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瘦肉精檢測儀器和方法

發布時間:2022-09-04 15:15:31

㈠ 怎樣辨認含瘦肉精的肉類

瘦肉精檢測方法
目前,檢測瘦肉精的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜法(GC-MS)、毛細管區帶電泳法(CE)和免疫分析技術(IA)。而我國結合自己的實際情況,2001年農業部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測定標淮。該標准選擇確定了兩種:即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜法(GC-MS)。其中將HPLC法作為檢測瘦肉精的半確證性方法,其最低檢測限為0.05μg/
kg,優點是檢測精確度高,而且假陽性率低;缺點是檢測過程煩瑣、檢測時間長,需貴重儀器、難於操作、價格昂貴。而GC-MS法優點是能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。GC-MS法與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低,已將GC-MS法定為檢測瘦肉精的確證性方法。GC-MS法的缺點同HPLC相似。
目前,英國的Randox
Laboratories
litd和德國的R-biopharm公司均開發出了檢測肉品、飼料中瘦肉精的ELISA試劑盒。

㈡ 現在瘦肉精的檢測方法有哪些

(1)膠體金快速檢測法將待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上後,待檢物與金標試劑的結合物又與試紙條發生特異性結合而被截留,聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結果,從而實現特異性免疫診斷。測試卡分析快速,僅需3~5分鍾,無需專業人員操作,無需藉助儀器,可以憑肉眼觀察到結果,定性檢測,測試卡可常溫保存。

(2)酶聯免疫吸附法(ELISA)酶聯免疫吸附法是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其原理是利用抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用,通過化學方法將辣根過氧化物酶(HRP)與克侖特羅(CL)結合,形成酶偶聯克侖特羅。將固相載體上已包被的抗體與特異性的抗克侖特羅抗體結合,然後加入待測克侖特羅和酶偶聯克侖特羅,它們競爭性與克侖特羅抗體結合,洗滌後加底物,根據有色物的變化計量待測克侖特羅含量。若待測克侖特羅多,則被結合的酶偶聯克侖特羅少,有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的克侖特羅含量,比色法的最佳波長為450納米。

㈢ 雙匯「瘦肉精」是怎麼回事

雙匯宣稱「十八道檢驗、十八個放心」,但豬肉不檢測「瘦肉精」。河南孟州等地添加「瘦肉精」養殖的有毒生豬,順利賣到雙匯集團旗下公司。那麼瘦肉精是什麼?有什麼危害呢?
一、「瘦肉精」的化學本質
瘦肉精的化學名為鹽酸克倫特羅。它是一種人工合成的β-腎上腺素能興奮劑,具有擴張支氣管的作用,常用來防治哮喘、肺氣腫等肺部疾病。當其應用劑量達到治療量的5~10倍時,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉積減少,因此俗稱為「瘦肉精」。在畜牧業生產中一些非法生產者將其作為一種生長促進劑添加到動物飼料中,用以改善胴體的品質,同時也造成食品中瘦肉精的殘留。所以,瘦肉精既不是獸葯,也不是飼料添加劑,而是嚴重危害畜牧業生產和人體健康的毒品。該品為白色或類白色的結晶性粉末,無臭、味苦、易溶於水。
二、生豬食用「瘦肉精」後的表現
1、豬毛色光亮,皮膚紅潤,喜睡不願動,吊肚,臀部肌肉豐滿緊綳,脂肪薄,有經驗的肉販用手抓捏臀部肌肉的厚度,即可判別該豬是否食用瘦肉精。有的
豬背部肌肉豐滿凹下成槽,驅趕時起身困難,氣喘,個別跛行。
2、高溫季節驅趕豬易發生應激反應,表現為豬行走困難,站立不穩,四肢發抖,全身肌肉震顫,並伴有呼吸困難,喘氣急促,很快就會死亡。
3、一般在臨上市前20天在飼料或飲水中臨時添加餵食,在庫存飼料中檢測難以發現,如餵食超過20天,豬會出現站立不穩,肌肉震顫等跡象。
4、宰後胴體肌肉顏色深紅,肌肉飽滿、結實、不易滲出液體,皮薄,脂肪較少。而未食用「瘦肉精」的豬肉相對色淡,脂肪較厚、肌肉切面容易滲出液體,由於肉販誤導,消費者不會區分的話,就很容易買到不健康的豬肉,一些不法肉販為了自己的利益,要求農戶餵食,否則壓級壓價,甚至不予收購,導致該毒品在生豬養殖環節中蔓延。
三、瘦肉精殘留對人體的危害
瘦肉精的化學結構穩定,在體內不會破壞分解,以原形排出體外。研究顯示瘦肉精完全能耐受100℃高溫,要經126℃油煎5分鍾才會破壞減半。因此常規烹調對肉食品殘留的瘦肉精起不到破壞作用。如果生豬在屠宰前沒有足夠休停時間(一般停葯28天以上),
則在肌肉和內臟器官有較高濃度的葯物殘留。人食用後重者出現心慌、肌肉震顫、頭疼、神經過敏等症狀;輕者感覺不明顯,但長期食用可致「慢性中毒」,引致染色體畸變,誘發惡性腫瘤。
四、瘦肉精的檢測
「瘦肉精」在組織中殘留的檢測方法有高效液相色譜法、氣質聯用測譜法、酶聯免疫吸附測定法等。現常用酶聯免疫吸附測定法進行檢測,所需儀器設備:酶標讀數儀、離心機、震盪器、微量移液器。所需試劑和材料均由試劑盒廠商提供。檢測結果小於1.0ng/ml時可判為未檢出,大於時判為檢出。此結果應根據需要與否而決定是否進行定量確證。
肉的質量直接關繫到咱老百姓的健康,是不可忽視的大事。與前些年社會普遍關注的「注水肉」問題相比,含瘦肉精的豬肉對人體的傷害更直接,又因其在肉的外觀上不易辨別,故這種形式的傷害也更具隱蔽性,也更厲害。

㈣ 瘦肉精檢測問題

目前,檢測瘦肉精的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜一質譜法(GC-MS)、毛細管區帶電泳法(CE)和免疫分析技術(IA)。而我國結合自己的實際情況,2001年農業部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測定標淮。該標准選擇確定了兩種:即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜一質譜法(GC-MS)。其中將HPLC法作為檢測瘦肉精的半確證性方法,其最低檢測限為 0.05μg/kg,優點是檢測精確度高,而且假陽性率低;缺點是檢測過程煩瑣、檢測時間長,需貴重儀器、難於操作、價格昂貴。而GC一MS法優點是能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。GC-MS法與HPLC法相比,檢測靈敏度更高,假陽性率更低,已將GC-MS法定為檢測瘦肉精的確證性方法。GC-MS法的缺點同HPLC相似。 (1)試劑和材料 以下所有試劑,除特別註明外,均為分析純試劑;水為符合GB/T6682規定的二級水。 ①鹽酸克倫特羅對照品:含鹽酸克倫特羅不得少於98.5% ②鹽酸 ③無水甲醇 ④氫氧化鈉 ⑤磷酸二氫鉀 ⑥磷酸 ⑦鹽酸溶液 取鹽酸4.2ml,加水至1000ml,即得。 ⑧o.5mol/L磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀68g,加水800ml溶解並用磷酸調pH值至3.O,用水稀釋至1000ml,即得。 ⑨0.05mol幾磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀6.88,加水800ml溶解並用磷酸調pH值至3.0,用水稀釋至1000mi,即得。 a.氫氧化鈉溶液 取氫氧化鈉48,加水使溶解成100mi,即得。 b.鹽酸克倫特羅對照品儲備液(1mg/mi) 准確稱取28.3mg鹽酸克倫特羅對照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解並稀釋至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。 ⑩鹽酸克倫特羅對照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi儲備液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1個月。 ⑾鹽酸克倫特羅對照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1個月。 ⑿鹽酸克倫特羅檢測試劑盒(2~8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17% (2)儀器和設備 ①酶聯免疫反應讀數儀 ②分析天平 精度0.00001g ③天平 精度0.01g ④冷凍離心機 ⑤50mi具塞離心管 ⑥勻漿機 ⑦微型振盪器 ⑧迴旋振盪器 ⑨微量移液器 單道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL, ⑩乾熱濃縮器 ①空氣壓縮機 (3)測定步驟 ①試料的制備(尿) 取供試尿lml,於3000r/min離心l0min,上清液作為供試試料,直接供酶聯免疫測定法測定。 取空白尿lml,於3000r/min離心l0min,上清液作為空白試料,直接供酶聯免疫測定法測定。 取空白尿2ml,於3000r/min離心l0min,上清液1.0ml添加l00ug/L的克倫特羅對照溶液20/H。作為2ug/l空白添加試料,直接供酶聯免疫測定法測定。 ②試料的制備(肝) 取約l00g新鮮或冷凍後融化的空白或供試豬肝,用勻漿機以10000r/rain勻漿1-2min,使均勻呈糊狀,一20~C以下冰箱中貯存備用。 取均漿後的供試肝樣,作為供試試料。 取均漿後的空白肝樣,作為空白試料。 取均漿後的空白肝樣(1土0.05)e添加l00ng/m1的克倫特羅對照溶液20tzL作為2ng/g空白添加試料。 a:提取(肝) 取(1士o.05)z試料,置50ml離心管中;加鹽酸溶液5.0mi,旋渦混勻,中速振盪1.5h;在10-15~C下以4000r/mill以上速度離心15min;上清液移人另一50ml離心管中,加入氫氧化鈉溶液300gL,混勻,振盪15min;加0.5mol/l磷酸二氫鉀溶液4。0ml,混勻,2-8~C放置過夜;取上述溶液於10~15~C以4000r/111113以上的速度離心15min,上清液備用。 b.凈化(肝) C,,固相萃取柱依次用無水甲醇3mi、0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液2mi預洗,不使柱床乾涸;將備用上清液全部過柱;用0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液2ml淋洗,擠干,棄去所有淋洗液;用無水甲醇2mi洗脫,流速控制在0.5ml/mm以下,擠干,收集洗脫液;於50~60~C下用氮氣或空氣緩緩吹乾洗脫液;殘余物用水1.0ml溶解,以4000r/mill以上的速度離心15rain,清液作為試樣溶液供酶聯免疫測定法測定。 ③測定 a.室溫應控制在19~30~C。 b.取在19-30~C放置1-2h的試劑盒,按每個標准溶液和試樣溶液至少兩孔計算所需酶聯板條的數量,插入框架。每個微孔加入用緩沖溶液100倍稀釋的抗體100~tL,封口膜封板,室溫孵育30min。 c倒出孔內液體,將酶聯板倒置在吸水紙上拍打,使孔內沒有殘余液體。用多道移液器加水250pL到酶聯板的微?L內,稍後倒出孔內液體,再將酶聯板倒置在吸水紙上拍打,如此重復操作洗板3次。 d.分別吸取標准溶液、空白試料、空白添加試料和供試試料各20uL,分別放入不同微孔底中央,並在每孔內加入用緩沖溶液100倍稀釋的酶結合物100~I。,在微型振盪器上混勻,用封口膜封好,室溫孵育30min。 e.倒出孔內液體,將酶聯板倒置在吸水紙上拍打,使孔內沒有殘余液體,重復洗板3次。 f.用多道移液器加入用底物緩沖溶液10倍稀釋的底物100uL,室溫避光孵育15min。 g.用多道移液器每孔加終止液100uL。 h.在1h內將酶聯板放於酶標儀內,於450nm波長處測定吸光度值。 (4)計算 用數據分析軟體對結果進行分析,繪出標准曲線,並得出試料中克倫特羅的含量。 (5)靈敏度和回收率 本方法的平均檢測下限為0.1mg/Kg。 本方法在1ug/kg添加濃度水平上豬尿回收率范圍為60%一120%,豬肝回收率范圍為40%~120%。參考資料/ http://www.zgny17.com

㈤ 瘦肉的檢驗方法是什麼如題

吃瘦肉每天別超過2兩 吃瘦肉多了對人體健康也產生危害,若把瘦豬肉作為日常膳食結構中主要的食物來源,會增加發生高血脂、動脈粥樣硬化等心血管疾病的危險. 中國疾病預防控制中心營養與食品安全所對各種動物肉的脂肪進行了測定, 在《2002年中國食物成分表》標明,以100克重量為例,各種肉類的脂肪含量如下:兔肉為2.2克,馬肉為4.6克,牛肉為4.2克,而瘦豬肉為7.9克,若把瘦豬肉作為日常膳食結構中主要的食物來源過量食用,也會增加發生高血脂、動脈粥樣硬化等心血管疾病的危險. 最近,英國皇家研究院布比斯醫生經過分析研究表明:多吃瘦肉對人體健康的危害更甚於肥肉,因為瘦肉在烹制過程中,會自動產生一種致癌物質———雜環胺.動物實驗表明:雜環胺是一種損害基因的物質,會使體內的脫氧核糖核酸(DNA)發生誘變.瘦肉中的雜環胺能被大腸直接吸收進入血液中,西方國家腸癌發病率高於其他國家腸癌發病率,這與他們常食瘦肉,尤其喜食大量紅色牛排有關. 此外,瘦肉中蛋氨酸含量較高.蛋氨酸是合成人體一些激素和維護表皮健康必需攝取的一種氨基酸,但在一些酶類催化激活下,在熱理化處理過程中的蛋氨酸,會產生一種叫同型半胱氨酸的有機物.現代醫學認為:同型半胱氨酸會直接損害動脈血管壁的內皮細胞,促使血液中的膽固醇和甘油三酯等脂質沉積並滲入動脈血管壁內,形成動脈粥樣斑塊,進而引發動脈粥樣硬化.食瘦肉過多,蛋氨酸就會增多,同型半胱氨酸含量也相應地增加,加速動脈粥樣硬化的發生. 可見,不能因為瘦肉飽和脂肪酸少就不限制它的食用.一般來講,成人每天食肉量應為1~2兩,根據個人的體重和肥胖程度可適當增減,若需要補充蛋白質,可適當增加牛奶和豆製品的攝入. 西方營養學家研究認為,中國、日本等亞洲國家乳腺癌、直腸癌發病率低於西方國家,這與亞洲國家常食大豆及其豆製品有關.大豆中含有一種抗癌活性物質———異黃酮,其中2/3為三羥異黃酮類,對強致癌物———苯並(a)芘和甲基苯蒽等,均有明顯抗誘變作用,對乳腺癌和大腸癌有較強的抑製作用.因此,提倡人們少吃些瘦肉,多吃些大豆及其製品,以維護身體的健康. 別買皮薄顏色太鮮紅純瘦肉 10月10日,湘潭市畜牧、公安部門聯合宣布:對湘潭影響最大的一起瘦肉精案件,在公安和畜牧部門的共同努力下告破.此案偵查過程歷時一年多,兩部門聯合追繳了7公斤瘦肉精.據報,此前已有100多公斤已流入我省的湘潭、株洲、婁底等地. 「瘦肉精」學名克倫特羅,該葯物既不是獸葯,也不是飼料添加劑,而是腎上腺類神經興奮劑.豬食用後在代謝過程中促進蛋白質合成,加速脂肪的轉化和分解,提高了豬肉的瘦肉率,因此稱為「瘦肉精」.但使用劑量須在人用葯劑量的10倍以上,才能達到提高瘦肉率的效果.由於用量大、使用時間長、代謝慢,所以直至屠宰上市,「瘦肉精」在豬體內的殘留量都很大,通過食物進入人體,會導致使人體慢性中毒,給消費者健康造成極大隱患. 長沙市畜牧局獸醫葯政處謝羅馬處長建議,消費者購買豬肉時要揀帶些肥膘(1-2cm)的肉,皮不要太薄,顏色不要太鮮紅. 主要成分是蛋白質.檢驗方法是剴氏定氮法. 蛋白質的測定方法 pro的測定方法分為兩大類:一類是利用pro的共性,即含氮量,肽鏈和折射率測定pro含量,另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸、鹼性基團和芳香基團測定pro含量.但是食品種類很多,食品中pro含量又不同,特別是其他成分,如碳水化合物,脂肪和維生素的干擾成分很多,因此pro的測定通常利用經典的剴氏定氮法是由樣品消化成銨鹽蒸餾,用標准酸液吸收,用標准酸或鹼液滴定,由樣品中含氮量計算出pro的含量.由於食品中pro含量不同又分為凱氏定氮常量法、半微量法和微量法,但它們的基本原理都是一樣的. 一 凱氏定氮法 這種方法是1883年Kjeldahl發明,當時凱氏只使用H2SO4來分解試樣,來定量穀物中的pro,他只知用H2SO4分解試樣,而不能闡明H2SO4分解有機氮化合物生成氨的反應歷程,所以只使用H2SO4分解試樣,需要較長時間,後來由Gunning加入改進,他改進的辦法是在消化時加入K2SO4使沸點上升,這樣加快分解速度,因為溫度由原來硫酸沸點的380上升到400℃,提高了不到67℃所以速度也就加快了,凱氏定氮法至今仍在使用. 我們在檢驗食品中pro時,往往只限於測定總氮量,然後乘以pro核算等數,得到蛋白質含量,實際上包括核酸、生物鹼、含氮類脂、葉啉和含氮色素等非蛋白質氮化合物,故稱為粗pro. 1 凱氏常量定氮法: 不論常量、半微量以及微量定氮法它們的原理都是一樣的,首先第一個步驟是消化: (1)消化:樣品與硫酸一起加熱消化,硫酸使有機物脫水.並破壞有機物,使有機物中的C、H氧化為CO2和H2O蒸汽逸出,而pro則分解氮,則與硫酸結合成硫酸銨,留在酸性溶液中. (2)在消化過程中添加硫酸鉀可以提高溫度加快有機物分解,它與硫酸反應生成硫酸氫鉀,可提高反應溫度,一般純硫酸加熱沸點330℃,而添加硫酸鉀後,溫度可達400℃,加速了整個反應過程.此外,也可以加入硫酸鈉,氫化鉀鹽類來提高沸點.其理由隨著消化過程硫酸的不斷地被分解,水分的逸出而使硫酸鉀的濃度增大,沸點增加.加速了有機的分解.但硫酸鉀加入量不能太大,否則溫度太高,生成的硫酸氫銨也會分解,放出氨而造成損失. 為了加速反應過程,還加入硫酸銅,氧化汞或硒粉作為催化劑以及加入少量過氧化氫,次氯酸鉀作為氧化劑.但為了防止污染通常使用硫酸銅. 所以有機物全部消化後,出現硫酸銅的蘭綠色,它具有催化功能,還可以作為鹼性反應指示劑. (1)蒸餾:樣液中的硫酸銨在鹼性條件下釋放出氨,在這操作中,一是加入氫氧化鈉溶液要過量,二是要防止樣液中氨氣逸出. (2)吸收與滴定: 蒸餾過程中放出的氨可用一定量的標准硫酸或標准鹽酸溶液進行氨的吸收,然後再用標准氫氧化鈉溶液反滴定過剩的硫酸或鹽酸溶液,從而計算出總氮量. 半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收後,再用標准鹽酸直接滴定,硼酸呈微弱酸性,用酸滴定不影響指示劑變色反應,它有吸收氨的作用. 1.操作步驟: 准確稱取樣品中0.50-2.00g→於500ml凱氏瓶中→加10g無水K2SO4→加0.5gCuSO4→加20ml H2SO4→在通風櫥中先以小火加熱,待泡沫消失後,加大火力,消化至透明無黑粒後,將瓶子搖動一下使瓶壁炭粒溶於硫酸中→繼續消化30分鍾→至到樣液呈綠色狀態,停止消化,冷卻→加200ml水→連接蒸餾裝置→用硼酸作吸收液→在K氏瓶中加波動珠數粒和80ml50% NaOH→立即接好定氮球→加熱→至到K氏瓶內殘液減少到三分之一時,取出用水沖洗→用0.1N HCl滴定. N(V2-V1)0.014 W 計算: 總氮量%= (N(V2-V1)×0.014)/W × 100 0.014----氮的毫克當量數 pro%=總氮%×K 乳製品K=6.38(N=15.7%) 小麥粉K=5.79(N=17.6%) 動物膠K=5.6(N=18.0%) 冰蛋K=6.7(N=14.8%) 大豆製品K=6.0(16.7%) K=6.25則(N=16%) K-換稱等數 各種試劑的作用: 濃H2SO4: A :脫水使有機物炭化,然後有機物炭化生成碳,碳將H2SO4還原為SO2,本身則變為CO2 B: 氧化 C: pro與濃H2SO4生成NH3↑,CO2,SO2,H2O↑ D: NH3與H2SO4生成硫酸銨 (1)CuSO4的作用(催化劑) CuSO4為紅色沉澱,當C完全消化後,反應停止,紅色消失,變為蘭色,即為消化達到完全,蘭色為CuSO4的顏色 (2)K2SO4的作用(提高沸點) 沸點由330℃提高到400℃加速了反應過程. (3)硒粉和過氧化氫,氧化汞都為催化劑,但為了防止污染通常採用硫酸銅 (4)50%NaOH的作用 下面我就針對幾點來說明為何影響氨化完全和速度快的因素: (1)K氏燒瓶和取樣量 如果稱1g以上的樣品,就需要K氏燒瓶最小500ml,800~1000ml的更好,這樣的K氏燒瓶對於縮短氨化時間,加熱的均勻性和完全氨化效果最好. (2)分解劑 A H2SO4和K2SO4的添加量 有機無分解需要H2SO4量,H2SO4應根據有機物種類不同而加的量就不同,如果試樣含脂類高,則加H2SO4多,為了提高分解溫度,要大量添加K2SO4,但不能太多,也不能太少,太少則氨化不充分.K2SO4和H2SO4的添加比例是: 1g樣品 K2SO4: H2SO4=7g:12ml 這種比例在國內外都使用,是公認的 還有一種比例: K2SO4:H2SO4=10:20ml B 催化劑 用作催化劑的有Hg、HgO、Se,硒化合物,CuSO4、TiO2,對Hg,HgO有毒但結果好,Se與CuSO4得到結果是一種,TiO2,的結果偏低,採用不同的催化劑則消化時間不同, HgO消化麥子為38,Se與CuSO4消化麥子55,TiO2消化麥子70,所以在給出測定結果時要註明催化劑的類型. (3)熱源的強度 消化時熱源的強度同迅速消化和完全氨化關系很大,即便鹽類K2SO4加得多,如果熱源弱,也是沒有意義的,熱源過強導致H2SO4損失,使氨回收率低,另外K氏瓶的容量大小,頸部的粗細和長短等,也與熱源的強度有關. (4)氨的蒸餾和吸收及滴定 蒸餾有兩種: 1 直接蒸餾(裝置簡便,准確性好) 2 水蒸汽蒸餾 蒸餾加NaOH是50%,加的量為H2SO4量的4倍,硫酸量為12ml,則NaOH為12×4=48ml,而且一般高於這個理論值,即加到50~55ml,如果NaOH量加的不夠就變成H2S, H2S是強酸,使顏色變紅. 吸收液有: 1標准H2SO4 用標准鹼返滴定,甲醛紅指示劑 2 硼酸 用HCl進行滴定,混合指示劑 目前都用硼酸吸收液,用硼酸代替H2SO4,這樣可省略了反滴定,H2SO4是強酸,要求較嚴,而硼酸是弱酸,在滴定時,不影響指示劑變色范圍,另外硼酸為吸收液濃度在3%以上可將氨完全吸收,為保險期間一般用4%. 〈6〉實驗注意事項 a.樣品應時均勻的,若是固體樣品應事先研細,液體樣要混合均勻. b.樣品放入K氏燒瓶時,不要黏附瓶頸上,萬一黏附可用少量水緩慢沖下,以免被檢樣消化不完全,使結果偏低. c.消化時,如不容易呈透明溶液,可將K氏燒瓶放冷後,加入30%過氧化氫催化劑2~3ml,促使氧化. d.在整個消化過程中,不要用強火,保持和緩的沸騰,使火力集中在K氏燒瓶底部,以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下,使氮有損失. e.如硫酸缺少,過多的硫酸鉀會引起氨的損失,這時會形成硫酸氫鉀,而不與氨作用,因此當硫酸過多底物被消耗掉或樣品中脂肪含量過高時,要添加硫酸量. f.混合指示劑在鹼性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色,如果沒有溴甲酚綠,可單獨使用0.1%甲醛紅乙醇溶液. g.氨是否完全蒸餾出來,PH試紙檢查餾出液是否為鹼性. h.向蒸餾瓶中加入濃鹼時,往往出現褐色沉澱無.這時由於分解促進劑與加入的硫酸銅反應,生成氫氧化銅,經加熱後又分解生成氧化銅的沉澱,有時Cu離子與氨作用生成深蘭色的絡合物. i.消化劑綠色後繼續消化30分鍾即可. 2 K氏微量定氮儀法 3 K氏半微量定氮儀法 (2 、 3原理一樣) 操作方法大同小異,半微量法消化後,定容100ml,然後吸25ml蒸餾吸收液吸收. N(V2-V1)0.014 W*10/100 計算總氮%=(N(V2-V1)×0.014)/(W×10/100)×100 對於微量定氮儀法,儀器有了改進,樣液稱樣少,蒸餾消化液也少,其它基本一樣. 4 K氏自動定氮法 原理與上面一樣,儀器,採用K氏自動定氮儀:其裝置內具有自動加鹼蒸餾裝置,自動吸收和滴定裝置以及自動數字顯示裝置,消化裝置:由優質玻璃製成的K氏消化瓶以及紅外線裝置的消化爐. 二 水揚酸比色法: 1 原理: 樣品中的pro經H2SO4消化轉化為銨鹽溶液後,在一定的酸度和溫度下與水揚酸鈉和次氯酸鈉作用生成有顏色的化合物,可以在波長660nm處比色測定,求出樣品含氮量,計算蛋白質含量. 2 方法 (1)標准曲線的繪制 取6個25ml容量瓶編號 0 1 2 3 4 5 6 分別加空白酸液 2ml 分別加磷酸鹽緩沖液 5ml 稀釋至總體體積至15ml 分別加水揚酸鈉 5ml 37C水浴 15分鍾 加入次氯酸鈉 2.5ml 37C水浴 15分鍾 取出試液於660nm下進行比色,繪標准曲線. (2)樣品處理: 准確稱樣0.20~1.00g→於K氏瓶中→加15mlH2SO4和5g催化劑→電爐上加熱到沸騰後→加大 火力消化→直到出現暗綠色時→搖動瓶子→K氏瓶全部消化後→冷卻→加水至250ml容量 瓶. (3)樣品測定: 准確吸取上述消化溶液10ml→於100ml容量瓶中→定容→准確吸2ml→於25ml容量瓶中→加 5ml磷酸緩沖液→以下操作與標准曲線繪制的步驟相同 並以試劑空白微對照,測得樣液的光密度,從標准曲線查出其含氮量. (4)計算 C×F 含氮%= ---------------------------× 100 W×1000×1000 C---從標准曲線中查出測定樣液的含氮量(Ug) F---樣品溶液的稀釋倍數 W---樣品重量(g) pro%=總氮%×K(K可為6.25,也可查) 3注意事項: A 當天消化液最好當天測定,結果重現性好,如果樣液改至第二天比色就有變化. B 當在PH和試劑適當范圍內加入氯源後,顏色的顯色和溫度有關,應嚴格控制反應溫度. C 這種方法測定結果基本與K氏法一致. 4 試劑 (1)氯標液:稱經110℃乾燥2h的硫酸銨0.4719g→於燒瓶中定容10ml→此液1ml相當於 1.0mg氮標液→使用時配製成1ml相當於2.50Ug氮標液. (2)空白酸液:稱0.50g蔗糖→加15mlH2SO4和5g催化劑→與樣品一樣消化→定容250ml→ 使用時吸收此液10ml→加水至100ml為工作液備用. (3)磷酸鹽緩沖液:稱7.1g磷酸氫二鈉→加38g磷酸三鈉→加20g三九石酸鉀鈉→加400ml水 溶解→過濾→另稱35gNaOH溶於100ml水中→冷至室溫→緩緩地攪拌加入磷酸鹽溶液中→加 入水稀釋至1000ml備用. (4)水揚酸鈉溶液:稱25g水楊酸鈉和0.15g亞硝基鐵氰化鈉溶於200ml水中過濾,加水稀釋 至500ml (5)次氯酸鈉溶液:吸4ml安替富民液,用水稀釋至100ml 5 儀器 (1)分光光度計 (2)恆溫水浴 三 紫外分光光度法 1 原理: pro及其降解產物的芳香環基 ,在紫外區內對某一波長具有一定的光選擇吸收,在280nm下,光吸收與pro濃度(3~8mg/ml)成直線關系,因此,通過測定pro溶液的吸光度,並參照事先用K氏定氮法分析的標准樣品,從標准曲線查出蛋白質的含量. 2 試劑: (1) 0.1mol/l檸檬酸水溶液. (2)8mol/l脲[(NH2)2CO]的2NNaOH溶液. 脲的2N氫氧化鈉液 (3) 95%乙醇 (4) 無水乙醚 3 儀器 (1) 751型的紫外分光光度計 (2) 離心機 4 操作方法 (1)標准曲線的繪制:准確稱取樣品.2.00g,置於50ml燒瓶中,加入0.1mol/l檸檬酸水溶液30ml,攪拌30分鍾使其充分溶解,用四層紗布過濾於玻璃離心管中,以每秒鍾3000~5000轉的速度離心10分鍾,分別吸出上清夜0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml於6個10ml容量瓶鍾,每個容量瓶,8mol/l脲的氫氧化鈉溶液充分搖2分鍾(如果離心再次離心),取透明液於比色皿中,在280nm下測定其吸光度.(做參比值) 以事先用K氏定氮法測定的樣品中蛋白質的含量微橫坐標上面的吸光度為縱坐標,繪制標准曲線. (2)樣品測定 准確稱取試樣1.00g→於50ml燒杯中→加0.1mol/l檸檬酸溶液30ml→攪拌10分鍾→四層紗布過濾到離心管中→用8mol/L脲的NaOH溶液定容,搖勻後於280nm下測吸光度,從標准曲線上查出pro的含量. 計算: 蛋白質= C/W× 100 C----從標准曲線上查得的pro含量(mg) W----測定樣品溶液相當於樣品量(mg) 說明: a.此法運用於糕點,牛乳和可溶性pro樣品,測定糕點時,應把表皮顏色去掉. b.溫度對pro水解有影響,操作溫度應控制在20~30℃. 四 雙縮脲法-皮尼克法 1 原理: 雙縮脲在鹼性條件中,能與CuSO4結合成紅紫色的絡合物.pro分子中含有肽鏈與雙縮脲結構相似,也呈此反應.本法直接用於測定像小麥粉等固體試樣的pro含量.但作為銅的穩定劑,酒石酸鉀鈉比甘油好些.小麥粉中的pro能直接地一邊抽出一邊進行定量. 2 試劑 ⑴甘油作為穩定劑:取10ml10N KOH溶液,3.0ml甘油加到937ml水中,激烈攪拌,同時加入4%CuSO450ml. ⑵酒石酸鈉作穩定劑,吸10ml10N KOH溶液和20ml25%酒石酸鉀鈉溶液加到930ml水中,激烈攪拌,同時加入4%CuSO4液40ml. 配製以上兩種溶液、試劑,必須澄清,無氫氧化銅生成,否則重配. 3 方法:樣品測定 標准曲線繪制 准確稱0.6g樣品→使用試劑(1) 准確稱0.5g樣品→使用試劑(2) 假如用試劑(2) (1)准確稱樣→0.5g→於80ml離心管→加1mlClC4→混合→加50ml酒石酸鉀鈉穩定劑→蓋上蓋子離心10min(4000轉/分)→放置1小時→吸混合液15ml→於20ml離心管中→離心到完全透明→取上清夜5ml於→10ml容量瓶→加水定容→於550nm處測定吸光度,從標准曲線上查出pro含量. (2)標准曲線繪制 按樣品測定方法,根據樣品中pro含量,取離心澄清樣液0.0 2.0 4.0 8.0 10.0ml於10ml容量瓶中→分別加水定容,按照樣品測定其吸光度. 事先用K氏定氮法測定樣品中pro含量為橫坐標,以上述吸光度為縱坐標繪制標准曲線. 4 計算:蛋白質%=C/W×100 C----從標准曲線上查得得pro含量(mg) W----測定樣液時相當於樣品重量(mg)

㈥ 一般食品出現問題,比如魚裡面含有孔雀石綠、豬身上有瘦肉精,這些都是通過什麼檢測出來的

目前,孔雀石綠的檢測方法以理化檢測法和免疫學檢測法為主。其中理化檢測法包括:薄層層析法、分光光度法、高壓液相色譜法、液相色譜質譜聯用法、氣相色譜質譜聯用法等。酶聯免疫檢測法
酶聯免疫法(ELISA)的基本原理是將酶分子與抗體分子共價結合,結合產物不會改變抗體的免疫學特性,也不影響酶的生物學活性。此種酶標抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。底物可在酶的作用下使其所含的供氫體由無色的還原型轉變成有色的氧化型,出現顏色反應,顏色反應的深淺與樣品中相應抗體或抗原的量呈一定的比例,顯色反應可通過酶標儀進行定量測定。ELISA方法是一種既特異又敏感的檢測方法,可分為:間接競爭抑製法、抗體/抗原包被直接競爭法和夾心法。
而對於豬肉中的「瘦肉精」,檢測方法有高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜聯用法(GC-MS)和高效液相色譜一質譜聯用法(HPLC-MS),這些都是比較傳統的辦法,由於這些方法對儀器設備、操作人員的要求較高,耗時較長,在檢測過程中往往是作為確認檢驗方法。目前,實驗室中最常用的是酶聯免疫吸附法,它是運用抗原抗體反應的原理對豬肉中「瘦肉精」作出定量定性的分析,一般實驗只需2~3小時,具有成本低、速度快、檢測靈敏度高、儀器設備簡單等優點。另外有一些快速檢測方法。

㈦ 瘦肉精檢測儀多少錢怎麼用一般人能會用嗎

瘦肉精檢測儀多少錢?怎麼用?一般人能會用嗎?
1、瘦肉精檢測儀多少錢?一般來說是按照產品不同、檢測功能和檢測項目的不同來定義,所以價格也會有高低不等,所以還是要看你選擇什麼樣的。
2、怎麼用?一般人能會用嗎?
操作很簡單,設備裡面自帶教學視頻,1分鍾學會3分鍾速測。

㈧ 瘦肉精檢測方法有哪幾種

目前的瘦肉精檢測方法,大致有一下四種方法,市場上的一些檢測物品也是根據這些方法衍生而來的。

氣象色譜-質譜法,簡稱GC-MS,GC-MS法優點是把色譜高效快速的分離效果和質譜高靈敏度的定性分析有機合起來,能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析,而且具更高的檢測極限。

高效液相色譜法,此法適合測定熱不穩定和強極性的β-激動劑及其代謝產物,而且,HPLC可以與柱前提取、純化及柱後熒光衍生化反應和質譜(MS)等系統聯用,容易實現分析過程的自動化。其優點是專屬性好、選擇性強、檢測精確度較高,而且假陽性率低;缺點是樣品處理時間長,檢測過程煩瑣、難於操作,需貴重儀器,在實際應用中受到一定的限制。

酶聯免疫吸附法,利用免疫學抗原抗體特異性結合和酶的高效催化作用,通過化學方法將植物辣根過氧化物酶(HRP)與克倫特羅(CL)結合,形成酶偶聯克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔IgG抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結合,然後加入待測克倫特羅和酶偶聯克倫特羅,它們競爭性與克倫特羅抗體結合,洗滌後加底物,根據有色物的變化計量待測克倫特羅量。

膠體金免疫層析法,利用競爭法膠體金免疫層析技術,檢測液中的Clen與金標墊上的金標抗體結合形成復合物,若Clen在檢測液中濃度低於靈敏度值,未結合的金標抗體流到T區時,被固定在膜上的Clen-BSA偶聯物結合,逐漸凝集成一條可見的T線;若Clen濃度高於靈敏度值,金標抗體全部形成復合物,不會再與T線處Clen-BSA偶聯物結合形成可見T線。

如何檢測"瘦肉精"豬肉

可以用瘦肉精檢測儀,瘦肉精檢測儀HED-SSJ 可現場快速檢測鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇。儀器預留其他項目檢測程序和埠,根據日後需求可方便的自主增加檢測項目。日後可升級為檢測抗生素、獸葯殘留、動物疫病、病害肉、的綜合類型儀器。

㈩ 如何檢測「瘦肉精」的殘留

目前,檢測「瘦肉精」殘留的方法主要有四種,即高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜-質譜法(GC-MS)、毛細管區帶電泳法(CE)和免疫分析技術(IA)。目前,我國將HPLC法作為「瘦肉精」檢測殘留的半確證性方法,其最低檢測限范圍為1~15納克/克。IA技術主要有放射免疫分析技術(RIA)和酶免疫分析技術(EIA)。RIA最低檢測限可達到0.5納克/克,國外已生產出RIA測定克倫特羅的試劑盒。檢測克倫特羅較高效的EIA是ELISA技術,檢測限可達0.05納克/克,最高可達0.003納克/克。我國研製的「瘦肉精」多克隆抗體檢測試劑盒,對樣品檢測的特異性強,檢測時間短,可同時檢測多個樣品。

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