A. 培养基灭菌的方法
1、高压蒸汽灭菌纳空陪:高压蒸汽灭菌适用于耐高温培养基、接种器具和蒸馏水的灭菌。培养基在配制过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，灭菌工作至少应在24小时内完成。一般可亏模在0.105MPa压力、121℃温度下灭菌15 ~ 30分钟。消毒时间不能太长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物，特别是维生素，在高温下会分解，失去营养功能，使培养基变质、变色，甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水放入三角瓶中，含水量一般不超过瓶子的2/3，用牛皮纸或硫酸纸包好密封，然后放入高压锅中灭菌，得到无菌水。灭菌后的培养基可以在培养室中预培养3天。如果没有污染，证明灭菌完成，可以使用。暂时不用的培养基最好保存在10℃下。含IAA或GA3的培养基应在一周内用完，其他培养基最多不超过一个月。2、过滤灭菌:一些植物生长调节剂和有机物质，如IAA、GA3、ZT、CM等。，加热时易分解，不能用培养基高温灭菌，所以要用细菌过滤器把洞蠢杂菌过滤掉。细菌过滤器和滤膜(孔径0.45微米)在使用前应高压灭菌。过滤后的溶液应立即加入培养基中。如果是液体培养基，可以在培养基冷却到30℃时添加。如果是固体培养基，必须在培养基凝固前(50-60℃)加入，溶液必须摇匀，与其他成分混合均匀。