出,立即加甘油數滴於製片上,裝入密封的小盒中。實驗室在收到標本後,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再進行染色。

核染色

1、 蘇木素液浸染時間一般在3-5min,但是必須隨氣溫和染料情況而酌情改變。夏季或放置較久的蘇木素染液容易著色,時間要縮短;冬季或新配製的蘇木素染液和應用已久較稀釋的蘇木素液不易著色,時間要延長。在使用蘇木素染色時,一般有2種方法:

1)過染法:首先有意識地進行深染,然後通過鹽酸酸化過程使核染色趨於合適。這種方法能夠在酸化過程中把胞漿內黏附多餘的蘇木素染料去掉,使胞漿染色更為鮮艷、清晰、多用於黏液多的標本。

2)淡染法:在核染色過程中,嚴格掌握染色時間,使核染色適宜而不用鹽酸酸化,但是胞漿中少量的蘇木素會影響EA染色的質量。主要用於黏液少的標本,避免在酸化和自 來水沖洗的過程中使細胞成片地脫落。在使用蘇木素染色時,一定要每日進行過濾,否則蘇木素結晶會影響染色的質量。一般蘇木素染液可以使用較長時間,所以每日增加少量新鮮染液即可。

2、鹼化鹼化亦稱返藍過程,可以使用飽和碳酸鋰或3%氨水鹼化,目的使蘇木素及早顯色,時間約數秒。更重要的是流水沖洗,可使藍色顯的更鮮艷。鹼性溶液亦需要充分漂清才不會妨礙下一步的胞漿著色及標本製成後的顏色保存。分化和鹼化溶液至少每天更換新液。

胞漿染色

胞漿染色在巴氏方法中亦稱為OG—EA染色,它包括橘黃G(OG)和EA兩部分染色。由於橘黃G是一種小分子染料,能夠很快地作用於胞漿,一般染色時間不宜過長,通常1-2min。對於宮頸、陰道上皮中非正常角化細胞和角化型鱗癌細胞的胞漿中都可以出現鮮艷的橘黃色。

封固製片

封固製片對於避免空氣乾燥的影響,製片經長期存放不褪色是非常重要的。一般使用24mm×50mm或24mm×60mm的蓋玻片,用二甲苯調配的中性樹膠進行封固。

透明

染色的最後一步是透明,使細胞的色度與細胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與製片封固之間的一項重要步驟。最常用的透明溶劑使二甲苯,二甲苯的折射率在1.494,載玻片的折射率在1.515,兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現顏色或變得渾濁,一定要更換新液。 巴氏染色操作流程 95%乙醇固定(15min)→清水沖洗多次→蘇木素染液(3-5min)→清水沖洗三次→藍化→95%乙醇漂洗→橙黃染液(1-10s)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50(3-5m)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇(2min)→二甲苯(2min)→中性樹膠封片。
染色的注意事項
細胞核著色不佳

(1)細胞核著色過淺:

1)鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長鹼化時間;每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配製蘇木素液。

2)在固定之前製片乾燥。所以對巴氏染色的製片需要嚴格遵守濕固定的原則。

3)自來水的PH值偏酸性。使用鹼性溶液。

(2)細胞核著色過深:

1)鹽酸溶液濃度不夠。適當加入幾滴鹽酸以增加濃度。

2)製片用高於95%以上濃度的酒精固定後可以出現染色過深。應用95%酒精固定。

細胞漿著色不佳

(1)如果全片內胞漿都淡染,則需要延長染色時間或更換新液。

(2)如果胞漿不分色,均為淺紅色。製片在固定前乾燥或製片被有大量球菌樣細菌影響胞漿染色。此情況可以適當增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。

(3)胞漿染成灰色或紫色,是由於蘇木素染色時間過長或鹽酸分化不佳。經過褪色後重新蘇木素可以糾正。

(4)由於標本的不同,同樣配方的EA染液可造成偏藍、偏綠和偏紅,對不同的標本應該使用不同的EA染液。一般認為,EA36和EA50用於婦科標本,而EA65或改良EA用於非婦科標本。

如何調整巴氏染色液使細胞胞漿呈藍色

如何調整巴氏染色液使細胞胞漿呈藍色
巴氏染色法是脫落細胞染色中最好的染色方法。蘇木素染液,細胞核內的染色質主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結構中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精鹼性染料以離子或氫鍵結合而被染色。蘇木精在鹼性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
分化:蘇木素染色之後,用水洗去未結合在細胞上的染液,但是在細胞核中結合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細胞核和細胞漿染色的分明,把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使色素與組織解離,分化不可過度。藍化:分化之後蘇木素在酸性條件下處於紅色離子狀態,在鹼性條件下處於藍色離子狀態,而呈藍色,所以分化之後用水洗去酸而中止分化,再用弱鹼性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色,稱藍化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍,也可用溫水(50度溫水最佳)變藍。EA50染液的酸鹼度對於巴氏染色的成功起著關鍵作用,EA50染液由伊紅、亮綠、等染料配成。伊紅、亮綠、橘黃等屬於酸性染料,在溶解媒中其發色團是負離子部分,發色團可與蛋白質中帶正電的氨基結合,從而是胞漿顯藍色、綠色、橘黃色或紅色,但蛋白質所帶正負電荷的多少是隨溶液的PH值而改變的,在偏鹼環境中,蛋白質的羧基游離增多(帶負電),在偏酸環境中蛋白質氨基游離增多(帶正電),磷鎢酸在染色過程中,不但作為媒染劑可增加染料的著色力,同時磷鎢酸與碳酸鋰還是一對弱酸弱鹼,實際上是一對緩沖劑,可中和分化及藍化時可能留下的少量酸或鹼,保證染色達到理想效果,其適用於上皮細胞及間皮組織的標本,是陰道脫落細胞檢查中最常用的染色方法,該染色法不但具有顯示細胞核結構清晰、分色明顯、透明度好、胞漿受色鮮艷等特點。
巴氏染色法將胞核染為深藍色;鱗狀上皮底層、中層及表層角化前細胞胞質染綠色,表層不全形化細胞胞質染粉紅色,完全形化細胞胞質呈桔黃色;細菌:灰色;滴蟲:淡藍灰色;黏液:淡藍色或粉紅色;中性粒細胞和淋巴細胞、吞噬細胞胞質均為藍色;紅細胞染粉紅色;高分化鱗癌細胞可染成粉紅色或桔黃色;腺癌胞質呈灰藍色。

㈥ 如何檢測是否感染HPV病毒

可以用篩查包,自助式尿液檢查

㈦ 巴氏染色的原理是什麼

巴氏染色液的染色原理:

核酸等電點為PH1.5-2.0,當PH>2.0時,能結合帶正電荷的蘇木素。染料中的伊紅、亮綠、橙黃等為酸性染料,俾士麥棕為鹽基性染料,能與細胞漿中相反電荷的蛋白質結合,從而染出鮮艷的結構。

細胞學常規染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法,橘黃G與EA36或EA50聯合使用可將胞漿染成顏色鮮明的綠色、藍色和粉色,細胞中的細胞核是由酸性物質組成,它與鹼性染料的親和力較強;而細胞漿則相反,它含有鹼性物質和酸性染料的親和力較大。

巴氏染色液正是利用這一特性對細胞進行多色性染色,細胞經染色後能清晰地顯示細胞的結構,胞質透亮鮮麗,各種顆粒分明,細胞核染色質非常清楚,從而較容易發現異常細胞。

巴氏染色注意事項:

一、細胞核著色不佳

1、細胞核著色過淺:

(1)鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長鹼化時間;每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配製蘇木素液。

(2)在固定之前製片乾燥。所以對巴氏染色的製片需要嚴格遵守濕固定的原則。

(3)自來水的PH值偏酸性。使用鹼性溶液。

2、細胞核著色過深:

(1)鹽酸溶液濃度不夠。適當加入幾滴鹽酸以增加濃度。

(2)製片用高於95%以上濃度的酒精固定後可以出現染色過深。應用95%酒精固定。

二、細胞漿著色不佳

1、如果全片內胞漿都淡染,則需要延長染色時間或更換新液。

2、如果胞漿不分色,均為淺紅色。製片在固定前乾燥或製片被有大量球菌樣細菌影響胞漿染色。此情況可以適當增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。

3、胞漿染成灰色或紫色,是由於蘇木素染色時間過長或鹽酸分化不佳。經過褪色後重新蘇木素可以糾正。

4、由於標本的不同,同樣配方的EA染液可造成偏藍、偏綠和偏紅,對不同的標本應該使用不同的EA染液。一般認為,EA36和EA50用於婦科標本,而EA65或改良EA用於非婦科標本。

5、胞漿不分色的另一重要原因是由於EA染液的PH值不恰當所致。如染色為紅色,可以加少許磷鎢酸溶液糾正;如染色均為藍色或綠色,可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。對於改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸後染色效果更佳;染液使用更持久。

㈧ 巴氏染色的原理是什麼

摘要  您好,我是陳老師,已經累計提供咨詢服務近100人,累計服務時長超過2400小時! 您的問題我已經看到了,現在正在整理答案,大概需要三分鍾,請您稍等一會兒哦~

㈨ 請教巴氏染色的原理,越詳細越好

巴氏染色法是脫落細胞染色中最好的染色方法。蘇木素染液,細胞核內的染色質主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結構中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精鹼性染料以離子或氫鍵結合而被染色。蘇木精在鹼性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。 分化:蘇木素染色之後,用水洗去未結合在細胞上的染液,但是在細胞核中結合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細胞核和細胞漿染色的分明,把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使色素與組織解離,分化不可過度。藍化:分化之後蘇木素在酸性條件下處於紅色離子狀態,在鹼性條件下處於藍色離子狀態,而呈藍色,所以分化之後用水洗去酸而中止分化,再用弱鹼性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色,稱藍化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍,也可用溫水(50度溫水最佳)變藍。EA50染液的酸鹼度對於巴氏染色的成功起著關鍵作用,EA50染液由伊紅、亮綠、等染料配成。伊紅、亮綠、橘黃等屬於酸性染料,在溶解媒中其發色團是負離子部分,發色團可與蛋白質中帶正電的氨基結合,從而是胞漿顯藍色、綠色、橘黃色或紅色,但蛋白質所帶正負電荷的多少是隨溶液的PH值而改變的,在偏鹼環境中,蛋白質的羧基游離增多(帶負電),在偏酸環境中蛋白質氨基游離增多(帶正電),磷鎢酸在染色過程中,不但作為媒染劑可增加染料的著色力,同時磷鎢酸與碳酸鋰還是一對弱酸弱鹼,實際上是一對緩沖劑,可中和分化及藍化時可能留下的少量酸或鹼,保證染色達到理想效果,其適用於上皮細胞及間皮組織的標本,是陰道脫落細胞檢查中最常用的染色方法,該染色法不但具有顯示細胞核結構清晰、分色明顯、透明度好、胞漿受色鮮艷等特點。

巴氏染色法將胞核染為深藍色;鱗狀上皮底層、中層及表層角化前細胞胞質染綠色,表層不全形化細胞胞質染粉紅色,完全形化細胞胞質呈桔黃色;細菌:灰色;滴蟲:淡藍灰色;黏液:淡藍色或粉紅色;中性粒細胞和淋巴細胞、吞噬細胞胞質均為藍色;紅細胞染粉紅色;高分化鱗癌細胞可染成粉紅色或桔黃色;腺癌胞質呈灰藍色。

巴氏染色的操作方法及注意事項
染色有4個步驟:1、固定;2、核染色;3、胞漿染色;4、透明。
主要達到以下要求:1、核的結構清晰;2、透明度高;3、分色恰當。
一、固定
固定的目的細胞製片的迅速固定是製片過程中關鍵的一步,否則會影響細胞學診斷的准確性。對於不同的標本需要不同的固定方法。最為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細胞內的酶捋蛋白質分解而自容,並凝固細胞內的物質如蛋白質、脂肪和糖類等,使其保持與組織生活相仿的成分,從而使細胞各部分,尤其核染色質易於著色。對於巴氏染色來說,酒精固定最為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳,可造成細胞的人為變化,並可導致假陽性或假陰性的診斷。
1、固定方法濕固定法:作為用95%酒精固定液固定的細胞學標本一定使用濕固定法。製片制備完後,趁標本新鮮而又濕潤時,立即放入盛有95%酒精的固定缸內。製片在固定液內至少保持15-30min。固定時間通常不超過1周。這種製片染色後,顏色鮮艷,結構清晰。如果細胞製片需要送至另一實驗室或郵寄他處染色時,可以固定15min後,把製片取出後立即密封的容器中或者使用甘油防止製片乾燥。因為無論固定前或固定後的製片,如果發生乾燥後都會影響染色的效果。
2、固定注意事項固定液的過濾:為了防止細胞污染,凡是使用過的固定液,必須過濾後才能再使用。使用過長的固定液,必須用酒精相對密度計測定,酒精濃度低於90%時應該及時更換新液。濕固定的重要性:標本再新鮮時及時固定時保證染色效果的重要因素。如蘇木素對細胞核的染色,巴氏染色中胞漿的特殊著色作用,均可因標本乾燥後固定而大受影響。製片標本的郵寄:標本再固定15min後取出,立即加甘油數滴於製片上,裝入密封的小盒中。實驗室在收到標本後,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再進行染色。
二、核染色
1、 蘇木素液浸染時間一般在3-5min,但是必須隨氣溫和燃料情況而酌情改變。夏季或放置較久的蘇木素染液容易著色,時間要縮短;冬季或新配製的蘇木素染液和應用已久較稀釋的蘇木素液不易著色,時間要延長。在使用蘇木素染色時,一般有2種方法:
1)過染法:首先有意識地進行深染,然後通過鹽酸酸化過程使核染色趨於合適。這種方法能夠在酸化過程中把胞漿內黏附多餘的蘇木素染料去掉,使胞漿染色更為鮮艷、清晰、多用於黏液多的標本。
2)淡染法:在核染色過程中,嚴格掌握染色時間,使核染色適宜而不用鹽酸酸化,但是胞漿中少量的蘇木素會影響EA染色的質量。主要用於黏液少的標本,避免在酸化和自 來水沖洗的過程中使細胞成片地脫落。在使用蘇木素染色時,一定要每日進行過濾,否則蘇木素結晶會影響染色的質量。一般蘇木素染液可以使用較長時間,所以每日增加少量新鮮染液即可。
2、鹼化鹼化亦稱返藍過程,可以使用飽和碳酸鋰或3%氨水鹼化,目的使蘇木素及早顯色,時間約數秒。更重要的是流水沖洗,可使藍色顯的更鮮艷。鹼性溶液亦需要充分漂清才不會妨礙下一步的胞漿著色及標本製成後的顏色保存。分化和鹼化溶液至少每天更換新液。
三、胞漿染色
胞漿染色在巴氏方法中亦稱為OG—EA染色,它包括橘黃G(OG)和EA兩部分染色。由於橘黃G是一種小分子染料,能夠很快地作用於胞漿,一般染色時間不宜過長,通常1-2min。對於宮頸、陰道上皮中非正常角化細胞和角化型鱗癌細胞的胞漿中都可以出現鮮艷的橘黃色。
四、封固製片
封固製片對於避免空氣乾燥的影響,製片經長期存放不褪色是非常重要的。一般使用24mm×50mm或24mm×60mm的蓋玻片,用二甲苯調配的中性樹膠進行封固。
五、透明
染色的最後一步是透明,使細胞的色度與細胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與製片封固之間的一項重要步驟。最常用的透明溶劑使二甲苯,二甲苯的折射率在1.494,載玻片的折射率在1.515,兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現顏色或變得渾濁,一定要更換新液。 巴氏染色操作流程 95%乙醇固定(15min)→清水沖洗多次→蘇木素染液(3-5min)→清水沖洗三次→藍化→95%乙醇漂洗→橙黃染液(1-10s)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50(3-5m)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇(2min)→二甲苯(2min)→中性樹膠封片
染色注意事項
1、細胞核著色不佳
(1)細胞核著色過淺:
1)鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長鹼化時間;每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配製蘇木素液。
2)在固定之前製片乾燥。所以對巴氏染色的製片需要嚴格遵守濕固定的原則。
3)自來水的PH值偏酸性。使用鹼性溶液。
(2)細胞核著色過深:
1)鹽酸溶液濃度不夠。適當加入幾滴鹽酸以增加濃度。
2)製片用高於95%以上濃度的酒精固定後可以出現染色過深。應用95%酒精固定。
2、細胞漿著色不佳
(1)如果全片內胞漿都淡染,則需要延長染色時間或更換新液。
(2)如果胞漿不分色,均為淺紅色。製片在固定前乾燥或製片被有大量球菌樣細菌影響胞漿染色。此情況可以適當增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。
(3)胞漿染成灰色或紫色,是由於蘇木素染色時間過長或鹽酸分化不佳。經過褪色後重新蘇木素可以糾正。
(4)由於標本的不同,同樣配方的EA染液可造成偏藍、偏綠和偏紅,對不同的標本應該使用不同的EA染液。一般認為,EA36和EA50用於婦科標本,而EA65或改良EA用於非婦科標本。
(5)胞漿不分色的另一重要原因是由於EA染液的PH值不恰當所致。如染色為紅色,可以加少許磷鎢酸溶液糾正;如染色均為藍色或綠色,可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。對於改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸後染色效果更佳;染液使用更持久

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