蛋白质活性检测方法

㈠ 蛋白质检测方法

蛋白质检测方法有凯氏定氮法、双缩脲法、考马斯亮蓝法等。

1、凯氏定氮法

是一种模简测定总氮含量的方法，可以在混合物或化合物中检测。即在催化剂条件下，用浓硫酸消化标本，将标本中的裂早有机氮转化为无机铵盐，然后在碱性环境下将无机铵盐转化为氨，用蒸汽蒸馏吸收硼酸溶液，然后用标准盐酸滴定，计算氮含量。

2、双缩脲法

是一种用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂呈蓝色，是一种碱性含铜测试溶液，它由几滴1%硫酸铜，1%氢氧化钾和酒石酸钾钠制成。

2、蛋白质能够帮助人体所需的催化人体内化学反应的酶进行调节，构成重要的生理活性物质。蛋白质也是人体一些重要细胞的基本构成物质之一，补充蛋白质也能够帮助受伤后的伤口愈合。日常适量补充蛋白质对机体有益，但不宜补充过量，以免加重肠胃和肾脏负担，引起身体不适。

㈡ 如何测定蛋白活性

根据每个细胞有一定的重量而设计的。它可以用于单细胞、多细胞以及丝状体微生物生长的测定。将一定体积的样品通过离心或过滤将菌体分离出来，经洗涤，再离心后直接称重，求出湿重，如果是丝状体微生物，过滤后用滤纸吸去菌丝之间的自由水，再称重求出湿重。不论是细菌样品还是丝状菌样品，可以将它们放在已知重量的平皿或烧杯内，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器内冷却，再称量，求出微生物干重。
如果要测定固体培养基上生长的放线菌或丝状真菌，可先加热至50℃，使琼脂熔化，过滤得菌丝体，再用50℃的生理盐水洗涤菌丝，然后按上述方法求出菌丝体的湿重或干重。
除了干重、湿重反映细胞物质重量外，还可以通过测定细胞中蛋白质或DNA的含量反映细胞物质的量。蛋白质是细胞的主要成分，含量也比较稳定，其中氮是蛋白质的重要组成元素。从一定体积的样品中分离出细胞，洗涤后，按凯氏定氮法测出总氮量。蛋白质含氮量为16％，细菌中蛋白质含量占细菌固形物的50％一80％，一般以65％为代表，有些细菌则只占13％一14％，这种变化是由菌龄和培养条件不同所产生的。因此总含氮量与蛋白质总量之间的关系可按下列公式计算：
蛋白质总量＝含氮量×6.25
核酸DNA是微生物的重要遗传物质，每个细菌的DNA含量相当恒定，平均为8.4×`10^(-5)`NG。因此从一定体积的细菌悬液中所含的细菌中提取DNA，求得DNA含量，再计算出这一定体积的细菌悬液所含的细菌总数。