细菌接种划线的方法有哪些

‘壹’ 连续划线法操作步骤

连续划线法步骤：从平板边缘一点开始，连续作波浪式划线直到平板的另一端为止，当中不需灼烧接种环上的菌。接种环于酒精灯外焰烧至红透，接种棒也要充分灼烧，最后再集中烧接种环至红。

1、轻轻摇匀待接种试管，左手手心托待接种试管底侧部，右手执接种环，右手小指拔下试管塞，于酒精灯附近将接种环伸进试管，稍候，再插入待接接种液中，蘸一下，取满一环，抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。

或将接种环通过稍打开皿盖的缝隙伸入平板，在平板边缘空白处接触一下使接种环冷却，然后以无菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。

2、靠近酒精灯处打开平皿盖约30°，右手将环伸进平皿，将菌种点种在平板边缘一处，轻轻涂布于琼脂培养基边缘，抽出接种环，盖上平皿盖，然后将接种环上多余的培养液在火焰中灼烧，打开平皿盖约30°伸入接种环。

3、待接种环冷却后，再与接种液处轻轻接触，开始在平板表面轻巧滑动划线，接种环不要嵌入培养基内划破培养基，线条要平行密集，充分利用平板表面积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上皿盖。灼烧接种环，待冷却后放置接种架上。

培养皿倒置于适温的恒温箱内培养（以免培养过程皿盖冷凝水滴下，冲散已分离的菌落）。培养后在划线平板上观察沿划线处长出的菌落形态，镜检后再接种斜面。

划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种。

分区划线法分离时平板分四个区，故又称四分区划线法。划线时每次将平板转动60~70°划线，每换一次角度，应将接种环上的菌烧死后，再通过上次划线处划线。

其中第4区是单菌落的主要分布区，故其划线面积应最大。为防止第4区内划线与1、2、3区线条相接触，应使4区线条与1区线条相平行，这样区与区间线条夹角最好保持120°左右。

1、先将接种环沾取少量菌在平板1区划3~5条平行线，取出接种环，左手关上皿盖，将平板转动60~70°，右手把接种环上多余菌体烧死，将烧红的接种环在平板边缘冷却，再按以上方法以1区划线的菌体为菌源，由1区向2区作第2次平行划线。

2、第2次划线完毕，同时再把平皿转动约60~70°，同样依次在3、4区划线。划线完毕，灼烧接种环，关上皿盖，同上法培养，在划线区观察单菌落。

‘贰’ 微生物学常用的接种技术有哪些各有何特点

细菌的接种方法有很多种，如划线法、涂布法、倾注法、斜面接种法、液体培养基接种法、螺旋接种法等，其方法和应用各有不同。
一、划线法：
此法主要用于菌种分纯，获得单菌落.

由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离。

缺点：不能用于菌落计数。

二、涂布法：

此法主要用于菌落总数计数.

先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中，然后用无菌吸管吸取0.1ml 菌液接种在已凝固的琼脂平板上。再用无菌L 型玻璃棒将菌液在平板上涂抹均匀，将涂抹好的平板平放于桌上20~30min，使菌液渗透入培养基内，然后将平板倒转，保温培养，至长出菌落后即可计数。

优点：可以计数，可以观察菌落特征。

缺点：接种前需梯度稀释，吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。

三、倾倒法：

此法主要用于菌落总数的计数.

吸取1ml 菌液加入平板中，倒入已融化并冷却至45~50℃的细菌培养基，轻轻转动平板，使菌液与培养基混合均匀，冷疑后倒置，适温培养。至长出菌落后即可计数。
优点：可以计数，较方便。

缺点：接种前需梯度稀释，不能观察菌落特征，不适用于严格好氧菌和热敏感菌。

四、斜面接种法：

此法主要用于保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力.

用接种环或接种针伸入菌种管内，挑取用来移种的菌落。伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线，或直接自下而上地蜿蜒划线。接种完成之后，用火焰灭菌培养管口，并塞上棉塞，置于37℃培养。

五、液体培养基接种法：
此法主要用于菌液比浊实验

用灭菌接种环挑取菌落或标本，在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌均匀得散落在液体培养基中。

六、螺旋接种法：
此法主要用于菌落总数计数
可以在无任何全部或中间稀释的情况下快速细菌接种。对数减少的样品容量以阿基米德螺旋线的形式被自动分注在旋转式培养基表面。培养基上每一点的容量可以被知晓和校准。菌液的浓度可以通过培养皿上一定区域的菌落数量除以同区域样品分注量来计算。

优点：螺旋接种法菌液无需稀释（其他接种方法均需经过梯度稀释才能计菌落数），自动化接种，效率高，可节省3/4 的耗材和时间。

缺点：产品成本高，适用于样品量比较大的实验。

‘叁’ 微生物接种环境有什么要求常用的接种方法有哪些

微生物接种需要在无菌条件下完成。

常用的接种方法有以下几种：
1）划线接种 这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。
2）三点接种 在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。
3）穿刺接种 在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
4）浇混接种 该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。
5）涂布接种 与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。
6）液体接种 从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。
7）注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。
8）活体接种 活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。

‘肆’ 细菌的常用接种方法

细菌接种分为从固体接到液体，从液体接到液体，从液体接到固体。固体接到液体时用接种环在平板或斜面上挑取少许菌落，最好是单菌落，然后放到液体里晃动一下就好了。液体接液体就是按1%的比例吸取菌液，移到新鲜菌液就行了。液体划线就不说了。

‘伍’ 接种细菌的三种方法各有什么用途

接种细菌的方法各有什么用途：

1、平面接种法：此方法主要用于鉴定或保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力。

2、菌落分纯法：此方法主要用于分离琼脂平板上的混合菌。

3、液体培养基接种法：此方法可用于比浊试验中。

4、平板划线接种法（又称分离培养法）：平板划线接种法为最常用的分离培养细菌的方法，通过平板划线后，可使细菌分散生长，形成单个菌落，有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。平板分离划线的方法比较多，其中以分区划线发育曲线划线法较为重用。其目的都要时细菌呈现单个菌落生长，便于同杂菌菌落鉴别。

5、纯培养细菌接种法：用于培养保存菌种及其实验用。

6、半固体培养基穿刺培养法：用于保存菌种及间接观察细菌之动力（无动力之细菌仅沿穿刺线生长，清晰可见；有动力的细菌使培养基呈现浑浊样，穿刺线甚至难以看出。）

接种注意事项：

1、在超净工作台上操作，工作台在使用前要紫外消毒，酒精消毒等。

2、应在酒精灯火焰前操作。

3、取菌种前灼烧接种针或接种环（要烧红）。

4、烧红的接种针（环）少使冷却在取菌种，以免烧死菌种。

5、接种后应尽快塞上面塞。

‘陆’ 为防止细菌污染,在细菌的接种过程中应注意哪些细节(按培养基不同分别

接种细菌时,应注意以下几项：
1. 在超净工作台上操作,工作台在使用前要紫外消毒,酒精消毒等。
2.应在酒精灯火焰前操作。
3.取菌种前灼烧接种针或接种环（要烧红）。
4.烧红的接种针（环）稍事冷却再取菌种,以免烧死菌种 。
5.接种后应尽快塞上棉塞。

接种细菌的方法各有什么用途：
1、平面接种法：此方法主要用于鉴定或保存菌种，或观察细菌的某些生化特性和动力。
2、菌落分纯法：此方法主要用于分离琼脂平板上的混合菌。
3、液体培养基接种法：此方法可用于比浊试验中。
4、平板划线接种法（又称分离培养法）：平板划线接种法为最常用的分离培养细菌的方法，通过平板划线后，可使细菌分散生长，形成单个菌落，有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。平板分离划线的方法比较多，其中以分区划线发育曲线划线法较为重用。其目的都要时细菌呈现单个菌落生长，便于同杂菌菌落鉴别。
5、纯培养细菌接种法：用于培养保存菌种及其实验用。

‘柒’ 生物中接种方法→平板划线法要注意什么

（1）要注意全程无菌操作；

（2）滑动时用力要均匀，切勿将接种环嵌入培养基内；

（3）平板应较硬、较厚、表面干燥；

（4）需要分区的时候，划完一个区后必须烧去接种环上的残菌，待冷却后再划另一个区；

（5）划线的线条宜平行、密集、整齐。

接种是食用菌生产中的关键环节之一，如果接种技术不过关，即会造成杂菌污染，成活率低而前功尽弃。无论是菌种分离、传代还是扩繁，都要在无菌条件下严格按照无菌操作规程进行。

(7)细菌接种划线的方法有哪些扩展阅读

常用的接种方法

1、三点接种

在研究霉菌形态时常用此法。此法是把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。

2、穿刺接种

在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针，用的培养基一般是半固体培养基。用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。

3、浇混接种

将待接的微生物和45℃左右的固体培养基进行混合，这样菌液就达到稀释的目的，待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。

4、涂布接种

将菌液倒入凝固的平板上面，用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落

5、注射接种

用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。

6、活体接种

活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。

‘捌’ 微生物接种的方法很多最常用的是平板划线法和什么

菌种分离纯化的方法有：稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。
其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备,
分离纯化效果好,

‘玖’ 细菌划线分离法有哪几种划线方式，划线时应注意什么

用的是四区划线法或五区划线法
划线的形式有多种,可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小,作为待分离菌的菌源区,第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区,第四区(D区),则是关键区,使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用.为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A.
顺便说一下,划线划得好看不好看并不重要,只要分离效果好就行,每个人都可以有自己理想的划线方法,但最关键的依然是效果.此外大致判断接种环上的菌量也是日常积累的经验之一,判断得好就能将细菌分离得更好.

注意事项
1、平板不能倒得太薄，最好在使用前一天倒好。为防止平板表面产生冷凝水，倒平板前培养基温度不能太高。
2、用于平板划线的培养基，琼脂含量宜高些（2%左右），否则会因平板太软而被划破。 3、用于划线的接种环，环柄宜长些（约10cm），环口应十分圆滑，划线时环口与平板间的夹角宜小些，动作要轻巧，以防划破平板。
4、为了取得良好的划线效果，可事先用圆纸垫在空培养皿内画上4区，并用接种环练习划线动作，待通过模拟试验熟练操作和掌握划线要领后，再正式进行平板划线。

‘拾’ 高中微生物常用的接种方法有哪些

微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作，主要用于微生物的分离纯化。具体来说，就是在无菌条件下，用接种环或接种针等专用工具，从一个培养皿（上面可能存在各种杂菌落）挑取所需的微生物，转接到另一个培养基中进行培养，从而实现所需微生物的纯化鉴定，获得没有杂菌污染的单纯菌落等。
接种的方法有很多，按培养基种类可分为利用固体培养基和利用液体培养基，以及居中的半固体培养基。
固体培养分离，有涂布平板法，倒平板法，平板划线法，稀释摇管法等。大部分细菌和真菌用固体培养法即可以得到较满意的分离结果了。
液体培养基常用稀释法，比较繁琐，一般需要重复进行几次。