Ⅰ 常用的生物鹼提取,分離方法是什麼
一、生物鹼的提取:
1.水或酸水提取法
(1)生物鹼在植物體內都以鹽的形式存在,常以無機酸水提取。使生物鹼的大分子有機酸鹽變為小分子無機酸鹽,增大在水中的溶解度,且方法比較簡便。
(2)常用0.1%~l%的硫酸、鹽酸或醋酸、酒石酸溶液作為提取溶劑,採用浸漬法或滲漉法提取。
(3)主要缺點是提取液體積較大,濃縮困難,且水溶性雜質多。故用酸水提取後,一般可採用下列純化和富集生物鹼的方法:
1)陽離子樹脂交換法
生物鹼鹽在水中可解離出生物鹼陽離子,能和陽離子交換樹脂發生離子交換反應,被交換到樹脂上。交換完全後,用中性水或乙醇洗除柱中的雜質。最後,再用適當的方法(酸水或酸性乙醇)將生物鹼從樹脂上洗脫下來。
2)萃取法
將酸水提取液鹼化,生物鹼游離後,如沉澱,過濾即得;如不沉澱,以適當親脂性有機溶劑萃取,回收溶劑,即得總生物鹼。
2.醇類溶劑提取法
(1)游離生物鹼或其鹽均可溶於甲醇、乙醇,可用醇迴流或滲漉、浸漬等方法提取。
(2)優點:適應性廣,不同鹼性的生物鹼和鹽均可用,提取出來的水溶性雜質較少。缺點:脂溶性雜質多。
(3)還可配合酸水-鹼化-萃取法處理去除脂溶性雜質。
具體方法是醇提液回收醇後加稀酸水攪拌,濾過,濾液調鹼性後以親脂性有機溶劑萃取,回收溶劑即得總生物鹼。
3.親脂性有機溶劑提取法
(1)大多數游離生物鹼都是親脂性的,故可用氯仿、苯、乙醚等提取游離生物鹼。可採用浸漬、迴流或連續迴流法提取。
(2)但一般要將葯材用少量鹼水濕潤後提取,以便使生物鹼游離,也可增加溶劑對植物細胞的穿透力。
(3)揮發性生物鹼如麻黃鹼可用水蒸氣蒸餾法提取。可升華的生物鹼如咖啡鹼可用升華法提取。
二、生物鹼的分離:
1.利用鹼性差異進行分離
(1)總鹼中各生物鹼的鹼性不同,可用pH梯度萃取法進行分離。
(2)將總生物鹼溶於氯仿等親脂性有機溶劑,以不同酸性緩沖液依pH由高至低依次萃取,生物鹼可按鹼性由強至弱先後成鹽依次被萃取出而分離,分別鹼化後以有機溶劑萃取即可。
(3)將總生物鹼溶於酸水,逐步加鹼使pH值由低至高,每調一次pH值,即用氯仿等有機溶劑萃取,則各單體生物鹼依鹼性由弱至強先後成鹽依次被萃取出而分離。
2.利用溶解度差異進行分離
(1)游離生物鹼:如苦參中苦參鹼和氧化苦參鹼的分離,可利用氧化苦參鹼極性稍大難溶於乙醚,苦參鹼可溶於乙醚的性質,將苦參總鹼溶於氯仿,再加入10倍量以上乙醚,氧化苦參鹼即可析出沉澱。漢防己中漢防己乙素極性大於甲素,故在冷苯中的溶解度小於甲素,藉此可用冷苯法將兩者分離。
(2)生物鹼鹽:不同的生物鹼與不同酸生成的鹽是溶解度也不同:如麻黃中分離麻黃鹼、偽麻黃鹼,即利用二者草酸鹽的水溶性不同,提取後經處理得到的甲苯溶液,經草酸溶液萃取後濃縮,草酸麻黃鹼溶解度小而析出結晶,草酸偽麻黃鹼溶解度大而留在母液中。
3.利用特殊官能團進行分離
(1)酚性或含羧基生物鹼在鹼性條件下成鹽溶於水,可與一般生物鹼分離。
(2)內酯或內醯胺結構的生物鹼可在鹼性水液中加熱開環生成溶於水的羧酸鹽而與其他生物鹼分離,在酸性下又環合成原生物鹼而沉澱。
4.利用色譜法進行分離
(1)吸附柱色譜:常用氧化鋁或硅膠作為吸附劑,有時也用纖維素、聚醯胺等。
(2)分配柱色譜:對某些結構特別相近的生物鹼,可採用分配色譜法。
(3)其他:高效液相色譜、制備性薄層色譜、干柱色譜、中壓或低壓柱色譜等也常用於分離生物鹼。
Ⅱ 用HPLC測定苦參鹼是用C18柱還是氨基柱好
HPLC一般指高效液相色譜 高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統
Ⅲ 生物鹼的主要沉澱試劑有
生物鹼(alkaloid)是一種天然的含氮有機化合物,中葯中重要的有效成分之一,主要存在於多種植物體內,種類多,根據結構的不同可分為12種,大多具有顯著的生理活性。
生物鹼檢測
生物鹼檢測方法
1. 酸性染料比色法:主要利用生物鹼與酸性染料發生化學反應,生成有色離子對,離子對定量溶於某些有機溶劑,最後對其進行比色測定。一般用於總生物鹼含量的檢測。按酸性染料的不同,酸性染料比色法可以分為溴甲酚綠法、澳麝香草酚藍法和甲橙提取比色法。比色法操作繁瑣、結果重現性差、穩定性低。
2. 薄層色譜法:是用微量注射器分別吸取一定量樣品及標准品溶液點在高散薄層板上,吹乾,分別以不同的展開劑展開,揮干溶劑,Drangendorff試劑顯色。薄層色譜法分離效果較好、重現性良好,但樣品需純化。
3. 近紅外光譜法:適用於復雜天然產物的定性定量分析。無需制備樣品、在建立可靠的校正模型後,可直接對包裝材料中的樣品進行無損檢測,快速、無污染、低成本、多組分同時檢測,非常適用於工業現場的在線檢測和原位分析。
4. 氣質聯用法:適用於具有揮發性且遇熱不分解的部分生物鹼,如苦參鹼、麻黃鹼、檳榔鹼等。GC-MS法分離效果好、靈敏度高、重現性好。
5. 高效液相色譜法:HPLC具有分離效率高(一般一次分離僅需幾十秒鍾至幾分鍾)、靈敏度高、樣品用量少、自動化在線檢測、成本低、模式多樣等特點。HPLC可分別與紫外檢測器、二極體陣列檢測器、熒光檢測器、蒸發光檢測器、電化學檢測器聯合使用,都可檢測生物鹼的含量,而且得到的結果准確度高。
迪信泰檢測平台以液相/氣相分享為依託,建立了高效液相色譜/液質聯用/氣質聯用等生物鹼檢測平台,同時擁有紫外、二極體陣列、蒸發光等多種檢測器,滿足您的不同需求。目前,迪信泰檢測平台可檢測荷葉鹼、長春質鹼、苦參鹼、貝母素甲/乙、異蓮心鹼等20多種生物鹼。
Ⅳ 誰了解苦參提取物對未分化癌是否真的有效果.
苦參提取物目前國內外研究最多是苦參鹼,下面這篇文章你看一下有幫助嗎?
苦參鹼抗腫瘤作用及其機制的初步研究中華首席醫學網 2007年11月01日 22:35:18 Thursday 點擊次數:22
作者:馬玲娣 張彥 文世宏 何於娟 劉小珊 康格非 蔣紀愷
作者單位:南京醫科大學附屬常州第二人民醫院中心實驗室,常州 213003
《中國免疫學雜志》2007年5月23卷5期 中醫中葯與免疫
加入收藏夾 【摘要】 目的:研究中葯苦參鹼(Matrine)的抗腫瘤作用及其免疫學機制。方法:MTT比色法檢測腫瘤細胞的生長抑制率;流式細胞術分析細胞周期的改變。建立荷瘤小鼠模型,觀察小鼠腫瘤的生長情況,計算腫瘤生長抑制率;MTT法測定苦參鹼對荷瘤小鼠PBMC體外增殖作用的影響;ELISA法檢測苦參鹼治療後小鼠血清中IL�2和IL�12的活性。結果:苦參鹼可顯著抑制小鼠腫瘤細胞的體外分裂和增殖,且抑製作用呈濃度和時間依賴性,使G1期細胞增多,S期和G2/M期細胞減少,細胞增殖指數降低。苦參鹼對小鼠實體瘤生長具有顯著抑製作用,抑瘤率高達60.7%以上;明顯抑制小鼠靜止PBMC的體外增殖作用;不能提高荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12的含量。結論:苦參鹼具有較強的抗腫瘤作用,體內體外卻表現出一定的免疫抑製作用,提高機體的免疫功能不是苦參鹼發揮抗癌活性的主要機制。
【關鍵詞】 苦參鹼;腫瘤;免疫調節
Preliminary studies on anti�tumor activies of matrine and its immunological mechanism
MA Ling�Di, ZHANG Yan, WEN Shi�Hong, HE Yu�Juan, LIU Xiao�Shan, KANG Ge�Fei, JIANG Ji�Kai.
The Central Laboratory, the Second Changzhou Hospital, Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Changzhou 213003, China
〔Abstract〕 Objective:To explore the inhibitory effects of matrine on tumor growth and the possible mechanisms related to immunological functions.Methods:The tumor cell growth repression rate was measured by MTT colorimetry. Flow cytometry was used to analyze the cell cycle of H22 cells. The H22 BALB/c xenograft tumor models were established. The anti�tumor effect of matrine was observed and tumor growth inhibitory rate(IR) was calculated. The effect of matrine on the proliferation of peripheral blood mononuclear cell(PBMC) separated from H22 tumor�bearing BALB/c was determined by MTT assay in vitro; the content of serum IL�2 and IL�12 were examined by ELISA assay.Results:Matrine inhibited proliferation of the H22 tumor cells in both time and concentration�dependent manners, with increased the cell numbers at G1 phase and decreased numbers at S and G/M phase showing the possible mechanism for lowering cell proliferation rate. The tumor inhibition rate of matrien came up to 60.7% in tumor�bearing mice. Matrine significantly suppressed the proliferative activity of PBMC from tumor�bearing mice. Furthermore, martine could not increase the contents of murine serum IL�2 and IL�12.Conclusion:Matrine could inhibit tumor cell growth directly but not exert the anti�tumor efficiency through reinforcing the immune function.
〔Key words〕Matrine;Tumor;Immunoloregulation
苦參鹼是我國傳統中葯苦參中提取出的一種主要的活性成分,具有消炎抗菌、抗過敏、抗心率失常等多種葯理學作用〔1,2〕。我們多年來的研究表明,苦參鹼在體外可誘導人白血病細胞K562向正常形態分化,有效抑制K562細胞的體外增殖〔3,4〕。隨著對苦參鹼提純和葯效作用的深入研究,發現苦參鹼還具有抗腫瘤作用,但目前對苦參鹼抗腫瘤尤其是抗實體瘤方面的研究還不夠深入,其體內外的抗腫瘤機制仍不明了,尤其是與荷瘤機體免疫功能之間的關系還是未知。為了認識苦參鹼抗癌作用的機理和特點,我們選用小鼠H22肝癌細胞為研究對象,建立荷H22肝癌移植瘤小鼠模型,觀察了苦參鹼對H22細胞的抑製作用和其對荷瘤小鼠免疫功能的影響,以期探討苦參鹼抑瘤作用與機體免疫功能之間的關系。
1 材料與方法
1.1 材料
苦參鹼購自陝西省科學院西安植物園植物化學開發研究所,純度為99.9%;RPMI1640培養基Gibco公司產品;胎牛血清為杭州四季青生物工程材料有限公司產品;刀豆蛋白A(Con A)及MTT〔3�(4,5)�雙甲基�2�噻唑�(2,5)�二甲基溴化四氫唑鹽〕均為美國Sigma公司產品;小鼠淋巴細胞分離液:天津灝陽生物製品科技有限責任公司出品;IL�2和IL�12 ELISA kit購自廣州晶美生物過程有限公司;環磷醯胺(CTX)為上海華聯制葯有限公司產品,200 mg/支,批號000211;H22腹水型小鼠肝癌細胞由重慶醫科大學基礎醫學院病理生理教研室惠贈;SPF級BALB/c小鼠,重慶醫科大學實驗動物中心提供;96孔細胞培養板:丹麥Duke公司;CO2培養箱:德國Heraeus公司;光學顯微鏡:日本Olympus;酶聯免疫吸附檢測儀美國Bio�Rad MODEL550型;電子數顯游標卡尺:廣州一途電子有限公司YT�203型。
1.2 方法
1.2.1 苦參鹼對H22細胞生長的影響
收集對數生長期H22細胞,調整濃度為5×104 ml-1,接種於96孔細胞培養板中,每孔200 μl,實驗分為實驗對照組(只加試劑)和陰性細胞對照組(只加RPMI1640培養液)。實驗組中加入終濃度分別為0.2、0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml的苦參鹼。每種濃度均設8個平行孔。培養板置於37℃、飽和濕度、5%CO2孵箱中常規培養44小時後,離心棄上清,各孔均加入RPMI1640 200 μl,5 mg/ml MTT溶液20 μl,繼續培養4小時,離心棄上清,加入二甲基亞碸200 μl,振盪器上振盪5分鍾溶解藍色結晶,混勻後以酶標儀於570 nm處讀取各孔吸光度值(A570),計算腫瘤細胞的生長抑制率。
細胞生長抑制率(%)=1-實驗組A570均值對照組A570均值×100%。
1.2.2 苦參鹼對H22細胞周期的影響
取對數生長期H22細胞,調整濃度為3×105 ml-1/20 ml,接種於100 ml細胞培養瓶中,加入苦參鹼,使其終濃度分別為0.5、1.0和1.5 mg/ml,37℃、飽和濕度、5%CO2培養48小時後收獲細胞,PBS洗滌2次,70%冷乙醇固定,RNase消化,碘化丙啶(PI)室溫染色30分鍾後,經流式細胞儀檢測細胞周期時相分布,計算細胞增殖指數(PI)。
PI(%)=S+G2/MG1+S+G2/M×100%。
1.2.3 荷H22肝癌移植瘤小鼠模型的建立
對數生長期H22細胞,以RPMI1640調整細胞濃度為5×106 ml-1,於BALB/c小鼠左側下腹部行無菌皮下接種,接種量為0.2 ml細胞懸液,細胞總數為1×106個。接種24小時後稱重分組,將BALB/c小鼠隨機分為4組:苦參鹼高濃度組(Mhigh)和低濃度組(Mlow),給葯量分別為50 mg/kg體重和100 mg/kg體重;陽性對照組給予20 mg/kg體重的CTX;陰性對照組(N.S control)給予等量無菌生理鹽水。每組小鼠20隻,每日以腹腔注射(i.p)方式給葯,0.2 ml/只,隔日1次,連續注射7天。
1.2.4 苦參鹼對H22荷瘤小鼠移植瘤生長情況的影響
停葯後次日處死小鼠,剝出瘤體稱重,計算腫瘤生長抑制率(IR)。
抑瘤率(%)=對照組平均瘤重-治療組平均瘤重對照組平均瘤重×100%。
1.2.5 苦參鹼對荷瘤小鼠PBMC體外增殖反應的影響
1.2.5.1 小鼠外周血單個核細胞(PBMC)的分離〔5〕
BALB/c小鼠頸椎脫臼致死,無菌取脾,盛有無菌Hanks液的平皿中輕輕捻碎脾組織,以250目不銹鋼篩網過濾,收集得到脾細胞懸液。用小鼠淋巴細胞分離液按常規方法操作,分離得到小鼠PBMC懸液。台盼藍染色計數活細胞數95%以上,以含10%胎牛血清的RPMI1640配成1×106 ml-1細胞懸液。
1.2.5.2 苦參鹼對荷瘤小鼠PBMC體外增殖反應的影響〔6〕
試驗組為含有5 μg/ml ConA的小鼠PMBC懸液,內加入不同濃度的苦參鹼溶液,使其終濃度分別為100、200和500 μg/ml。陽性對照組僅含5 μg/ml ConA,空白對照組為加入等體積PBS溶液。將上述細胞懸液分別加入到96孔細胞培養板中,每孔200 μl,試驗組和對照組均設6個復孔(n=6)。加好樣品的96孔培養板置於37℃、5%CO2的孵箱中培養72小時, MTT法步驟同前述。根據以下公式計算刺激指數(SI):
SI(%)=實驗孔A570均值對照孔A570均值×100%。
1.2.6 苦參鹼對荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12水平的影響〔7〕
各組小鼠停葯後次日摘眼球放血,靜置後離心(3 000 r/min,10分鍾)分離血清。ELISA法檢測荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12的活性。
1.2.7 統計學處理
實驗數據以x±s表示,多組間差異性比較採用方差分析(one way ANOVA),使用SPSS 10.0統計學軟體進行分析。
2 結果
2.1 苦參鹼對H22細胞生長的抑製作用
0.2 mg/ml苦參鹼作用於H22細胞48小時後,細胞生長被抑制2%左右,0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml苦參鹼均可顯著抑制H22細胞的增殖,生長抑制率分別為15%、54%、86%和92%,且抑製作用呈劑量�效應依賴性,見表1,提示苦參鹼可直接殺傷體外培養的H22細胞,具有較強的細胞毒作用。表1 苦參鹼對H22細胞的增殖抑製作用(略)
2.2 苦參鹼對H22細胞細胞周期的影響
0.5、1.0和1.5 mg/ml苦參鹼作用48小時後G0/G1期細胞增多,S期和G2/M期細胞減少,作用具有明顯的劑量依賴性,見表2,顯示苦參鹼可有效抑制細胞周期的正常轉換,使細胞在G1期堆積,細胞阻滯於G2/M期,從而阻止細胞的有絲分裂,使細胞增殖受到抑制。表2 不同濃度苦參鹼對H22細胞周期的影響(略)
2.3 苦參鹼對荷瘤小鼠腫瘤的抑製作用
苦參鹼處理組小鼠的瘤體體積分別為(10.00±3.8)mm3和(12.19±5.4)mm3,明顯小於N.S對照組小鼠瘤體體積(40.04±9.7)mm3,成瘤時間也明顯晚於N.S對照組;50 mg/kg和100 mg/kg劑量苦參鹼的抑瘤率分別為60.71%和63.53%,明顯高於對照組(P<0.01),抑瘤效果接近CTX;高濃度組與低濃度組的抑瘤效果接近,無明顯量效差異(P>0.05),見圖1。
2.4 苦參鹼對荷瘤小鼠PBMC體外增殖反應的抑製作用
苦參鹼單獨作用時,明顯抑制小鼠靜止PBMC的體外增殖,SI小於PBS對照組(P<0.01),對ConA活化了的小鼠PBMC增殖表現出一定的協同刺激作用,但刺激作用隨苦參鹼濃度的增高而降低,見表3。表3 苦參鹼對小鼠PBMC體外增殖活性的影響(略)
2.5 苦參鹼對荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12水平的影響
苦參鹼治療後,血清中IL�2和IL�12的水平沒有明顯改變(P>0.05),提示苦參鹼不能促進荷瘤小鼠合成和分泌IL�2和IL�12,見表4。表4 苦參鹼對荷瘤小鼠IL�2和IL�12水平的影響(略)
3 討論
本研究中,我們通過體內外實驗觀察了苦參鹼對小鼠H22肝癌細胞的作用,發現苦參鹼作用後H22細胞分裂相減少,胞內顆粒明顯增多,大量空泡出現,顯示出較強的細胞毒性。苦參鹼對H22細胞的增殖抑製作用具有時間和濃度的依賴性,低濃度苦參鹼對H22細胞的抑製作用不明顯,而0.5 mg/ml及更高濃度的苦參鹼則可使細胞數量明顯減少,增殖受到明顯抑制。此外,苦參鹼可使G0/G1期細胞增多,S期和G2/M期細胞減少,細胞阻滯於G1→S期;細胞增殖指數降低,與細胞增殖抑制試驗的結果相一致,表明苦參鹼可以影響腫瘤細胞內DNA的復制和合成,抑制細胞的正常分裂;抑制細胞進入S期,從而使細胞在G1期堆積,出現G2/M阻滯,從而抑制細胞的增殖〔8〕。
苦參鹼對小鼠H22實體瘤的生長也有明顯的抑製作用,抑瘤率達60%以上。實驗過程中發現,給以苦參鹼治療的部分小鼠給葯後15天始終未形成明顯的腫瘤結節,僅在接種處的皮膚表面出現紫紅色潰瘍性結痂,另有部分小鼠實驗初期出現了肉眼可見的皮下腫塊,但隨著治療的進行,腫塊逐漸縮小至不見;苦參鹼治療後的小鼠,皮下瘤塊的出現時間也普遍晚於對照組1~2天, 腫瘤生長速度也明顯減慢,表明苦參鹼能顯著抑制小鼠腫瘤的發生和發展。由於實驗中採用的是經腹腔注射的全身給葯方式,可以排除苦參鹼局部用葯產生的毒性作用,表明苦參鹼的抑瘤作用是通過機體自身的抗腫瘤機制起作用。
本研究發現,苦參鹼不管是對荷瘤小鼠靜止PBMC以及ConA活化了的PBMC的體外增殖反應都具有一定的抑製作用,顯示了苦參鹼在抗腫瘤同時,對免疫功能有一些抑製作用〔9,10〕。抗腫瘤免疫應答反應中,IL�2和IL�12是調節機體細胞免疫功能的兩種重要的細胞因子,但本研究結果顯示,苦參鹼作用前後,小鼠血清中IL�2和IL�12的水平無明顯改變,提示苦參鹼對小鼠的抗腫瘤細胞免疫應答反應沒有明顯促進作用〔11〕。
以上研究結果表明,苦參鹼對腫瘤所致的小鼠免疫功能低下狀態沒有明顯改善,體內體外實驗中都顯示出了一定的免疫抑制效應,其抗腫瘤作用主要不是通過提高機體的免疫功能來實現的,還存在有其他的作用機制。
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Ⅳ 苦參鹼能噴李子樹嗎在開花前可以嗎
如果噴,盡量早些。
李子在開花期間,不要打什麼農葯,以免影響座果。李子樹是異花授粉植物,在開花期間需要蜜蜂等昆蟲幫助其完成授粉,在此期間不能噴灑殺蟲劑。
苦參鹼是由豆科植物苦參的乾燥根、植株、果實經乙醇等有機溶劑提取製成的, 是一種生物鹼。苦參總鹼是苦參所有生物鹼的統稱(苦參總鹼檢測方法為滴定法),其主要成分有苦參鹼、槐果鹼、氧化槐果鹼、槐定鹼等多種生物鹼,以苦參鹼、氧化苦參鹼含量最高。其他來源為苦豆子果實,山豆根及山豆根地上部分,純品外觀為類白色至白色粉末。苦參素農葯的使用方法:
苦參鹼是天然植物性農葯, 對人畜低毒, 是廣譜殺蟲劑,具有觸殺和胃毒作用。對各種作物上的黏蟲、菜青蟲、蚜蟲、紅蜘蛛有明顯的防治效果。害蟲一旦觸及本葯,即麻痹神經中樞,繼而使蟲體蛋白質凝固,堵死蟲體氣孔,使害蟲窒息而死。速效性差,應搞好蟲子情預測預報,在害蟲毛蟲,菜青蟲,低齡期施葯防治。對於水生動物的毒性尚不明確。按照苦參鹼降解的速度,一般毒性很低,首先要確定噴葯濃度是否合適,另外噴葯的高毒,噴到莖葉,不到達稻田根部應該對扣蟹危害不大。
配比:0.3% 苦參鹼水劑、1% 苦參鹼醇溶液、0.2% 苦參鹼水劑、1.1% 苦參鹼粉劑、1% 苦參鹼可溶性液劑。
使用方法:
防治蔬菜蟲害:青蟲、小菜蛾、穀子黏蟲等 在卵孵化高峰期到低齡幼蟲期(2~3齡)噴葯,每667平方米使用0.3%水劑100~150克,或0.36%水劑80~120克,或1%可溶性液劑30~45毫升,或2%水劑1 5~20毫升,兌水40~50千克均勻噴霧。該葯劑對低齡幼蟲效果好,對4~5齡幼蟲敏感性差。
防治果樹蟲害:在害蟎迅速發生初期開始噴葯,10~15天1次,連噴2次。一般使用0.3%水劑250~300倍液,或0.36%水劑300~350倍液,或1%可溶性液劑800 --1 000倍液,或2%水劑1 500~2 000倍液均勻噴霧。
防治地下蟲害:每667平方米使用o.3%水劑700~1300毫升,或o.3 6%水劑600~1 200毫升,或1%可溶性液劑200~400毫升,或2%水劑100~200毫升兌水後灌根處理。
Ⅵ 氧化苦參鹼的簡介
氧化苦參鹼又名苦參素.
植物來源:本品系從豆科屬植物苦參(Sophora flavescens Ait.)或平科植物廣豆根(Sophora subprostrata Chun et T.Chen)中分離出來的生物鹼。
英文名稱:Oxymatrine
CAS NO: 16837-52-8
熔點及溶解度:mp.162℃~163℃(水合物),207℃(無水物),溶於水,氯仿,乙醇,難溶於乙醚,甲醚,石油醚。
分子式及分子量:分子式C15H24N2O2;264.36
分子結構:
有效成份:Matridin-15-one,l-oxide.(1β)-;C15H24N2O2
應用劑型:膠囊 針劑
規格含量:98%
檢測方法:HPLC
產品形狀:透明顆粒結晶
物理性質:熔點207℃-208℃,易溶於水、甲醇、氯仿、苯,難溶於乙醚
生產工藝:主要由水提、萃取、結晶等工序完成
保存方法:陰涼乾燥、避光、避高溫
保 質 期:2年(暫定)
Ⅶ 苦參鹼溶解性及穩定性
苦參鹼
熔點及溶解度:mp.76℃,溶於水,苯,氯仿,乙醚和二氧化碳,難溶於石油醚。
植物來源:豆科植物苦參Sophora flavescens的乾燥根。
英文名稱:Matrine
別名:母菊鹼
C15H24N2O 248.37
本品系從豆科槐屬植物苦豆子(Sophora alopecuroides L.)果實或地上部分提取的一種生物鹼。按乾燥品計算,含C15H24N2O 不得少於98.0%。
【性狀】 本品為白色針狀結晶或結晶性粉末;無臭,味苦;久置露空氣中,有引濕性,並變為淡黃色。
本品在乙醇、氯仿、甲苯、苯中極易溶解,在丙酮中易溶,在水中溶解,在熱水、石油醚中略溶。
比旋度 取本品,精密稱定,加無水乙醇溶解並定量稀釋製成每1ml中含20mg的溶液,依法測定(中國葯典2000年版二部附錄Ⅷ L)比旋度為+31.0°至+36.0°
【鑒別】(1)取本品約5mg,加稀鹽酸10ml溶解後,分置兩支試管中,一管中加碘化汞鉀試液1滴,生成白色沉澱;另一管中加碘化鉍鉀試液1滴,生成橙紅色沉澱。
(2)取本品與苦參鹼對照品 分別加流動相製成每1ml約含0.08mg的溶液,照有關物質項下的方法試驗,供試品主峰的保留時間應與對照品的保留時間一致。
【檢查】鹼度 取本品0.2g,加水40ml溶解後,依法測定(中國葯典2000年版二部附錄Ⅵ H),pH值應為9.5~10.5。
溶液的澄清度與顏色取本品0.5g,加水25ml溶解後,溶液應澄清無色。如渾濁,與1號濁度標准液(中國葯典2000年版二部附錄Ⅸ B)比較,不得更濃。如顯色,與黃色1號標准比色液(中國葯典2000年版二部附錄Ⅸ A)比較,不得更深。
氯化物 取本品0.5g,依法測定(中國葯典2000年版二部附錄Ⅷ ),與標准氯化鈉溶液5.0ml製成的對照液比較,不得更濃(0.01%)。
乾燥失重 取本品,先在60~70℃加熱乾燥1~2小時,再升高溫度至105℃,乾燥至恆重,減失重量不得過1.0%(中國葯典2000年版二部附錄Ⅷ L)。
熾灼殘渣 取本品2.0g,依法檢查(中國葯典2000年版二部附錄Ⅷ N),遺留殘渣不得過0.1%。
重金屬 取熾灼殘渣項下遺留的殘渣,依法檢查(中國葯典2000年版二部附錄Ⅷ H),含重金屬不得過百萬分之二十。
有關物質 照高效液相色譜法(中國葯典2000年版二部附錄V D)測定,以氨基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-磷酸水溶液(pH2.0)-無水乙醇(80:10:8)為流動相;檢測波長為220nm;理論板數按苦參鹼峰計算,應不低於1000。
測定法 取本品適量,加流動相分別製成每1ml中含0.5mg的溶液作為供試品溶液與每1ml含0.001mg的溶液作為對照溶液。取對照溶液20μl注入液相色譜儀,調節檢測靈敏度,使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的20%;再取供試品溶液20μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分保留時間的2倍,供試品溶液色譜圖中各雜質峰面積之和不得大於對照品溶液主峰面積(2%)。
【含量測定】取本品約0.2g,精密稱定,置錐形瓶中,精密加入硫酸滴定液(0.05mol/L)20ml,加甲基紅指示液2滴,用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯微黃色,並將滴定的結果用空白試驗校正,每1ml硫酸滴定液(0.05mol/L)相當於24.84mg的C15H24N2O。
【作用與用途】抗菌消炎葯。抗肝炎葯。
【貯藏】遮光,密閉,涼暗處保存。
【制劑】(1)苦參鹼栓(2)苦參鹼注射液
【有效期】暫定2年。
苦參鹼的主要葯理作用如下:
A、 保肝、護肝作用:苦參鹼可減少肝細胞損傷,並促進其再生,改善肝臟微循環,以利膽紅素的攝取、結合與排泄,從而達到抗炎、保肝擴肝以及退黃降酶的功效,最終使肝病理組織學得到明顯改善;
B、 抗病毒:苦參鹼對HBV-DNA的復制有明顯的抑製作用,使肝炎患HBeAg轉陰率達51%,抗HBc--lgM轉陰率達50%;
C 、抗腫纖維化:主要通過保護肝細胞膜,抑制纖維化因子的釋放,調控貯脂細胞(HSC)的功能等多個環節發揮抗肝纖維化的作用;
D 、雙向調控免疫,有效改善病理性組織;
E 、抗腫瘤作用:主要通過抑制細胞膜上Na,k-ATP酶並激活腺苷酸環化酶,進而抑制腫瘤細胞生長作用;同時,苦參鹼還可抑制腫瘤細胞與內皮細胞的粘附,從而減少腫瘤的轉移等;
F 、 毒理試驗證實苦參鹼對動物呼吸系統及心血管系統無明顯影響,急性毒性LD50為64.4mg/kg。長期毒性試驗未發現有毒理意義的病理損傷,致突變試驗均為陰性,表明本品沒有明顯毒性。
臨床應用:苦參鹼在1958年首次被分離和確認,是一類獨特的生物鹼(喹里西啶生物鹼,也稱羽扇生物鹼tetracyclo-quinolizindine alkaloids), 存在於Sophora類植物中,主要用來治療癌症,病毒性肝炎,白細胞減少症,支氣管哮喘和喘息型氣管炎,心臟病(例如病毒性心肌炎),細菌性痢疾及腸炎,以及皮膚病牛皮癬和濕疹(psoriasis and eczema)等。
Ⅷ 苦參鹼的作用和使用方法是什麼
(1)英文通用名 matrine(2)商品名稱 綠諾、綠地1號、綠酶、綠宇、碧綠、綠小青、京綠、綠丫丹1號、綠丫丹2號、維綠特、家稼樂、蚜蟎敵、五豐、殺確爽等。
(3)劑型 0.3%高滲水乳劑,0.3%、0.38%、0.8%、2.5%乳油,0.2%、0.3%、0.5%水劑0.38%、1.1%粉劑,1%可溶性液劑。
(4)性質和作用 苦參鹼是從苦參的根、莖、葉片、花中分離提取得到的植物天然性農葯。該產品低殘留、無污染、無公害,對人畜低毒,對作物安全,不易產生抗葯性,同時有促進作物生長的作用。
中國農業大學農葯教學科研實驗基地開發的殺確爽(1%苦參鹼可溶性液劑)是全國農業技術推廣服務中心推薦產品,殺蟲廣譜,具有觸殺、胃毒作用。害蟲接觸後,首先作用於神經系統,麻醉中樞神經,後中樞神經產生興奮,進而作用於橫膈膜及呼吸肌神經,使害蟲窒息死亡。對多種作物上的鱗翅目害蟲,蚜蟲、葉蟎類等均有較好的防治效果。
(5)使用方法①防治棗、蘋果、梨、桃等果樹的食心蟲、卷葉蟲、潛夜蛾、尺蠖、毛蟲、刺蛾等害蟲,在幼蟲入果之前和低齡幼蟲期,每畝用殺確爽4號0.2~0.5克有效成分噴霧,或用1200~1500倍殺確爽3號或殺確爽4號噴霧,可有效防治之。
②防治棗、蘋果、梨、桃等果樹的蚜蟲、葉蟬等害蟲,在其發生初期,每畝用0.5~1克有效成分噴霧,或用1200~1500倍殺確爽2號、殺確爽5號噴霧,可有效的防治。
③防治棗、蘋果、梨、桃等果樹及棉花的紅蜘蛛、木虱等和小菜蛾、棉鈴蟲、菜青蟲等抗性害蟲,在發生初期和低齡幼蟲期,每畝用0.8~1.5克有效成分噴霧,或用1000~1500倍殺確爽3號或殺確爽6號噴霧,可有效的防治。
(6)注意事項①使用時應遵守農葯使用保護規則,作好個人保護。
②貯存在避光、陰涼、通風的環境條件處。
③嚴禁與酸性農葯混用。
Ⅸ 苦參鹼(生物鹼)生物鹼提取物分離純化注意事項
苦參鹼屬於一種生物鹼,具有一定的生物毒性,可以用作殺蟲劑的添加劑。通常我們從豆科植物苦參中進行天然提取;提取方式可以借鑒常規的植物提取物;在該產品的分離純化方面需要主要好以下幾個方面;
1.首先我們盡可能的要在源頭上進行分析,檢測把控、評估及成本核算。目的是選擇出來適合於工業提取的原材料;
2.其次提取方面參展常規的提取方式進行提取;
3、然後難點在於雜質和目標物苦參鹼的分離方面,通常有溶劑萃取和柱層析方式可以進行;柱層析方面,目標物性質不同,對於樹脂的性能要求也有很大差異(孔道、極性、官能團、粒徑等指標),因此首先選擇好合適的樹脂類型至關重要。國內西安藍曉科技分離純化填料、技術整套設備方面非常全面,有專門針對苦參鹼的樹脂LSD-001;同時有成熟的層析相關經驗可以咨詢其技術人員;
4、最後是整個工藝的把控,需要建立並且控制工藝方面各關鍵技術點,做到工藝和產品的平穩;
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Ⅹ 液相苦參鹼檢測方法
一、 色譜條件:
色譜柱:ODS柱子
檢測波長:220nm
流動相: 乙腈:磷酸水溶液(PH:2.0):無水乙醇
80 :10 :8
流速:1ml/min
靈敏度:0.01AUFS
柱溫:室溫
進樣量:10μl
二、 溶液制備:
1. 對照品溶液制備:
精密稱取苦參鹼對照品約5mg於50ml容量瓶中,加流動相溶液定容。
2. 樣品溶液制備:
精密稱取苦參提取物樣品適量於50ml容量瓶中,加入約30ml流動相超聲振盪30min後,靜置至室溫流動相定容,用0.45μm濾膜過濾即得。