㈠ 核酸含量测定的方法和原理都有哪些
① 光吸收法：核酸中碱基共轭结构在近紫外光波长260nm处有最大吸收，吸收强度与核酸浓度成正比,因此可以用于核酸定量。
② 定P法：核酸中P含量约为9.5%，因此可以通过测定样品中的有机P量来进行核酸定量。
③ 核糖含量测定法：包括RNA的地衣酚法及DNA的二苯胺法。
④ 定量PCR法：定量PCR技术是指以外参或内参为标准，通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测，进行PCR起始模板量的定量。
⑤ 核酸杂交半定量法：通过探针与核酸在膜上杂交显色，与标准品显色进行比较从而进行半定量。
㈡ 简述定量PCR的原理和过程
半定量反转录－聚合酶链反应（semi-,sqrt-pcr）是近年来常用的一种简捷、特异的定量rna测定方法，通过mrna反转录成cdna，再进行pcr扩增，并测定pcr产物的数量，可以推测样品中特异mrna的相对数量。以半定量rt-pcr为基础建立起来的mrna含量测定技术，较含内标化的rt-pcr定量测定的mrna的方法更为简便可行。这种方法不另设‘内标准',排除了俩对不同引物之间的相互抑制和灵敏读差异，而且具有明显的剂量－效益关系和良好的重复性。步骤：1.抽提rna，2.反转录获得cdna，3.以cdna为模板做pcr注意：步骤1，rna抽提质量一定要好，注意污染。内参的选择，常用的有βactin和gapdh俩中。步骤3，半定量rt-pcr应该再两管中进行，既内参和目的基因各一管，这样便于控制，做图的时候可以放在一各泳道里跑！指数期和平台期一定要摸清楚！㈢ PCR实验是如何实现定性和定量的其定性和定量的详细原理是什么如何区别
定性应该较容易理解，大体是有或无，强和弱，要达到目的做常规PCR，通过产物条带很容易看出。
定量现在一般分为半定量PCR和real-time PCR（实时定量PCR）两种。半定量做法就是通过常规PCR，跑胶得到产物条带，然后通过软件对条带进行分析，将条带的强弱进行量化。real-time PCR定量更准确，它需要特定的仪器与试剂。原理是在PCR进行延伸的过程中其产物加上特定的荧光标记，然后通过机器读出荧光的强度来反应检测的样本中c-DNA的丰度。