隱球菌檢測有哪些方法

1. 臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗知識

臨床微生物檢驗之病原性真菌檢驗知識

真菌是一大類不含葉綠素，無根、莖、葉，由單細胞或多細胞組成的真核細胞型微生物。大部分真菌對人類有益，能引起人類疾病的病原性真菌主要包括淺部真菌和深部真菌。下面是我為大家帶來的病原性真菌檢驗的知識，歡迎閱讀。

一、常見單細胞真菌的形態觀察

1、新型隱球菌墨汁負染色片：可見菌體呈球形，大小不一，有很厚的莢膜，包圍在菌體周圍，透明發亮，並可見發芽的菌體。

2、白色念珠菌菌體形態：用患者的棉拭子標本常法塗片，革蘭氏染色，鏡檢。顯微鏡下可見菌體呈卵圓形，較葡萄球菌大2-5倍，細胞出芽伸長而成假菌絲，在假菌絲生長點上有芽生孢子及沿假菌絲頂端生長的`大而圓的厚膜孢子。

二、皮膚絲狀菌的檢查

材料：

病人的甲屑、皮屑或毛發、10%KOH溶液、載玻片、蓋玻片、小鑷子、普通光學顯微鏡等。

方法：

1、采標本：用鈍刀在手、足、體癬損害部位邊緣輕輕刮取皮屑，甲癬可用小刀刮取病損指(趾)甲深層碎屑。

2、製片：用小鑷子取少許皮(甲)屑標本置於載玻片中央，滴1-2滴10%KOH溶液，覆加一蓋玻片，在火焰上緩慢加熱，以加速角質溶解，使標本透明，然後輕輕加壓使成薄片，驅走氣泡並吸去周圍溢液。

3、鏡檢：先用低倍鏡觀察有無真菌菌絲或孢子，再用高倍鏡觀察菌絲、孢子的特徵。鏡檢時光線應稍弱，使視野稍暗。陽性標本常可查見分支菌絲或孢子。

三、真菌的培養

材料：

菌種、沙保氏培養基、平皿、載玻片、蓋玻片。

方法：

1、一般培養：分別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種於沙保氏培養基，於22℃-28℃下培養(深部真菌可培養於37℃環境)，一周後觀察菌落特徵。真菌菌落在形態上可分為三大類：

酵母型菌落：與細菌菌落相似，圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑濕潤。

類酵母型菌落：同酵母型菌落，圓形、較大、白色，但菌落根部有假菌絲長入培養基內。

絲狀菌落：是多細胞真菌的菌落形式。有許多疏鬆的菌絲體構成，菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀，菌落中央有皺折，外圍有放射狀溝。其正面和背景又可顯示各種不同顏色。

2、小培養(玻片法)：在無菌平皿中先傾注10-15ml沙保葡萄糖瓊脂，待凝固後，無菌操作將瓊脂切成約0.5cm的方塊，再將瓊脂塊移放在滅菌的載玻片上，然後在小塊培養基四邊接種已分純的真菌菌種，蓋上無菌蓋玻片，移入有一定濕度的無菌平皿內，置22℃-28℃孵育。動態觀察生長過程，根據菌絲和孢子的特點鑒定真菌類別。

2. 試述真菌的概念及其常用的檢驗方法。

有細胞核，不含葉綠素，胞漿內有完整的細胞器，能進行有性和無性繁殖，以寄生或腐生方式生存的真核細胞型微生物稱為真菌。
目前大多數真菌的檢驗，依靠形態學鑒定，即直接塗片法檢驗。
在臨床檢驗中常見的是酵母樣菌的感染，其中以念珠菌屬、隱球菌屬、毛孢子菌屬、酵母菌屬等為多見。
酵母樣菌的檢驗方法包括直接塗片、分離培養及鑒定、動物接種和血清學試驗。如新型隱球菌和白色念珠菌的基本檢驗為尿素酶和芽管形成試驗，尿素酶陽性為新型隱球菌，有芽管形成者為白色念珠菌。