‘壹’ DNA荧光组织化学染色的方法
一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B),按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色,再用FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如,在实验设计时,选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗,相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时,由于两种一抗种属来源不同,可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗,滴加二抗时,先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育,洗涤后,滴加SABC-Cy3复合物,经荧光显微镜下观察已出现特异性荧光,再进行FITC―抗小鼠IgG(二抗)的孵育,最后封片观察。其结果A抗原呈现绿色荧光,B抗原呈现红色荧光。
‘贰’ 组织学常用的切片是石蜡切片,常用的染色法是和伊红染色,简称__染色,
苏木精,HE,嗜酸性,嗜碱性
‘叁’ 简述什么叫苏木精-伊红染色法
苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
苏木素染色法指使用苏木素的染色法。苏木素是从原产中南美的洋苏木(Haematoxylon campechianum L.)的心材提取出来的浅黄褐色的结晶。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
实验结果
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。
‘肆’ HE染色是什么
苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。
苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
原理
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。
构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
‘伍’ 在医学上,组织切片常用的染色方法是什么
苏木精-伊红染色,即HE染色。
脂肪可以用锇染色(以苏丹3、油红、锇酸染色)。
神经用HE或者银染。
‘陆’ 常用免疫组织化学染色方法有哪些
常用免疫组织化学染色方法, LSAB法.(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脱蜡至水. 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10-20分钟. 3.水洗. 4.抗原修复. 5.PBS洗3次,1分钟/次. 6.加入血清孵育10分钟. 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分钟. 8.PBS洗3次,每次2分钟.加入二抗,孵育20分钟. 9.PBS洗3次,每次2分钟. 10.加入SP复合物孵育20-30分钟. 11.PBS洗3次,每次2分钟. 12.DAB-H2O2孵育5-10分钟. 13.PBS洗,水洗. 14.Harris苏木素染核5-10分钟. 15.水洗,分化 ,蓝化,脱水,透明并封固.
‘柒’ 骨髓细胞染色常用什么方法,各是用于何种检测。
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法,一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节问题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂配制、试验的时间、温度、最后漂洗的手法复染时间的控制等步骤上,对细胞内外铁染色的方法进行探讨,摸索出了一套较满意的染色方法,现介绍如下。
【作者单位】: 黑龙江省宝泉岭农场医院
【关键词】: 骨髓细胞 铁染色 染色方法 组织化学 试剂配制 玻片处理 氰化钾 贫血分类 普鲁士兰 染色法
【分类号】:R361
【正文快照】:
骨髓细胞内外铁染色,是进行贫血分类的常用组织化学染色方法。一般均采用普鲁士兰染色法,该法虽操作简便,但若掌握不好,常使玻璃上沉积大量污染铁,无法判定结果,我们曾查阅多种材料,对该项试验的一些细节同题均无详细介绍。最近我们参照各家材料,经过多次试验从玻片处理试剂
‘捌’ 常用免疫组织化学染色方法有哪些
常用免疫组织化学染色方法, LSAB法。(SP法)(Labelled streptavidim biotln) 1.切片脱蜡至水。 2.0.3%H2O2甲醇处理切片10-20分钟。 3.水洗。 4.抗原修复。 5.PBS洗3次,1分钟/次。 6.加入血清孵育10分钟。 7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分钟。 8.PBS洗3次,每次2分钟。加入二抗,孵育20分钟。 9.PBS洗3次,每次2分钟。 10.加入SP复合物孵育20-30分钟。 11.PBS洗3次,每次2分钟。 12.DAB-H2O2孵育5-10分钟。 13.PBS洗,水洗。 14.Harris苏木素染核5-10分钟。 15.水洗,分化 ,蓝化,脱水,透明并封固。生物帮上面有的,去看看吧, http://www.bio1000.com/zt/disease/ 疾病机理,疾病研究。
‘玖’ 组织学染色方法有哪些
就是血染社一般有两种一个是革兰氏阴性另一个是革兰氏阳性,一般格兰仕异性的是大肠杆菌革兰氏阳性比如说是链球菌。
‘拾’ HE染色是什么染色方法
苏木精(Hematoxylin、He),亦名苏木紫或苏木素,用于细胞核的染色.HE染色法是组织学与病理学常用的切片染色方法,HE染色切片标本是学生观察最多的一种切片标本.HE
10X
是说:你的组织切片是用HE染色法做的,是在10倍的光学显微镜下观察所见的结果