氯霉素检测方法

㈠ 氯霉素检测的主要方法

氯霉素检测方法包括微生物法、色谱法、免疫测定法。微生物法易操作，费用低，但灵敏度低，特异性差。色谱法精确可靠、灵敏度高，检测极限可达到0. 1μgPkg ，但前处理步骤多，回收率偏低 。免疫测定具有灵敏度高、特异性强、对仪器设备和人员素质要求低以及样品前处理简单等优点，适于现场监控和大规模样品筛选。

㈡ 氯霉素检测的反应原理

ELISA法：
氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。在整个反应当中，如果样品中的氯霉素残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。

㈢ 氯霉素定量及定性检测的方法有哪些

氯霉素残留检测的主 要方法。阐述了微生物法检测氯霉素的优缺点,比较了免疫学方法中放射免疫法(RIA)和酶标免疫法(EIA),指出了免疫学方法适合于大规模推广使用为一 种快速筛选方法,可以采用该方法进行样品筛选;对色谱学方法中液相色谱(LC)法、气相色谱(GC)法、液质联用(LC/MS)法和气质联用(GC /MS)法的研究做了综合、比较,指出了它们各自的优缺点,并认为色谱学方法中气质联用(GC/MS)法和液质联用法可同时定量和定性,灵敏度高、检测限 低,将是今后氯霉素残留最主要的检测方法。

㈣ 今天做水产的氯霉素测定，老师在实验前进行了“加标”和“内标”，内标是氯霉素标准溶液

最快是用试剂盒方法，但是是半定量。
然后就是用LCMSMS检测方法，速度也快而且灵敏度高。
称取5克样左右+15ml水样+内标，混匀+甲醇至30ml，混匀，离心+2g氯化钠+20ml乙酸乙酯，涡旋，离心然后取乙酸乙酯层，过无水硫酸钠柱（吸水）然后氮吹。用流动相定容，过膜上级。
（因为蜂蜜基质比较干净，完全不需要过柱净化）

㈤ 氯霉素检测的注意事项

1、使用前先将氯霉素标准溶液6瓶，浓缩萃取稀释液，浓缩洗涤液，酶标记物，底物溶液及微量测试孔条置于室温下，回温30分钟。
2、原倍萃取稀释液及洗涤液配制
用蒸馏水将10倍浓缩萃取稀释液及浓缩洗涤液分别以1： 9的比例稀释(即1mL浓缩液+9mL蒸馏水)，即可作为样品萃取稀释液与微孔板清洗液。
3、回温后，取出所需微量测试孔条，将剩余板条立即放回铝箔袋中用胶带封好，置于40℃保存。 针对以下抗生素进行交叉反应之测试，结果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1% 生乳(添加1.0ppb)104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb)90~110%
虾及鱼肉(添加0.5ppb)95~110%
鸡肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb)100~120%
内脏(添加1.0ppb) 100~120%
饲料(添加2.0ppb)80~110%

㈥ 怎样检测氯霉素

（组织）氯霉素(CAP)j胶体金快速检测卡用于快速检测水产品（鱼虾蟹等）、畜禽肉及水体沉积物中的氯霉素残留，整个检测过程只需要30分钟左右，本试纸条为定性检测，检测卡灵敏度为0.2ppb。

（水体）氯霉素(CAP)j胶体金快速检测卡用于快速检测水体中的氯霉素残留，整个检测过程只需要10分钟左右，本试纸条为定性检测，灵敏度为0.3ppb。

检测原理：

氯霉素检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样品中的氯霉素在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线（T）上氯霉素－蛋白偶联物的结合。如果样品中氯霉素含量大于0.2ppb，检测线（T）线显色比C线浅，结果为阳性；反之，检测线（T）显色比质控线（C）深或者一样深，结果为阴性。

结果判定：

1、 阴性（-）：检测线（T）显色比质控线（C）深或者一样深，表示样品中氯霉素浓度低于检测限或者不含氯霉素。

2、 阳性（+）：检测线（T）线显色比C线浅，或者检测线（T）不显色，表示样品中氯霉素残留浓度大于检测限。

3、 无效：质控线（C）不显色；可能是操作不当或者检测卡失效。用新的检测卡重新检测。

㈦ 氯霉素检测的具体实行

a) 将3克已均质的样品放入15mL离心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震荡5分钟。
b) 用离心机离心1700×g10分钟，取2mL上层液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮气将有机溶剂吹干。
c) 在此玻璃管中加入正己烷1mL，先将残余物完全溶解后，再加入1mL样品稀释液，震荡30秒钟。
d) 用离心机离心1700×g 10分钟，利用吸管吸去包含中问乳化层部分的上层液(正己烷)，再吸取下层液(水层)备用。
稀释倍数:1
若待测物为白虾可按以下流程将样品做8倍浓缩以增加检品敏感度
a) 将6克已均质的样品放入15mL离心管中，再加入6mL乙酸乙酯，震荡5分钟。
b) 用离心机离心1700×g 10分钟，取4mL上层液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中，于50℃下，利用氮气将有机溶剂吹干。
c) 在此玻璃管中加入正己烷2mL，先将残余物完全溶解后，再加入0.5mL样品稀释液，震荡30秒钟。
d) 用离心机离心1700×g 10分钟，利用吸管吸去包含中问乳化层部分的上层液(正己烷)，再吸取下层液(水层)备用。
稀释倍数:0.125 1、于适当微孔中分别加入100mL标准溶液(0，0.05，0.15，0.45，1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前处理的样品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶标记物。
4、轻敲盘子四周，使其充分混合后于室温下避光静置温育1小时。
5、将微孔中的反应液甩掉，再将洗液加满每一微孔后甩掉，重复洗3次。
6、最后一次甩掉后，在吸水纸上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，轻敲盘子四周，使其充分混合。
8、于室温下避光静置温育20分钟。
9、于每一微孔中加入100mL反应终止液。
10、用酶标仪于波长450nm下判读。

㈧ 氯霉素的检测方法有哪些啊

液相色谱（LC）法
气相色谱（GC）法
液—质联用（LC/MS)
气—质联用（GC/MS)法

㈨ 蜂蜜中氯霉素药物的残留如何快速检测，用哪个品牌的比较好

可以用美正生物的氯霉素快速检测试纸条，本产品用于快速检测蜂蜜中氯霉素药物的残留，适用于各类企业、检测机构、监督部门的现场快速检测。
检测步骤
【样品处理】
1. 称取3.0±0.03g样本至50mL聚苯乙烯离心管中，加入3mL去离子水振荡5分钟，使其充分溶解；
2. 加入6mL乙酸乙酯振荡30秒～1分钟；
3. 室温4000r/min 离心5分钟（如离心后出现乳化现象，可手动摇晃后继续离心5分钟或置于热水中待溶解后再次离 心）；
4. 移取4mL上层有机相至离心管中（离心管可根据氮吹仪 型号选择不同规格），于50～60℃氮气流下吹干； 5. 加入800μL氯霉素样本稀释液，充分振荡后，取200 μL进行分析。
【检测步骤】
1. 使用前将试纸条、微孔试剂、样本稀释液和待检样本恢复 至室温（20～25℃）；一次检测样本数量不要超过8个； 如果一次检测样本数量超过8个，请按照8个一组，分批检测。
2. 取所需数量的微孔和试纸条，并做好标记，将微孔置于40℃干式加热器上。
3. 用移液器取200μL振荡混匀的待检样本加入微孔并反复 吸打直至红色固体充分混匀进行孵育，计时3分钟。
4. 将试纸条立即插入微孔中进行反应，计时5分钟。
5. 取出试纸条去除下端样品垫并在1分钟内根据图示进行 判读或者配合仪器判读。
注意事项
1. 不同批次试纸条、微孔、二维码均不能混用。
2. 枪头与离心管等耗材不可混用，以免交叉污染。
3. 产品为一次性消耗品，请在有效期内使用。
4. 请勿触摸试纸条中央白色膜区，检测时避免阳光直射和风 直吹，如不小心接触后请遗弃。
5. 微孔打开时不要用力过猛，以免有粉末飞出。已开封的产 品请按照要求密封储存，并尽快使用，以免影响检测结果。
6. 请勿用自来水、纯水及蒸馏水等做阴性对照。
7. 遇到样本检测结果呈阳性，建议重复测试一次。
8. 试纸条检测线出现明显断点，会影响检测结果，建议重复测试一次。
9. 反应后，务必立即去掉试纸条下端的样品垫，并在1分钟内判读结果，因为试纸条干燥后颜色深度会有变化，影响最后的结果。
10. 试剂从试剂桶取出后，请立即盖好试剂桶盖。如果一次用不完8个微孔，需将剩余微孔立即放回到装有干燥剂的试 剂桶中密封保存。
11. 本产品检测结果仅供参考，如需确证，请参照国家相关标准方法。

㈩ 水产品中的氯霉素残留用什么方法检测比较好

氯霉素主要液质联用和气质联用的方法 一般用液质方法好点 气质方法需要衍生化，衍生化的方法对定量都有一定的风险。
GB/T 20756-2006 可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
SN/T 1864-2007 进出口动物源食品中氯霉素残留量的检测方法 液相色谱-串联质谱法
农业部781号公告-2-2006 动物源食品中氯霉素残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法

如果你实在要用气质联用方法
农业部781号公告-1-2006 动物源食品中氯霉素残留量的测定 气相色谱-质谱法
农业部958号公告-14-2007 水产品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素残留量的测定 气相色谱-质谱法
SC/T 3018-2004 水产品中氯霉素残留量的测定 气相色谱法

当然还有酶联免疫 半定量的方法
DB34/T 821-2008 动物组织中氯霉素的残留测定——酶联免疫吸附法
SN/T 1604-2005 进出口动物源性食品中氯霉素残留量的检验方法 酶联免疫法
农业部1025号公告-26-2008 动物源食品中氯霉素残留检测 酶联免疫吸附法

我们一般都是用液质联用的检测方法 检出限比较低 而且定量结果比较稳定可靠。