igm血清檢測方法

㈠ 病毒鑒定常用方法有哪些

寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學交叉反應，目前主要採用病毒核酸檢測。
開展蚊媒寨卡病毒檢測時，對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測。
開展寨卡病毒實驗室檢測時，應同時考慮登革病毒和基孔肯亞病毒感染可能。登革病毒和基孔肯亞病毒實驗室檢測應按照相應的技術指南開展。
（一）臨床標本檢測。
1．病原學檢測
病原學檢測主要適用於急性期血液標本，一般認為發病7天內檢測陽性率高。
（1）核酸檢測：採用熒光定量RT-PCR方法，是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。
（2）病毒分離：將標本接種於蚊源細胞（C6/36）或哺乳動物細胞（BHK21、Vero）進行分離培養，出現病變以後，用檢測核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內接種進行病毒分離。
2．血清學檢測
（1）血清特異性IgM抗體：發病3天後可檢出病毒特異性IgM抗體，但發病7天後檢出率高。可採用ELISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應，易於產生假陽性。
（2）中和抗體：採用空斑減少中和試驗方法檢測。患者恢復期血清中和抗體陽轉或滴度較急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染，可以確診。
（二）媒介標本檢測。
1．標本處理
將分類後的伊蚊成蚊或幼蟲，按照採集地點，每10～20隻為一份進行研磨處理。
2．病毒核酸檢測
用RT-PCR的方法進行寨卡病毒核酸檢測
3．病毒分離
病毒核酸陽性的標本進行病毒分離。

㈡ 免疫球蛋白的檢測方法

異常血清免疫球蛋白檢測方法學探討（vip資料）
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保健食品檢驗方法－－ig檢驗
sfda網站和保健食品相關網站上都可以檢索到。

關於牛初乳及其製品中免疫球蛋白G的檢測方法

溶液配製：

1） 緩沖液A： 0.05mol.L-1磷酸二氫鈉溶液（pH6.5）；

2） 緩沖液B: 0.05mol.L-1甘氨酸溶液（pH2.5）；

3）IgG貯液：sigma公司IgG配成濃度約4mg.mL-1溶液，冷凍濃縮至200mL。

樣品制備和檢測：取一定量牛初乳粉，溶解於緩沖液A，製成濃度2mg/mL的溶液，用0.45mm微濾器過濾後進樣。按下表方案使用緩沖液B梯度洗脫。控制不同進樣體積（25~200mL）產生標准響應曲線（5mg到70mg）。IgG貯液用緩沖液A稀釋後，製成IgG標准曲線（4~40mg）。通過280nm處吸收值監測洗脫液蛋白濃度。

表1 蛋白質G親合HPLC的梯度洗脫條件

時間（min） 流速（ml/min） %A %B 梯度
0 1.0 100 0 -
0.5 1.0 100 0 -
1.0 2.0 100 0 線性
1.5 2.0 0 100 -
4.0 2.0 0 100 線性
5.0 1.0 100 0 -
7.0 1.0 100 0 -

具體操作可參閱國標GB/T 5009.194- 2003和曹勁松《初乳功能性食品》第10章。

3、 RID與HPLC的比較

一般地，HPLC檢測結果將高於RID檢測結果。

我們實驗室對比研究了牛初乳IgG抗原決定簇部位（或第二抗體結合部位）和蛋白質G結合部位的變性動力學，證實：在實驗溫度（69℃~81℃）范圍內，IgG分子上蛋白質G結合部位在熱處理過程中更為耐熱，或者說IgG抗原決定簇部位相對更為熱敏感。從而，揭示了上述現象的本質：RID測到的IgG在整體變性程度上低於HPLC測到的IgG。因此，國外一些將RID和ELISA方法測定的IgG含量視為「免疫活性IgG」是比較科學的。

在各溫度下IgG分子上蛋白質G結合部位變性反應各溫度下的D值均比IgG分子上第二抗體結合部位變性反應的相應溫度下的D值大，說明IgG分子上蛋白質G結合部位在熱處理過程中要比IgG抗原決定簇部位更為耐熱。該溫度范圍內IgG分子上抗原決定簇部位熱變性活化能（270.55kJ/moL）大大低於IgG分子上蛋白質G結合部位熱變性活化能（316.42kJ/moL）。在該溫度范圍內IgG分子上第二抗體結合部位變性反應的Z值為9.34℃，IgG分子上蛋白質G結合部位變性反應的Z值為7.25℃，可認為：IgG分子上第二抗體結合部位的穩定性在上述溫度范圍內相對恆定，而蛋白質G結合部位的穩定性相對容易隨溫度發生變化。在酸性乳清溶液中，也獲得類似的研究結論。
上述研究結果即將發表於《Journal of Agricultural and Food Chemistry》和《Journal of Food Science》。

4、其它

隨著未來技術的發展，並不排除其它可能的IgG檢測方法。例如ELISA法，國內已經建立，而且有國外公司可提供試劑盒。

㈢ 血清IgG，IgM，IgA檢測一般所用的試劑盒哪家公司的比較好其檢測方法一般採取什麼方法

血清IgG，IgM，IgA檢測一般採取生化法.北京華英生物技術研究所可以完成此類檢測.

㈣ 迄今為止，我國檢測新冠病毒有哪些方法

1、熒光PCR法。PCR法指的是聚合酶鏈式反應，能將微量的DNA大幅增加。熒光PCR檢測的原理為——隨著PCR的進行，反應產物不斷累積，熒光信號強度也等比例增加。最後通過熒光強度變化監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
2、聯合探針錨定聚合測序法。這種檢測主要是用專門的儀器檢測測序載片上DNA納米球攜帶的基因序列。這種檢測的靈敏度高，不容易漏診，但結果也容易受多種因素的影響而不準。
3、恆溫擴增晶元法。檢測原理是基於核酸之間的互補結合特性開發的一種檢測方式，能夠用於定性或定量測量存在於生物體內的核酸。
4、病毒抗體檢測。抗體檢測試劑是檢測血清中由病毒進入人體後刺激人體產生的IgM或IgG抗體，IgM抗體出現較早，IgG抗體出現較晚。
5、膠體金法。膠體金法是用膠體金試紙進行檢測，也就是常說的快速檢測試紙。這種試紙經過特殊標記，上面有孔，用於滴入受檢者的血清樣本。
6、磁微粒化學發光法。化學發光法是一種高度敏感的免疫檢測，凡具有抗原性的物質都可以用這種方法測定。

㈤ 酶聯免疫法的檢測方法

雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法，操作步驟如下：
一、將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結合的抗體及雜質。
二、加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
三、加酶標抗體：使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
四、加底物：夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
在臨床檢驗中，此法適用於檢驗各種蛋白質等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體，就可用於包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用於包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作一步法檢測。
在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成夾心復合物。類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象，此時反應後顯色的吸光值（位於抗原過剩帶上）與標准曲線（位於抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結果將低於實際的含量，這種現象被稱為鉤狀效應（hook effect），因為標准曲線到達高峰後呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應注意可測范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。
假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，顯然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。
雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗體和酶標抗體結合，表現出假陽性反應。採用F（ab'）或Fab片段作酶結合物的試劑，由於去除了Fc段，從而可消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響，已被列為這類試劑的一項考核指標（參見6.2）。
雙抗體夾心法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用於測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。
雙抗原夾心法測抗體
反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物，以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋，可直接用於測定，因此其敏感度相對高於間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常採用本法。本法關鍵在於酶標抗原的制備，應根據抗原結構的不同，尋找合適的標記方法。 在雙抗體夾心法測定抗原時，如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體，則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步並作一步。這種雙位點一步不但簡化了操作，縮短了反應時間，如應用高親和力的單克隆抗體，測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法測定中，應注意鉤狀效應（hookeffect），類同於沉澱反應中抗原過剩的後帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成夾心復合物，所得結果將低於實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。 間接法是檢測抗體最常用的方法，其原理為利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：
⑴將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結合的抗原及雜質。
⑵加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌後，固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體及血清中的雜質由於不能與固相抗原結合，在洗滌過程中被洗去。
⑶加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結合，從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌後，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標羊抗人IgG抗體。
⑷加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法主要用於對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。間接法的優點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
間接法成功的關鍵在於抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結果，但應盡可能予以純化，以提高試驗的特異性。特別應注意除去能與一般健康人血清發生反應的雜質，例如以E.Coli為工程酶的重組抗原，如其中含有E.Coli成份，很可能與受過E.Coli感染者血清中的抗E.Coli抗體發生反應。抗原中也不能含有與酶標抗人Ig反應的物質，例如來自人血漿或人體組織的抗原，如不將其中的Ig去除，試驗中也發生假陽性反應。另外如抗原中含有無關蛋白，也會因競爭吸附而影響包被效果。
間接法中另一種干擾因素為正常血清中所含的高濃度的非特異性抗體。病人血清中受檢的特異性IgG只佔總IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強，非特異IgG可直接吸附到固相載體上，有時也可吸附到包被抗原的表面。因此在間接法中，抗原包被後一般用無關蛋白質（例如牛血清蛋白）再包被一次，以封閉（blocking）固相上的空餘間隙。另外，在檢測過程中標本須先行稀釋（1:40~1:200），以避免過高的陰性本底影響結果的判斷。 競爭法可用於測定抗原，也可用於測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，因此結合於固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下：
⑴將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。
⑵待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應。如受檢標本中無抗原，則酶標抗原能順利地與固相抗體結合。如受檢標本中含有抗原，則與酶標抗原以同樣的機會與固相抗體結合，競爭性地佔去了酶標抗原與固相載體結合的機會，使酶標抗原與固相載體的結合量減少。參考管中只加酶標抗原，保溫後，酶標抗原與固相抗體的結合可達最充分的量。洗滌。
⑶加底物顯色：參考管中由於結合的酶標抗原最多，故顏色最深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差，代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡，表示標本中抗原含量越多。一般情況，是通過方波伏安法，檢測培養體系的峰電流，通過峰電流與抗原抗體的線性關系來最終確定體系的最終檢測目標的濃度。
當抗原材料中的干擾物質不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體。其原理為標本中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。標本中抗體量越多，結合在固相上的酶標抗體愈少，因此陽性反應呈色淺於陰性反應。如抗原為高純度的，可直接包被固相。如抗原中會有干擾物質，直接包被不易成功，可採用捕獲包被法，即先包被與固相抗原相應的抗體，然後加入抗原，形成固相抗原。洗滌除去抗原中的雜質，然後再加標本和酶標抗體進行競爭結合反應。競爭法測抗體有多種模式，可將標本和酶標抗體與固相抗原競爭結合，抗HBc ELISA一般採用此法。另一種模式為將標本與抗原一起加入到固相抗體中進行競爭結合，洗滌後再加入酶標抗體，與結合在固相上的抗原反應。抗HBe的檢測一般採用此法。 血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，後者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法，先將所有血清IgM（包括異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，在去除IgG後再測定特異性IgM。操作步驟如下：
⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。
⑵加入稀釋的血清標本：保溫反應後血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質成分。
⑶加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結合。洗滌。
⑷加入針對特異性的酶標抗體：使之與結合在固相上的抗原反應結合。洗滌。
⑸加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在，是為陽性反應。 親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每個分子由4個亞基組成，可以和4個生物素分子親密結合。維生素H，分子量244.31，存在於蛋黃中。用化學方法製成的衍生物，生物素－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大，兩者一經結合就極為穩定。由於1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯起來，就可大提高ELISA的敏感度。
親和素－生物素系統在ELISA中的應用有多種形式，可用於間接包被，亦可用於終反應放大。可以在固相上先預包被親和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結合，通過親和素－生物素反應而使生物素化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結合點充分暴露。另外，在常規ELISA中的酶標抗體也可用生物素化的抗體替代，然後連接親和素－酶結合物，以放大反應信號。 在臨床檢驗中一般採用商品試劑盒進行測定。ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
⑴已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；⑵酶標記的抗原或抗體（結合物）；
⑶酶的底物；
⑷陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標准品和控制血清（定量測定中）；
⑸酶聯物（結合物）及標本的稀釋液；
⑹洗滌液；
⑺酶反應終止液。

㈥ IgM和IgG的區別

IgM和IgG的區別是：作用不同、功能不同以及生理變化不同。

一、作用不同

1、IgM是免疫球蛋白M，根據結構的不同將免疫球蛋白分為五種，IgM是人的免疫球蛋白之一。

2、IgG是免疫球蛋白G是血清主要的抗體成分，約占血清Ig的75%。其中40～50%分布於血清中，其餘分布在組織中。

二、功能不同

1、IgG的功能作用主要在機體免疫中起保護作用，大多數抗菌、抗病毒；應對麻疹、甲型肝炎等，能有效地預防相應的感染性疾病。

2、IgM以膜結合型（mIgM)表達於細胞表面，構成B細胞抗原受體（BCR)。分泌型IgM為五聚體，是分子量最大的Ig，沉降系數為19S，稱為巨球蛋白，一般不能通過血管壁，主要存在於血液中。

三、生理變化不同

1、胎兒出生前可從母體獲得IgG，在孕前期22~28周間，胎兒血IgG濃度與母體血IgG濃度相等，出生後母體IgG逐漸減少，到第3、4月胎兒血IgG降至最低，隨後胎兒逐漸開始合成IgG，血清IgG逐漸增加，到16歲前達到成人水平。

2、IgM也是初次體液免疫應答中最早出現的抗體，是機體抗感染的「先頭部隊」；血清中檢出IgM提示新近發生感染，可用於感染的早期診斷。膜表面IgM是B細胞抗原受體的主要成分。只表達mIgM是未成熟B細胞的標志。

IgG的臨床意義：

1、血清IgG增高：見於系統性紅斑狼瘡、萎縮性門靜脈性肝硬變、慢性活動性肝炎、類風濕性關節炎、亞急性細菌性心內膜炎、IgG型骨髓瘤、某些感染性疾病、IgG型單克隆丙種球蛋白病等。

2、血清IgG減少：見於抗體缺乏症、免疫缺陷綜合征、非IgG型多發性骨髓瘤、重鏈病、輕鏈病、腎病綜合征、某些白血病、燒傷、變應性濕疹、天皰瘡、肌緊張性營養不良等。

以上內容參考 網路-免疫球蛋白M、網路-免疫球蛋白G

㈦ igm =中文是什麼意思

朋友您好！
1、做IgM檢查主要是抽血檢查，做IgM檢查主要是看有無近期感染。如果IgM陰性，IgG陽性。則提示曾經感染過，現在沒有感染。
2、免疫球蛋白是一組具有抗體活性的蛋白質，存在於丙種球蛋白中，即免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白D和免疫球蛋白E，臨床上主要測定前三種。正常情況下，這些抗體對人的組織不發生作用，只有在病理情況下，人的正常組織發生改變，形成了抗原性，則機體就產生了相應的抗體與之結合。
很多疾病，尤其是免疫性疾病，常常發生免疫球蛋白含量的變化，如免疫缺陷性疾病(如艾滋病)可見其在血清中含量降低，自身免疫性疾病(如紅斑狼瘡、類風濕關節炎等)的免疫球蛋白升高，在某些感染性疾病中，也可出現免疫球蛋白含量增高，所以免疫球蛋白的測定是一個非特異的檢查，僅能說明機體的體液免疫功能情況如何，而不能說明是什麼病。
一般紅斑狼瘡的抗核抗體都在免疫球蛋白G中，所以病人的免疫球蛋白G含量可增高，而其他免疫球蛋白亦可有變化。

㈧ 諾如感染可以查血清特異性IGM抗體嗎

目前常用的檢測方法有病毒核酸檢測和新冠肺炎特異性抗體血清檢測。核酸檢測是檢測病毒基因中某些特定核酸序列，是針對病毒的直接檢測。抗體檢測是間接檢測，是檢測人體對新冠病毒的免疫反應，當病毒侵入人體後，人體免疫系統會產生大量的免疫球蛋白，最常見的是IgM和IgG。

Q

檢測發現新冠病毒血清特異性IgM陽性能否作為確診依據？

A

不能！新冠病毒特異性抗體的血清學檢測標本易獲取，操作簡單快捷，易於基層開展，可以作為初篩手段，但確診新冠肺炎還需要結合核酸檢測或者動態觀察IgM和IgG滴度來判斷。從抗體角度來講，確診依據必須是：特異性IgM、IgG抗體雙陽性或IgG抗體由陰性轉為陽性或IgG抗體滴度恢復期較急性期4倍及以上升高。

㈨ HAV-IgM是什麼檢查項目

檢測病人血清中HAV—IgM抗體這是目前診斷甲型肝炎最可靠最靈敏的方法,患者於發病後1～4周血清中即可檢出HAV—IgM抗體,該特異性抗體主要有兩種,即IgM和IgG型的抗—HAV,HAV—IgM抗體在急性甲肝感染時出現較早上升較快,高峰滴度較高、持續時間較短。

故凡HAV—IgM抗體陽性特別是滴度較高(>10~(-3))時常提示為急性HAV感染或復發。我們在檢測甲型肝炎病毒IgM抗體時發現大多數甲型肝炎患者血清中存在類風濕因子(RF)常干擾HAV—IgM抗體的檢測,導致假陽性結果。

為此通過對甲型肝炎患者RF檢測試圖了解RF與肝功能以及RF對抗—HAVIgM檢測等的影響。

以上參考來源:網路-甲型肝炎病毒抗體IgM