㈠ 提取動物dna的步驟及原理
1、取動物組織搗碎。
2、用生理鹽水浸泡。
3、開始離心分離。
4、加入適量劑量。
5、不斷攪拌，拉出白色的DNA
㈡ 微生物DNA提取的原理和方法是什麼
細菌染色體DNA的抽提
一、 目的
熟練掌握抽提細菌DNA的一般方法
二、原理
要進行重組DNA 實驗，就離不開外源基因的純化，而外源基因主要來源之一就要直接從生物的染色體DNA上制備，所以制備高質量的染色體DNA樣品經常為基因工程實驗所需要，抽提細菌染色體DNA的方法目前已有許多種，這里所介紹的兩種方法：一適用於枯桿菌染色體的抽提；另一種方法則適用於大腸桿菌染色體的制備。
基因工程實驗所需要的基因組DNA 通常要求分子量盡可能大，以此增加外源基因獲得率，但要獲得大片段的DNA 非易事，細菌基因組DNA通常是個很大的環狀態DNA，而在抽提過程中，不可避免的機械剪切力必將切斷DNA，如果要抽提到大的DNA 分子，就要盡可能地溫和操作，減少剪切力，減少切斷DNA 分子的可能性；分子熱運動也會減少所抽提到的DNA分子量，所以提取過程也要盡可能在低溫下進行。另外細胞內及抽提器皿中污染的核酸酶也會降解制備過程中的DNA，所以制備過程要抑制其核酸酶的活性。
另外製備的細菌染色體DNA 必須是高純度的，以滿足基因工程中各種酶反應的需要，制備的樣品必須沒有蛋白污染，沒有RNA，各種離子濃度應符合要求，這些在染色體制備時都應考慮到。
大腸桿菌染色體DNA 抽提首先收集對數生長期的細胞，然後用離子型表面活性劑十二烷基磺酸鈉（SDS）破裂細胞，SDS 具有的主要功能是：（1）溶解細胞膜上的脂類和蛋白質，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜；（2）解聚細胞膜上的脂類和蛋白質，有助於消除染色體DNA上的蛋白質；（3）SDS 能與蛋白質結合成為R1—0—SO3R2—蛋白質的復合物，使蛋白質變性而沉澱下來。但是SDS 能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以後的提取過程中，必須把它除干凈。以免影響下一步RNase的作用。破細胞後RNA經RNase消化除去，蛋白質經苯酚、氯仿:異戊醇抽提除去經灑精沉澱回收DNA。枯草桿菌染色體制備與上類似，但略加修改的方法要適合教學要求。枯草桿菌是格蘭氏陽性菌，所以在SDS 處理前需要使用溶菌酶裂解細胞壁。溶菌酶是一種糖苷水解酶，它能水解菌體細胞壁的主要化學成份肽聚糖中的β—1，4 糖苷鍵，有助於細胞壁破裂，破裂的細胞壁在SDS 的作用下溶菌，同時用蛋白酶K 消化蛋白質，能解離纏繞在染色體DNA上的蛋白質，然後加入一定量的醋酸鉀，使蛋白質變性，通常離心除去，在這期間可加入核糖酸酶消化RNA，最後用乙醇回收DNA。
此二種方法抽提的細菌染色體DNA，無RNA和蛋白質污染，可用於限制性內切酶消化，分子再克隆等。但在下一步實驗前，要測定其DNA的濃度，常用測定DNA 濃度的方法，是溴化乙錠電泳法；當DNA 樣品在瓊脂糖凝膠中電泳時，加入的EB 會增強發射的熒光。而熒光的強度正比於DNA 的含量，如將已知濃度的標准樣品作電泳對照，就可估計出待樣品的濃度。
三、材料
（一）菌株
大腸桿菌C600、枯草桿菌BR151。
（二）儀器
電泳設備、恆溫水浴鍋、低速離心機、恆溫振盪器、紫外檢測儀。
（三）器皿
玻璃離心管（10 毫升）、移液管（10毫升、5毫升）、微量取樣器、燒杯、玻璃棒、試管、三角瓶
（四）試劑
（1）LB 完全肉湯培養液：1%蛋白腖 0.5%酵母粉 0.5%NaCl pH7.5。
（2）BY 培養液：1%蛋白腖 0.5%牛肉膏 0.5%酵母粉 0.5%葡萄糖 0.5%NaClpH7.5
（3）SET 溶液：20%蔗糖；50mmol/L Tris—HCl（pH7.6） 50mmol/L EDTA。
（4）20%SDS
（5）飽和酚
（6）氯仿:異戊醇（24:1 V:V）
（7）預冷無水酒精
（8）TE 溶液
（9）RNase溶液
（10）5mol/L 醋酸鉀
（11）蛋白酶K 20mg/ml
四、實驗步驟
1、取大腸桿菌C600單菌落於5 毫升LB培養液中，37℃振盪培養過液。
2、將上述菌液1%接種量接種於20 毫升LB 培養液中，37℃搖床振盪培養過夜。
3、已培養好的菌液，收集於10毫升的離心管中，在低速離心機上4000r/min離心10分鍾，去上清，留沉澱菌體。
4、用5 毫升的SET 溶液懸浮細胞，加入20% SDS 1毫升，37℃下輕搖過夜，使細胞裂解。
5、加入等體積的飽和酚，上下輕輕搖勻，放置5 分鍾後，在低速離心機上3500r/min離心10 分鍾。
6、取上相，加入1/2 體積的飽和酚，1/2體積的氯仿異:戊醇，上下翻轉均勻，3500r/min離心10 分鍾。
7、取上相，加入等體積的氯仿:異戊醇，如第6步，離心。
8、取上相於一干凈離心管中，另在一個50 毫升的燒杯中加入15毫升預冷無水酒精，把上述的上相液沿著玻棒慢慢倒入酒精中，並溫和地攪拌以使DNA 附著於玻棒上。
9、挑起DNA，再放於干凈的酒精中洗滌，然後把DNA溶於50 毫升TE 中，待測濃度。
（二）枯草桿菌染色體DNA 的抽提
1、在BY 斜面上劃線活化枯草桿菌BR151。
2、挑一環已活化的BR151 菌株於20 毫升的BY培養液中，37℃搖床振盪培養過液。
3、過夜培養物，收集10 毫升於離心管內，在低速離心機上3500r/min離心10 分鍾。
4、沉澱菌體加入0.75 毫升溶菌酶液（8 毫克溶菌酶/1毫升SET），振盪器上懸浮細胞，懸浮液移入1.5 毫升離心管，室溫30 分鍾。
5、在反應液中加入0.15毫升SDS溶液，蛋白酶K 溶液5 微升，37℃水浴10 分鍾後轉入75℃水浴5 分鍾。
6、加入5mol/L 醋酸鉀0.3 毫升，上下翻轉均勻，置於冰上30 分鍾，期間不時搖動。
於台式高速離心機離10000r/min10 分鍾。
7、上清液移入另一離心管，棄沉澱。重復第六步。
8、上清液移入5 毫升的離心管內，緩慢加入2倍體積的無水酒精，DNA呈絮狀沉澱。用一滅菌牙簽，挑起DNA 沉澱，溶於50微升TE中。待檢查濃度。
9、若無絮狀沉，則把其置-20℃冷凍3 小時（或-70℃冷凍30 分鍾），取出離心10 分鍾（10000rPm），去上清，晾乾，加入50ul TE溶解（取20ul 點樣測定）。
（三）染色體DNA 制備樣品濃度測定
1、按實驗一方法制備瓊脂糖凝膠（0.6%）
2、分別取標准濃度的λDNA 0.05ug、0.1ug、0.15ug、0.2ug，加相應的加樣緩沖液混合好，點樣。
3、取2 微升染色體DNA 樣品點樣(冷凍離心獲取的DNA樣品取50 微升點樣)，打開電泳儀電泳，待溴酚蘭進入凝膠2 厘米後，停止電泳，紫外燈下觀察，估計樣品DNA濃度。
五、結果討論與問題
紫外光下觀察DNA 樣品純度，計算出制備的DNA總量和濃度。
1、SDS 在抽提DNA 過程有哪幾個作用？
2、在本實驗中未加入RNase，那麼樣品中應出現什麼情況？
㈢ DNA怎麼提取
DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式：酶法。根據核酸分離純化方式的不同有；硅質材料、陰離子交換樹脂等。
提取DNA總的原則:
1.保證核酸一級結構的完整性；
2.核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；
3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；
4.其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。
例如 : 用酶法提取
DNA提取分為三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。
工具/原料: 研磨棒、研磨儀或者組織破碎儀 , 氯仿：異戊醇（24:1）或者蛋白酶 , RNA酶 , 酒精 , 冰箱
方法/步驟 :
使用研磨儀、研磨棒或者使用超聲破碎細胞的方法破碎細胞，加入去污劑，如sds等，除去膜脂。
去除細胞內的蛋白質，包括與DNA結合的組蛋白，通過加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚／氯仿抽提等方法去除。
加入RNA酶去除RNA，如實驗不嚴密，可省略此步。
沉澱DNA，需在冷乙醇或異丙醇中沉澱，放在冰箱-20℃沉澱30分鍾以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起發生沉澱。
總結: DNA提取方法有下面⑦種
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。
七.鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。
㈣ 植物DNA提取的原理和方法是什麼
原理就是去掉植物細胞壁
細胞膜
質體
線粒體
葉綠體
剩下細胞核了。就是DNA了。
通常採用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由於植物細胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對DNA的抽提產生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易於破碎，並減少研磨過程中各種酶類的作用。
十二烷基肌酸鈉(sarkosyl)、十六烷基三甲基溴化銨(hexadyltrimethyl
ammomum
bromide，簡稱為CTAB)、十二烷基硫酸鈉(sodium
dodecyl
sulfate，簡稱SDS)等離子型表面活性劑，能溶解細胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，從而使DNA得以游離出來。再加入苯酚和氯仿等有機溶劑，能使蛋白質變性，並使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很強，經離心後即可從抽提液中除去細胞碎片和大部分蛋白質。上清液中加入無水乙醇使DNA沉澱，沉澱DNA溶於TE溶液中，即得植物總DNA溶液
㈤ DNA的提取與鑒定
1．材料制備
0.1g/ml檸檬酸鈉100ml
500ml燒杯→玻璃棒攪拌→1000r/min離心2min→吸去上清液→
活雞血180ml
即得雞血細胞液（也可將上述燒杯置於冰箱中，靜置一天使雞血細胞自行沉澱）
2．方法步驟
取血細胞液5-10ml＋20ml蒸餾水，玻璃棒沿一個方向快速攪拌
（1）提取血細胞核物質
紗布過濾，濾液中含dna和其他核物質，如蛋白質
原理：血細胞的細胞膜、核膜吸水脹破，玻璃棒快速攪拌機械加速血細胞破裂
（2）溶解核內dna：濾液＋2mol/lnacl溶液40ml，玻璃棒沿一個方向攪拌
（3）析出含dna的粘稠物：向上述溶液中緩緩加入蒸餾水，並輕輕地沿一個方向攪拌，出現絲狀物，當絲狀物不再增加時，停止加水（此時nacl溶液相當於稀釋到0．14mol/l）
（4）濾取含dna的粘稠物：用多層紗布過濾，含dna的粘稠物留在紗布上
（5）dna粘稠物再溶解：
20ml2mol/lnacl溶液
50ml燒杯，
上述粘稠物
緩慢攪拌3
min
（6）過濾含dna的2mol/lnacl溶液：用2層紗布過濾，濾液中含dna
（7）提取含雜質較少的dna：上述溶液＋95%酒精，緩慢攪拌，出現乳白色絲狀物，用玻璃棒將絲裝物捲起。
（8）dna鑒定：
實驗關鍵：
本實驗成功的關鍵是獲取較純凈的dna，因此應注意：
1．充分攪拌雞血細胞液。dna存在於雞血細胞核中。將雞血細胞與蒸餾水混合以後，應用玻璃棒沿一個方向快速攪拌，使血細胞加速破裂，並釋放出dna
2．沉澱dna必須用冷酒精。實驗前必須准備好大量95%的酒精，並在冰箱中（5℃以下）至少存放24小時。
3．正確攪拌含有懸浮物的溶液。在第（3）、（5）步驟，玻璃棒不要直插燒杯底部，且攪拌要輕緩，以便獲得較完整的dna分子。在步驟（7），要將玻璃棒插入燒杯溶液中間，用手緩慢轉動5-10min。
㈥ 粗提取DNA的不同方法及其原理
實驗原理
DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，是隨著氧化鈉的濃度的變化而改變的。當氯化鈉的物質的量濃度為
2
mol／L時，DNA的溶解度最大，濃度為
0．14
mol／L時，DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。
DNA不溶於95%的酒精溶液，但是細胞中的某些物質則可以溶於酒精溶液。利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的DNA。
DNA中含有脫氧核糖，能與二苯胺（沸水浴）反應生成藍色物質，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
目的要求
1.
學會DNA的粗提取和鑒定的方法。
2.
觀察提取出來的DNA物質的顏色和形狀。
材料用具
材料：活雞或鮮血雞血。
儀器：離心機、恆溫水裕鍋、載玻片，玻璃棒，濾紙，滴管，量簡（100
mL，l個），燒杯（100
mL，l個，50
mL、500
mL各
2個），試管（20
mL，2個），漏斗，試管夾，紗布。
試劑：酒精的體積分數為95％的溶液（實驗前置於冰箱內冷卻24
h），蒸餾水，檸檬酸鈉的質量濃度為
0．1g／mL的溶液，氯化鈉的物質的量濃度分別為
2
mol／L和0．015
mol/L的溶液，二苯胺試劑。
方法步驟
實驗前需要制備雞血細胞液（由教師完成），制備的方法是：取檸檬酸鈉的質量濃度為
0．1
g／mL的溶液（抗凝劑）100
mL，置於500
mL燒杯中。將宰殺活雞流出的雞血（約180
mL）注入燒杯中，同時用玻璃棒攪拌，使血液與檸檬酸鈉溶液充分混合，以免凝血。然後，將血液倒入離心管內，用
1000
r／min的離心機離。2min，此時血細胞沉澱於離心管底部。實驗時，用吸管除去離。心管上部的澄清液，就可以得到雞血細胞液。
1．提取雞血細胞的細胞核物質
將制備好的雞血細胞液5
mL～10mL，注入到50
mL燒杯中。向燒杯中加入蒸餾水20
mL，同時用玻璃棒充分攪拌5
min，使血細胞加速破裂。然後，用放有紗布的漏斗將血細胞液過濾至500mL。取其濾液。
2．溶解細胞核內的DNA
將氯化鈉的物質的量濃度為
2
mol的溶液40mL加入到濾液中，並搖動燒杯，使其混合均勻，這時DNA在溶液中呈溶解狀態。
3．析出含DNA的粘稠物
沿燒杯內壁緩緩加入蒸餾水，同時用玻璃棒不停地輕輕攪拌，這時燒杯中有絲狀物出現，注意觀察絲狀物呈什麼顏色。繼續加入蒸餾水，溶液中出現的粘稠物會越來越多。當粘稠物不再增加時停止加入蒸餾水（這時溶液中氯化鈉的物質的量濃度相當於0.14
mol／L）。
4．濾取含DNA的粘稠物
用放有多層紗布的漏斗，過濾步驟3中的溶液至
500mL的燒杯中，含
DNA的粘稠物被留在紗布上。
5．將DNA的粘稠物再溶解
取
1個
50
mL燒杯，向燒杯內注入氯化鈉的物質的量濃度為
2
mol／L的溶液
20mL。用鈍頭鑷子將紗布上的粘稠物夾至氯化鈉溶液中，用玻璃擇不停地攪拌，使粘稠物盡可能多地溶解於溶液中。
6．過濾含有DNA的氯化鈉溶液
取1個100
mL燒杯，用放有兩層紗布的漏斗過濾步驟5中的溶液。取其濾液，DNA溶於濾液中。
7．提取含雜質較少的DNA
在上述濾過的溶液中，加入冷卻的、酒精的體積分數為
95％的溶液
50mL（使用冷卻的酒精，對DNA的凝集效果較佳），並用玻璃棒攪拌，溶液中會出現含雜質較少的絲狀物。用玻璃棒將絲狀物捲起，並用濾紙吸取上面的水分。這種絲狀物的主要成分就是DNA
。注意觀察絲狀物是什麼顏色的。
8．DNA的鑒定
取兩支20
mL的試管，各加入氯化鈉的物質的量濃度為0．015
mol／L的溶液5
mL，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然後，向兩支試管中各加入4mlL的二苯胺試劑。混合均勻後，將試管置於沸水中加熱
5
min，待試管冷卻後，觀察並且比較兩支試管中溶液顏色的變化。
㈦ DNA提取的步驟及原理
酚-氯仿法提取人外周血基因組DNA的基本原理是什麼？
答：蛋白質對DNA製品的污染常常影響到以後的DNA操作過程，因此需要把蛋白質除去。一般採用苯酚/氯仿抽提的方法。苯酚、氯仿對蛋白質有極強的變性作用，而對DNA無影響。經苯酚/氯仿抽提後，蛋白質變性而被離心沉降到酚相與水相的界面，DNA則留在水相。
取ACD抗凝血2~3ml，置於15ml的離心管內----加滅菌生理鹽水至10ml，顛倒混勻，3000rpm，離心10min-----棄上清，重復步驟2兩至三次，直至上清呈無色或微紅色----加壓積紅細胞5.5倍的溶血試劑，混勻，放置-20℃冷溶10min後移至4℃，30min，直至溶液由紅色懸液變成紅棕色清亮溶液-----3000rpm，離心15min，倒扣離心管於濾紙，使管壁液體流盡-----依次加入STE 450 ml，用槍頭吹打混勻後，加入蛋白酶K至終濃度100mg/ml，然後加入10% SDS 25 ml，混勻後移至1.5ml EP管，放置於37℃水浴過夜或56℃，3h----加入等體積飽和酚（約500ml），漩渦振盪器上混勻至溶液呈乳滴狀，13000rpm，離心5min。------取上清，加入500μl酚/氯仿（等體積配製混合液），漩渦振盪混勻，13000rpm，離心10min。---------取上清，加入500μl氯仿/異戊醇（24：1混合），漩渦振盪混勻，13000rpm，離心10min。-------取上清，加入50μl物NaAc（1/10體積），混勻後再加入1ml 冰凍的無水乙醇，顛倒輕搖，即可見絮狀的DNA沉澱，13000rpm，離心10~20秒，得到DNA沉澱。------------DNA沉澱用70%乙醇洗2~3遍。--------待乙醇揮發後，DNA沉澱用100μl TE緩沖液溶解，核酸蛋白測定儀分析DNA濃度和純度，-20℃保存備用。
㈧ 血液中抽提DNA的方法步驟
高中：
原理：
1.析出溶解在nac1溶液中的dna。
2.用冷酒精提取出含雜質較少的dna。
3.dna在沸水浴時被二苯胺染成藍色。
方法步驟：
1．提取細胞核物質：順時針方向攪拌，稍快，稍重。
5
min
2．溶解dna：
3．析出含dna的黏稠物：蒸餾水300ml，逆時針方向攪拌，緩慢
4．過濾：取黏稠物
5．再溶解：順時針方向攪拌，較慢。3
min
6．過濾：取濾液。
7．提取出含雜質較少的dna，逆時針方向攪拌，稍慢。5
min
8．dna的鑒定：沸水浴5min
大學
dna提取分為三個基本步驟，每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。
利用研磨或者超聲破碎細胞，並通過加入去污劑以除掉膜脂。
加入蛋白酶，醋酸鹽沉澱，或者酚/氯仿抽提，以除掉細胞內的蛋白，如與dna結合的組蛋白。
將dna在冷乙醇或異丙醇中沉澱，因為dna在醇中不可溶而黏在一起，這一步也能除掉鹽分。
另外，目前也有利用吸附過柱的方法提取dna的商業化試劑盒。
2.細胞的破碎
細菌有堅硬的細胞壁，首先要破碎經胞。方法有三種;①機械方法：超聲波處理法、研磨法、勻漿法;②化學試劑法：用sds處理細胞;③酶解法：加入溶菌酶或蝸牛酶，都可使細胞壁破碎。
3.dna提取的幾種方法
(1).濃鹽法
a.
利用rna和dna在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1m
氯
納提取化鈉抽提,得到的dnp粘液與含有少量辛醇的
氯仿一起搖盪,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及氯仿相中間，而dna位於上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將dna
鈉鹽沉澱出來.
b.
也可用0.15
mnacl液反復洗滌細胞破碎液除去rnp,再以1mnacl提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白.
兩種方法比較,後種方法使核酸降解可能少一些.
c.以稀鹽酸溶液提取dna
時,加入適量去污劑,如sds可有助於蛋白質與dna
的分離。在提取過程中為抑制組織中的dnase對dna
的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15mnacl,0.015m檸檬鈉,並稱ssc溶液,提取dna.
（2）.陰離子去污劑法;
用sds或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質變性,可以直接從生物材料中提取dna
.由於細胞中dna與蛋白質之間常借靜電引力或配位鍵結合,因為陰離子去污劑能夠破壞這種價鍵,所以常用陰離子去污劑提取dna
（3）.苯酚抽提法：苯酚作為蛋白變性劑,同時抑制了dnase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時,由於蛋白與dna
聯結鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶於酚相，而dna溶於水相。離心分層後取出水層，多次重復操作，再合並含dna
的水相，利用核酸不溶於醇的性質，用乙醇沉澱dna
。此時dna是十分粘稠的物質，可用玻璃漫漫繞成一團，取出。此法的特點是使提取的dna保持天然狀態
（4）.水抽提法:利用核酸溶解於水的性質,將組織細胞破碎後,用低鹽溶液除去rna，然後將沉澱溶於水中，使dna充分溶解於水中,離心後收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調節至2.6m.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然後分別用66%
，80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最後在空氣中乾燥,既得dna樣品.此法提取的dna中蛋白質含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過程中加入sds.