1. 線粒體自噬的激活如何檢測
隨著對生物體內氧自由基檢測手段的提高，如電子順磁共振(ESR)的應用，人們線粒體鈣反常也會損傷線粒體膜，如Ca2＋可激活PLA2，使膜脂降解〔37〕
2. 組織中的ros一般用什麼方法檢測
活性氧檢測試劑盒是利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內後，可以被細胞內的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜，從而使探針很容易被裝載到細胞內。細胞內的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細胞內活性氧的水平。活性氧檢測試劑盒。
熒光法檢測線粒體產生和釋放的反應性氧化物（ROS）[10]。羥基自由基的檢測（二羥苄胺DHBAs和水楊酸鹽Salicylate）[11] ROS was evaluated by the staining of 2』，7』- dichlorofluorescein diacetate（二氯熒光乙醯乙酸鹽）.ROS proction was detected by nitroblue tetrazolium （NBT，硝基四氮唑藍）assay。
目前，對於細胞線粒體產生的ROS 測定，所發展的方法有（熒游標記後）激光掃描共聚焦顯微術（Takahashi et al.，2002）和熒光探劑DCFDA標記後的熒光分光光度法（Esposti ，2002）等，本實驗以lucigenin 或luminol 為探劑，用化學發光技術，對從正常大鼠肝細胞及心肌細胞分離的線粒體的METC 電子漏進行了測定
3. jc-1檢測線粒體膜電位時應注意什麼
1）原理：JC-1是一種廣泛用於檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm 的理想熒光探針。在線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以產生橙色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1為單體(monomer)，可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。
（2）材料與儀器
JC-1購自Sigma公司，分子量652.23，用DMSO溶解，儲存濃度為5 mg/ml，終濃度稀釋成10 µg/ml; 熒光顯微鏡，多功能熒光酶標儀
（3）步驟
① 接種細胞：96孔板，接種細胞數為每孔1.5萬；或內置蓋玻片的24孔板，每孔細胞數為9萬。
② 處理：接種24小時後用有糖earle』s 液洗兩遍, 給予相應處理（氧化應激或葯物）。
③ JC-1孵育：用有糖earle』s 液洗1遍，並換上終濃度為10µg/ml JC-1培養箱孵育20 min.
④ 檢測：用有糖earle』s 液洗2遍，蓋玻片可在熒光顯微鏡下檢測熒光變化，96孔板在多功能熒光酶標儀檢測熒光值，檢測JC-1單體時激發光設置為488nm，發射光設置為530nm；檢測JC-1聚合物時，激發光設置為529nm，發射光設置為590nm
（4）注意點
稀釋JC-1時要迅速，否則易聚集，不易溶解；建議用碧雲天的JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒。