① 瘦肉精检测问题
目前,检测瘦肉精的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。而我国结合自己的实际情况,2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为 0.05μg/kg,优点是检测精确度高,而且假阳性率低;缺点是检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC-MS法的缺点同HPLC相似。 (1)试剂和材料 以下所有试剂,除特别注明外,均为分析纯试剂;水为符合GB/T6682规定的二级水。 ①盐酸克伦特罗对照品:含盐酸克伦特罗不得少于98.5% ②盐酸 ③无水甲醇 ④氢氧化钠 ⑤磷酸二氢钾 ⑥磷酸 ⑦盐酸溶液 取盐酸4.2ml,加水至1000ml,即得。 ⑧o.5mol/L磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾68g,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.O,用水稀释至1000ml,即得。 ⑨0.05mol几磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾6.88,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.0,用水稀释至1000mi,即得。 a.氢氧化钠溶液 取氢氧化钠48,加水使溶解成100mi,即得。 b.盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg/mi) 准确称取28.3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。 ⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi储备液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑿盐酸克伦特罗检测试剂盒(2~8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17% (2)仪器和设备 ①酶联免疫反应读数仪 ②分析天平 精度0.00001g ③天平 精度0.01g ④冷冻离心机 ⑤50mi具塞离心管 ⑥匀浆机 ⑦微型振荡器 ⑧回旋振荡器 ⑨微量移液器 单道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL, ⑩干热浓缩器 ①空气压缩机 (3)测定步骤 ①试料的制备(尿) 取供试尿lml,于3000r/min离心l0min,上清液作为供试试料,直接供酶联免疫测定法测定。 取空白尿lml,于3000r/min离心l0min,上清液作为空白试料,直接供酶联免疫测定法测定。 取空白尿2ml,于3000r/min离心l0min,上清液1.0ml添加l00ug/L的克伦特罗对照溶液20/H。作为2ug/l空白添加试料,直接供酶联免疫测定法测定。 ②试料的制备(肝) 取约l00g新鲜或冷冻后融化的空白或供试猪肝,用匀浆机以10000r/rain匀浆1-2min,使均匀呈糊状,一20~C以下冰箱中贮存备用。 取均浆后的供试肝样,作为供试试料。 取均浆后的空白肝样,作为空白试料。 取均浆后的空白肝样(1土0.05)e添加l00ng/m1的克伦特罗对照溶液20tzL作为2ng/g空白添加试料。 a:提取(肝) 取(1士o.05)z试料,置50ml离心管中;加盐酸溶液5.0mi,旋涡混匀,中速振荡1.5h;在10-15~C下以4000r/mill以上速度离心15min;上清液移人另一50ml离心管中,加入氢氧化钠溶液300gL,混匀,振荡15min;加0.5mol/l磷酸二氢钾溶液4。0ml,混匀,2-8~C放置过夜;取上述溶液于10~15~C以4000r/111113以上的速度离心15min,上清液备用。 b.净化(肝) C,,固相萃取柱依次用无水甲醇3mi、0.05mol/L磷酸二氢钾溶液2mi预洗,不使柱床干涸;将备用上清液全部过柱;用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液2ml淋洗,挤干,弃去所有淋洗液;用无水甲醇2mi洗脱,流速控制在0.5ml/mm以下,挤干,收集洗脱液;于50~60~C下用氮气或空气缓缓吹干洗脱液;残余物用水1.0ml溶解,以4000r/mill以上的速度离心15rain,清液作为试样溶液供酶联免疫测定法测定。 ③测定 a.室温应控制在19~30~C。 b.取在19-30~C放置1-2h的试剂盒,按每个标准溶液和试样溶液至少两孔计算所需酶联板条的数量,插入框架。每个微孔加入用缓冲溶液100倍稀释的抗体100~tL,封口膜封板,室温孵育30min。 c倒出孔内液体,将酶联板倒置在吸水纸上拍打,使孔内没有残余液体。用多道移液器加水250pL到酶联板的微?L内,稍后倒出孔内液体,再将酶联板倒置在吸水纸上拍打,如此重复操作洗板3次。 d.分别吸取标准溶液、空白试料、空白添加试料和供试试料各20uL,分别放入不同微孔底中央,并在每孔内加入用缓冲溶液100倍稀释的酶结合物100~I。,在微型振荡器上混匀,用封口膜封好,室温孵育30min。 e.倒出孔内液体,将酶联板倒置在吸水纸上拍打,使孔内没有残余液体,重复洗板3次。 f.用多道移液器加入用底物缓冲溶液10倍稀释的底物100uL,室温避光孵育15min。 g.用多道移液器每孔加终止液100uL。 h.在1h内将酶联板放于酶标仪内,于450nm波长处测定吸光度值。 (4)计算 用数据分析软件对结果进行分析,绘出标准曲线,并得出试料中克伦特罗的含量。 (5)灵敏度和回收率 本方法的平均检测下限为0.1mg/Kg。 本方法在1ug/kg添加浓度水平上猪尿回收率范围为60%一120%,猪肝回收率范围为40%~120%。参考资料/ http://www.zgny17.com
② 含瘦肉精的肉怎么判定
含瘦肉精的肉 从感官上是无法辨认的,和正常肉没有区别
需要专门的检测才能判定
目前检测方法有三种:胶体金卡(检测卡)法。酶标仪法、质谱联动法
检测卡适应于尿样,目前厂家较多,质量不一,有的根本起不到作用。
要想保证产品没有问题,最好买大企业的,小厂家的连检验能力都没有,不可能检测
大企业为保证信誉,不敢不检测,尤其是像双汇这样的企业,现在头头检测,恐怕再出问题
③ 怎样辨别瘦肉精
1、看猪肉皮下脂肪层的厚度。在选购猪肉时皮下脂肪太薄、太松软的猪肉不要买。一般情况下,瘦肉精猪因吃药生长,其皮下脂肪层明显较薄,通常不足1厘米;正常猪在皮层和瘦肉之间会有一层脂肪,肥膘约为1cm—2cm,太少就要小心了。
2、看猪肉的颜色。一般情况下,含有瘦肉精的猪肉特别鲜红、光亮。因此,瘦肉部分太红的,肉质可能不正常。
3、另外,还可以将猪肉切成二三指宽,如果猪肉比较软,不能立于案上,可能含有瘦肉精。
4、如果肥肉与瘦肉有明显分离,而且瘦肉与脂肪间有黄色液体流出则可能含有瘦肉精。
④ 瘦肉精的危害与检测方法有哪些
瘦肉精的危害有:苯乙醇胺A对人体的危害较大。人食用了含这种瘦肉精的猪肉后,会出现恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状,特别是对心脏病、高血压患者危害更大。长期食用则有可能导致染色体畸变,会诱发恶性肿瘤.
瘦肉精的检测方法:
看: 猪肉时皮下脂肪太薄、太松软的猪肉不要买;
颜色:含有苯乙醇胺A的猪肉特别鲜红、光亮。健康瘦肉是淡红色。
松软程度:将猪肉切成二三指宽,如果猪肉比较软,不能立于案上,可能含有苯乙醇胺A。
肥肉与瘦肉有明显分离,而且瘦肉与脂肪间有黄色液体流出则可能含有苯乙醇胺A。而一般健康的猪瘦肉是淡红色,肉质弹性好,肉上没有出汗现象。
食品安全黑名单 手机软件可以扫描条形码立马识别是否合格。
⑤ 如何检测"瘦肉精"猪肉
可以用瘦肉精检测仪,瘦肉精检测仪HED-SSJ 可现场快速检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。仪器预留其他项目检测程序和端口,根据日后需求可方便的自主增加检测项目。日后可升级为检测抗生素、兽药残留、动物疫病、病害肉、的综合类型仪器。
⑥ 瘦肉精检测方法有哪几种
(1)胶体金快速检测法将待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,待检物与金标试剂的结合物又与试纸条发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果,从而实现特异性免疫诊断。测试卡分析快速,仅需3~5分钟,无需专业人员操作,无需借助仪器,可以凭肉眼观察到结果,定性检测,测试卡可常温保存。
(2)酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其原理是利用抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方法将辣根过氧化物酶(HRP)与克仑特罗(CL)结合,形成酶偶联克仑特罗。将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克仑特罗抗体结合,然后加入待测克仑特罗和酶偶联克仑特罗,它们竞争性与克仑特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变化计量待测克仑特罗含量。若待测克仑特罗多,则被结合的酶偶联克仑特罗少,有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克仑特罗含量,比色法的最佳波长为450纳米。
⑦ 如何检查瘦肉精
检测方法
GB/T
5009.192-2003
动物性食品中克伦特罗残留量的
瘦肉精
测定
气相色谱-质谱法(GC-MS)
GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来,能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析,而且具更高的检测极限。Fente
C.
A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留,最低检测限为5ng/g[6];Pteer
Batioens应用气相色谱-串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织中的CLB含量进行检测,最低检测限为2ng/g[7];刘琪等用GC-MS法(EI离子源)检测猪尿中的CLB,检测限为0.5ng/mL;VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测尿提取物中的CLB,衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描,会产生更高的灵敏度。另外,GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低。因此,我国将GC-MS法定为检测CL
B的确证性方法(NY/T468~2001)。
高效液相色谱法(HPLC)
HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物,而且,HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用,容易实现分析过程的自动化。黄士新等(1995)应用紫外检测器,在λ=243nm,色谱柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,柱温:室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB残留,最低检测限可达2ng/g[4]。国外有人应用HPLC
(二极管阵列检测器)测定动物性食品中CLB残留,测得最低检测限为1.26ng/g,回收率达98.9%[5]。目前,我国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证性方法,最低检测限范围为1~15ng/g,其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高,而且假阳性率低;缺点是样品处理时间长,检测过程烦琐、难于操作,需贵重仪器,在实际应用中受到一定的限制。
酶联免疫吸附法(ELISA
)
利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方法将植物辣根过氧化物酶(HRP)与克伦特罗(CL)结合,形成酶偶联克伦特罗。将固相载体上已包被的抗体(羊抗兔IgG抗体)与特异性的抗克伦特罗抗体结合,然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗,它们竞争性与克伦特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多,则被结合的酶偶联克伦特罗少,有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量,比色的最佳波长为450
nm,参比波长应大于600
nm。
液相色谱-质谱/质谱法(HPLC-MS/MS)
参见SN/T
1924-2007
进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法。
本标准适用于动物源性食品肌肉和内脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测。
试样中的药物残留采用pH5.2的乙酸铵缓冲液提取,同时加入β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶进行酶解后,提取液经C18和SCX双SPE柱净化,液相色谱-质谱进行测定,内标法定量。
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⑧ 总听说肉为了瘦肉多都会添加瘦肉精,有什么好的鉴别瘦肉精的方法吗
对于肉类中的瘦肉精,首要判断方法也是感官鉴别。
1. 一般含瘦肉精的猪肉肉色异常鲜艳,且皮下脂肪层明显较薄,通常不足1厘米,瘦肉与脂肪间有黄色液体流出,正常的猪肉不具有这些特征。
2. 如果手上有PH试纸,可以使用试纸蘸取肉上的液体,正常新鲜肉即使经过多时,仍多呈中性和弱碱性,而含有“瘦肉精”的肉则偏酸性,pH值明显小于正常范围。
3.如果以上方法都无法确认,或是购买的肉加工制品无法使用上述方法鉴别,可以通过快速检测方法来进行进一步确认现在的快速检测方法操作方便,结果准确,测定时间短,使您免受"毒肉"困扰。
⑨ 现在瘦肉精的检测方法有哪些
(1)胶体金快速检测法将待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,待检物与金标试剂的结合物又与试纸条发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果,从而实现特异性免疫诊断。测试卡分析快速,仅需3~5分钟,无需专业人员操作,无需借助仪器,可以凭肉眼观察到结果,定性检测,测试卡可常温保存。
(2)酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其原理是利用抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方法将辣根过氧化物酶(HRP)与克仑特罗(CL)结合,形成酶偶联克仑特罗。将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克仑特罗抗体结合,然后加入待测克仑特罗和酶偶联克仑特罗,它们竞争性与克仑特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变化计量待测克仑特罗含量。若待测克仑特罗多,则被结合的酶偶联克仑特罗少,有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克仑特罗含量,比色法的最佳波长为450纳米。