檢測硝基還原酶都有哪些方法

⑴ 植物NiR（亞硝酸還原酶）酶活性測定，急急急！！！不勝感激！

可採用「微量擴散比色法測定植物體內硝酸還原酶與亞硝酸還原酶的活性」方法來測定，原理為：植物體內硝酸還原酶(NR) 和亞硝酸還原酶(NiR)活性的測定一般是根據底物的減少來衡量的。本方法則是根據酶促反應的最終產物(氨)的釋放來衡量的,能較真實地反映酶活性的大小。測定時,可通過外源基質的選擇來衡量硝酸還原酶或亞硝酸還原酶的活性。

⑵ 氧化還原酶酶活測定方法

氧化還原酶能催化兩分子間發生氧化還原作用的酶的總稱。其中氧化酶（oxidase;oxydase）能催化物質被氧氣所氧化的作用，脫氫酶（dehydrogenase）能催化從物質分子脫去氫的作用。氧化還原酶對於電子供體和受體的一方或兩方都有特異性,並根據其特異性而進行分類。
這是一大類的統稱,沒有統一的測活方法.你首先要確定你的酶的電子供體受體是什麼.

⑶ 有誰知道測植物硝酸還原酶活性時用到的NADH是什麼啊

還原性煙醯胺腺嘌呤二核苷酸也叫還原型輔酶Ⅰ

⑷ 硝酸還原酶活性測定中，活體法和離體法有什麼優點

硝酸還原酶活性的測定方法主要有離體法和活體法,又分別稱為離體法和活體法。離體法操作手續繁雜、要求條件較高;體內法簡便、快速,採用漸多。活體法存在NRA 測定值偏低、重復性不夠理想的缺點,因而需要針對不同的測定材料,對活體法做進一步的探討,確定最佳的測定條件。
NR的測定可分為活體法和離體法。
活體法步驟簡單，適合快速、多組測定。
離體法操作復雜，但重復性較好。

NR測定原理：
硝酸還原酶（NR）是植物氮素同化的關鍵酶，它催化植物體內的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,產生的亞硝酸鹽與對–氨基苯磺酸（或對–氨基苯磺醯胺）及α–萘胺（或萘基乙烯二胺）在酸性條件下定量生成紅色偶氮化合物。

⑸ 酶活力的常用測定方法

常用的測定方法有取樣法和連續法。

1、取樣法

在酶反應開始後不同的時間，從反應系統中取出一定量的反應液，並用適當方法停止其反應，再根據產物和底物在化學性質上的差別進行分析，求得單位時間內酶促反應的變化量。

2、連續法

基於底物和產物在物理化學性質上的不同，在反應過程中對反應系統添加酶的變性劑以終止反應，常用的連續測定法是光吸收測定法，即根據產物和底物在某一波長或波段上有明顯的特徵吸收差別而建立起來的連續觀測方法，幾乎所有的氧化還原酶都可用此法測定。

此外如熒光法、旋光法、電化學法也是常用的連續測定方法。對不易直接測定的反應，可使用酶偶聯分析法，即用過量、專一的「偶聯工具酶」，使被測反應繼續進行到某一可直接測定的階段。近年來，酶活性的測定工作正向兩個方向發展，超微量酶活的靈敏測定，實現測定過程的自動化控制。

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酶活力的大小可以用在一定條件下，它所催化的某一化學反應的轉化速率來表示，即酶催化的轉化速率越快，酶的活力就越高；反之，速率越慢，酶的活力就越低。所以，測定酶的活力就是測定酶促轉化速率。酶轉化速率可以用單位時間內單位體積中底物的減少量或產物的增加量來表示。

酶活力的測定既可以通過定量測定酶反應的產物或底物數量隨反應時間的變化，也可以通過定量測定酶反應底物中某一性質的變化，如黏度變化來測定。通常是在酶的最適PH 值和離子強度以及指定的溫度下測定酶活力。

⑹ 測定硝酸還原酶的材料為什麼要提前一天施用一定量的硝態氮肥，並且取樣應在晴天進行

硝態氮肥即硝酸鹽，硝酸還原酶是誘導酶，硝酸鹽誘導硝酸還原酶的合成，為實驗提供足量的酶。晴天植物進行光合作用，積累足夠的NADH和碳水化合物（能量）提供反應。

硝酸還原酶位於細胞質內或細胞膜外，在硝酸鹽還原途徑中是限速因子，通過 NADH和 NADPH 其中之一或兩者（雙功能）提供兩個電子催化反應，使硝酸鹽轉換成亞硝酸鹽。

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研究植物硝酸還原酶和亞硝酸還原酶活性的意義

植物通過硝酸鹽同化途徑以硝酸鹽和氨的形式吸收氮元素。硝酸鹽的同化是一個受到嚴格控制的過程，其中兩個先後參加反應的酶——硝酸還原酶（NR)）和亞硝酸還原酶（NiR）對初級氮的同化起主要調控。

在高等植物中，NR和NiR基因的轉錄及轉錄後加工受到各種內在和外在因素的影響，翻譯後調控是消除亞硝酸鹽積累的重要機制。隨著分子生物學技術的發展，可以更容易地通過突變體和轉基因方式來研究NR和NiR基因的調控。

⑺ 還原酶活性測定方法

實驗方法
預先將丙酮酸鈉溶液及NADH溶液放在25℃水浴中預熱。
取2支石英比色杯，在2支比色杯中加入0.1mol/L pH7.5磷酸氫二鉀-磷酸二氫鉀緩沖液3ml，置於紫外分光光度計中，在340nm處將光吸收調節至零；另一支比色杯用於測定LDH活力依次加入丙酮酸鈉溶液2.9ml、NADH溶液0.1ml，加蓋搖勻後，測定340nm光吸收比值。
取出比色杯，加入稀釋後的酶溶液10μl，立即即時，搖勻後，每隔0.5分鍾測A340，連續測定3分鍾。
以A對時間作圖，取反應最初線性部分，計算沒分鍾A340減少值。
注意事項
實驗材料應盡量新鮮，如取材後不立即用，則應儲存在-20℃冰箱。
酶液的稀釋度及加入量應控制每分鍾A340下降值在0.1~0.2之間，以減少實驗誤差。
NADH溶液應在臨用前配製。

⑻ 硝酸還原酶的輔基有哪些

生物界以NADH或NADPH為輔酶硝酸還原酶有三個類別，其中高等植物子葉中則以()硝酸還原酸酶為主，在綠藻、酵母中存在著()硝酸還原酶或()硝酸還原酶。

⑼ 硝酸還原酶活性測定中，活體法和離體法有什麼優缺點

硝酸還原酶活性的測定方法主要有離體法和活體法,又分別稱為離體法和活體法。離體法操作手續繁雜、要求條件較高;體內法簡便、快速,採用漸多。活體法存在NRA 測定值偏低、重復性不夠理想的缺點,因而需要針對不同的測定材料,對活體法做進一步的探討,確定最佳的測定條件。

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⑽ 測定硝酸還原酶材料為什麼要提前一天施用一定量的硝態氮肥並且取樣應在晴天進行

硝酸還原酶是誘導酶，光照是其誘導條件之一，所以應在光合作用進行了一段時間以後（3h）采樣，田間采樣應在早晨9點鍾以後。