‘壹’ 比色法和紫外法测定总黄酮的原理有何不同
比色法和紫外法测定总黄酮的原理不同点是：
1、比色法是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法，而紫外光谱法是测定物质分子在紫外光区吸收光谱的分析方法；
2、比色法要求反应的物质应具有较高的灵敏度和选择性，而紫外光谱法没有要求；
3、比色法以朗伯-比尔定律(A=εbc)为基础，而紫外光谱法以紫外光为基础。以上是比色法和紫外法测定总黄酮的原理不同点。
‘贰’ 柳兰中黄酮化合物的测定的原理
黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物。黄酮类测定采用三氯化铝比色法测定。原理：三氯化铝与黄酮类化合物作用后生成黄酮的铝络合物，显黄色，其黄色深浅与黄酮量成正比，可定量检测出黄酮类含量。采用三氯化铝比色法测定。原理：三氯化铝与黄酮类化合物作用后生成黄酮的铝络合物，显黄色，其黄色深浅与黄酮量成正比，可定量检测出黄酮类含量。
‘叁’ 怎样准确建立总黄酮的检测方法
本人最近提取植物总黄酮，其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》，以芦丁作标样建立标准曲线： 精密称取芦丁25mg ，加甲醇定容至25 ml ，取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml，加含5 % NaNO2 水溶液1ml ，摇匀静置6 min ，再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ，摇匀静置6 min，再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ，用蒸馏水稀释定容至刻度，摇匀静置16 min，在480～540 nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长在508 nm处，得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
‘肆’ 黄酮类化合物的含量测定方法哪些
黄酮类化合物的含量测定方法哪些
黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
盐酸-镁粉还原反应
取药材粉末少许与试管中，用乙醇或甲醇数毫升温浸提取，取提取液加镁粉少许振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内即出现颜色。大多黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类显红-紫红色，黄酮类显橙色，异黄酮及查尔酮类无变化。如芦丁的盐酸镁粉反应中溶液由黄色变红色。
其他还原反应还有：盐酸-锌粉反应，黄酮、黄酮醇类常不显色，只有二氢黄酮醇类可被锌粉还原呈深红色；钠-汞齐反应，黄酮类成分可产生黄、橙、红等色；四氢硼钠（钾）反应，仅二氢黄酮醇类可被四氢硼钠还原呈红色，其他黄酮类不反应。
金属盐类试剂络合反应
黄酮类成分和铝盐、镁盐、铅盐、锆盐等试剂反应，生成有色的络合物，可供某些类型黄酮的鉴别。产生络合作用的条件是黄酮类成分必须具备下列条件之一，如5-羟基、3-羟基或邻二羟基。根据有色络合物的最大吸收波长，可进行定量测定。常用的试剂有三氯化铝、醋酸铅、醋酸镁与二氯氧化锆等试剂。
‘伍’ 如何利用黄酮类的特征鉴别反应，检查生药中是否存在黄酮类化合物
⒈盐酸-镁粉（或锌粉）反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，反应机理认为是因为生成了阳碳离子缘故。
⒉四氢硼钠（NaBH4）是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，产生红～紫色。而与其它黄酮类化合物均不显色。
⒊黄酮类化合分子中常含有下列结构单元，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有色络合物。与1%三氯化铝或硝酸铝溶液反应，生成的络合物多为黄色（λmax=415nm），并有荧光，可用于定性及定量分析。
‘陆’ 测定总黄酮时，用硝酸铝和氯化铝有什么区别
没有区别，主要是铝离子与黄酮类化合物反应产生络合物，在碱性条件下显色
‘柒’ 蜂胶中黄酮类化合物如何定性检测
镁粉-盐酸检测法：取蜂胶液1毫升，加盐酸数滴及镁粉少许，呈现红色反应；碱性检测法：取蜂胶液滴于滤纸上，置氨水熏蒸1分钟，立即在荧光灯下观察，显黄色、棕黄色荧光。
‘捌’ 总黄酮与单体黄酮的测定方法有什么不同
总黄酮采用芦丁为标准品即可测定，单体黄酮需要对应的标准品。
黄酮含量的测定方法：
1、 对照法
1）
① 对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。
② 样品溶液制备
精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。
③ 标准曲线的制备
精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。
2）
①样品溶液的制备：
分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。
③标准曲线的制定：
精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。
④含量测定结果：
分别吸取2.2.1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。
计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。
注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。
‘玖’ 测定总黄酮含量方法
一 样品溶液的制备
70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下回流2h。 取10g样品放入圆底烧
瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先
离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。
二 芦丁标准品的配置
精密称取芦丁2mg，加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦
丁标准品溶液。
三 显色方法的确定
1 扫描原液 分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml，加无水乙醇定容至 25ml，空白对照，全波扫描。
2 硝酸铝显色法 分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加5%亚硝酸钠 溶液（1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml， 摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加无水乙醇定容至25ml，摇匀，放置15min， 空白对照，全波扫描 bb 。
3 氯化铝显色法 分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化铝溶液（1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，摇匀放置10min，空白对照，全波扫描。
4 氢氧化钾显色法 分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加3ml10%氢氧化钾溶液（2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中），充分摇匀显色5min后，用无水乙醇定容至25ml, 摇匀，空白对照，全波扫描。
四 显色条件的确定
五 标准曲线的绘制
分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液，按所选的显色方法测定
吸光度，绘制标准曲线。
‘拾’ 用芦丁测黄酮含量的方法
称取0.010g芦丁，用30%乙醇溶解并定容至100ml 的容量瓶中，制成0.1mg/ml的芦丁标准溶液。
分别吸取刚配制好的芦丁标液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml置于6个50ml的容量瓶中，依次编号0~5，用30%乙醇补至10ml后，加入0.8ml的5%的NaNO2摇匀，静置6分钟再加入0.8ml的10%的硝酸铝摇匀，静置6min，加入10ml的1mol/l的氢氧化钠，摇匀15min后显色置于510nm处分光光度计测吸光度。
芦丁就是个标准 黄酮就是以芦丁为计量的.
测黄酮的吸光度，标准曲线上，读出黄酮含量就是芦丁含量。