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对细胞器进行荧光标记的常用方法

发布时间:2022-05-15 11:02:02

如何用流式细胞仪分析荧光强度

荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特征。

(一)荧光信号测量与放大器

线性放大器用于测量信号强度变化范围较小的信号或具有生物学线性过程的信号,如前向散射光的测量与CD3+细胞DNA指数的测量。

对数放大器用于测量信号强度变化范围较大且其光谱信号较复杂的信号,在免疫测量中最常使用。

(二)荧光补偿

依靠滤光片是不能完全阻挡干扰信号,在每两种荧光的发射光信号中仍有不可避免的重叠现象。该重叠区越大,信号检测的准确性越差。通常采用荧光补偿的方法来消除重叠信号,保证检测信号的准确性。

❷ 流式细胞仪为什么对细胞进行荧光标记

流式细胞仪工作原理决定流式细胞仪用激光激发荧光素再检测所发荧光所般都用荧光素标记抗体或者荧光素直接染色才能特异性信号

❸ 如何对大鼠的成骨细胞进行荧光标记

如何对大鼠的成骨细胞进行荧光标记
A、根据题意可知,荧光逐渐恢复与细胞膜的流动性相关,A错误;
B、用某种荧光材料标记该动物细胞,细胞表面出现荧光斑点,说明荧光染料能与细胞膜组成成分相结合,B错误;
C、该实验没有涉及物质跨膜运输,C错误;
D、荧光恢复的速率与膜中蛋白质或脂质的流动速率成正比,D正确.

❹ 怎样研究细胞膜的主要成分荧光标记法

嗯,组成细胞膜的主要成分是蛋白质和磷脂分子,细胞膜之所以具有一定的流动性实质上是构成膜成分的蛋白质和脂质具有流动性。用荧光蛋白作二抗标记与膜蛋白结合,当膜上的蛋白质和脂质在流动时,通过检测荧光标记就能显示出来细胞膜的流动性

❺ 关于荧光标记 高中生物

是的,要用荧光标记法!具体来说,就是用免疫荧光抗体标记法!
每种膜上都有特定的蛋白质,用这种蛋白质的抗体(带有荧光标记)去结合膜蛋白,即可跟踪膜蛋白质的去向,从而显示膜的去向!
如果用放射性标记,放射性元素(一般是3H)和化合物(一般是氨基酸)会出现在各种膜上,也就无法判断新的核膜来源于母细胞的哪种膜!

❻ 荧光标记法是什么

荧光物标记法,神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。

例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

相关信息:

荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。

荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射物污染,操作简便等优点,使得荧光标记物在许多研究领域的应用日趋广泛。

❼ 同时观察细胞核和细胞器,用哪些荧光染料进行搭配

必须染色,普通显微镜下你分不清细胞器和细胞核,在倒置或正值相差显微镜下,也只可看到悬浮细胞内一团较深物质,分不清细胞核和细胞器,更分不清分裂期间染色体变化。贴壁细胞只可看到整个形状长索型。苏木精和伊红染色就可以了,苏木精染细胞核成紫色,伊红染细胞质成粉色。染色后细胞死亡。染色前细胞先固定液固定。否则细胞涨破。其他染料也行,但须是碱性染色细胞核,酸性染色细胞质。

怎么制备荧光标记的药物用于细胞摄取实验的

查囊泡运输的内吞相关文献 有很多种标记物!这属于专业性的问题!
如果找不到适合与药物偶联的标记物或者偶联影响药物活性或进入细胞
最好直接检测细胞外囊泡受体,进入细胞的情况。不同时间点。用生化思想比较细胞内的浓度变化,或分离细胞器对药物进行定量,这也是一种间接手段!

很多事没想到吧!

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