DNA检测技术有很多,主要分为定性和定量方法。 给你举几个: 1,分子杂交技术,(包括southern杂交,northern杂交,基因芯片等) 分子杂交分析的基本原理是基于DNA探针检测变性而且固定在硝酸纤维素膜上的宿主细胞DNA。
B. HBV-DNA检测方法有哪些
斑点杂交法是传统的老方法,检测成本低,但是检测的灵敏度不高,而且准确度也不高,只能定性检测乙肝病毒DNA,不能定量;PCR法是基因检测中使用最多的方法我国是一个肝炎大国,其中乙肝病毒携带者都占四川人口的十分之一,政府为了改变现状,下决心大力宣传普及乙肝知识,卓有成效,以前的许多乙肝盲现在也知道HBV-DNA了,但是还有许多人可能了解不够全面,今天肝病专家就开展一次知识普及课堂,专门说明,希望广大朋友能对此有一个全面的认识。?目前我们常用的只有两种方法,一种是斑点杂交法,还有一种是PCR法。我们下面对这两种方法进行详细的说明。推荐阅读:乙肝病毒DNA的正常值是多少一、斑点杂交法此方法是传统的老方法,检测成本低,但是检测的灵敏度不高,而且准确度也不高,只能定性检测乙肝病毒DNA,不能定量。也就是说只能检测患者体内的乙肝病毒DNA是阴性还是阳性,而不能检测出机体内乙肝病毒的数量。推荐阅读:什么是乙肝病毒定量检查二、PCR法PCR法是基因检测中使用最多的方法,是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促反应。此方法可以在短时间内将待测基因扩增到上百万倍,这样可以大大提高基因诊断的准确度,保证此检查方法的灵敏度。分为三步,第一是对待测的基因进行PCR,然后电泳此结果,接下来就是对此结果进行分析。
C. DNA含量的测定方法
那要看你用什么方法测定DNA和RNA:
(1)紫外吸收法也就是测量OD(260)和OD(280)的吸收值,这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点,因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收。
(2)荧光法,用PicoGreen荧光染料,测定DNA,RNA浓度比较灵敏,并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA,并且受其它杂质的影响不大,缺点要有专门的荧光检测仪器,试剂比较昂贵。
纯化DNA可以买试剂盒,主要有膜吸附法,磁珠分离法,都很方便。
D. 怎样鉴定dna 到底是怎么做的
DNA亲子鉴定流程:
1、DNA提取
把样本细胞核中所含有DNA提取出来,然后进行一定的纯化,化除样本中的杂质。
2、PCR扩增
PCR的中文名为聚合酶链式反应,简单的说,PCR扩增这一步就是把我们所需要的片段通过酶促反应,在PCR仪上进行大量复制,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度。
3、后PCR反应
这一步主要是上ABI测序仪检测的准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的的内标,主要是用来标记检测的片段长度。
4、毛细管测序仪检测
由于DNA带有电荷,通过毛细管电泳的方法,不同片段DNA长度的电泳速度不同,在同样的电压,同样的电泳时间下,泳动的距离不同,这些长短不同距离可以通过前期加入的内标测量分辨出来,同时可通过一定的软件显示在电脑上,方便检测人员处理和分析数据。
5、分析数据,出具报告
主要是检测人员将所得结果进行分析汇总、计算,然后出鉴定结论和报告。
(4)dna检测定性方法扩展阅读:
做移民亲子鉴定所需手续:
1、被鉴定者在申请做移民亲子鉴定时,需提供能够证明本人身份的证件(如身份证、户口薄、出生证等,只需要提供一种即可);
2、部份国家签证时需要公证处委托,如有要求,请公证处提供委托书鉴定书;
移民亲子鉴定流程:
1,被鉴定者签订司法鉴定委托书,在鉴定中心采集样本,如无法亲自到鉴定中心现场,也可自行采集样本进行邮寄。
2,采集到的样本会被送入实验室进行DNA检测,被鉴定者等待鉴定报告即可。
3,鉴定中心一般会在5个工作日出具鉴定报告。
建议被鉴定者在做移民亲子鉴定时,事先与鉴定中心客服工作人员进行沟通,客服工作人员会在第一时间以专业的知识帮助被鉴定者在鉴定过程所遇到的疑惑和难题。
E. DNA亲子鉴定的操作步骤是怎样的
鉴定步骤
DNA亲子鉴定实验操作步骤如下:
第一步:DNA提取
把样本细胞核中所含有DNA提取出来,然后进行一定的纯化,化除样本中的杂质。
第二步:PCR扩增
PCR的中文名为聚合酶链式反应,简单的说,PCR扩增这一步就是把我们所需要的片段通过酶促反应,在PCR仪上进行大量复制,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度。
第三步:后PCR反应
这一步主要是上ABI测序仪检测的准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的的内标,主要是用来标记检测的片段长度。
第四步:毛细管测序仪检测
由于DNA带有电荷,通过毛细管电泳的方法,不同片段DNA长度的电泳速度不同,在同样的电压,同样的电泳时间下,泳动的距离不同,这些长短不同距离可以通过前期加入的内标测量分辨出来,同时可通过一定的软件显示在电脑上,方便检测人员处理和分析数据。
第五步:分析数据,出具报告
主要是检测人员将所得结果进行分析汇总、计算,然后出鉴定结论和报告。
F. 鉴定dna的方法
第一步,DNA的提取就是把样本的细胞核中所含的DNA提取出来,然后进行一定的纯化;第二步,就是PCR扩增,简单的说,这一步,就是把我们需要的片段,通过酶促反应在PCR仪上进行大量复制,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度;第三步,就是后PCR反应,这一步主要就是上ABI测序仪检测准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的内标,主要是用来标记检测的片段长度;第四步,就是毛细管测序仪检测。由于DNA是带有电荷的,通过毛细管电泳的方法就可以检测处理一些数据;第五步,就是分析数据,出具报告;最后,出鉴定结论和报告。
G. DNA检测的方法都有哪些
DNA检测
技术有很多,主要分为定性和定量方法。给你举几个:1,分子杂交技术,(包括southern杂交,northern杂交,基因芯片等)分子杂交分析的基本原理是基于DNA探针检测变性而且固定在硝酸纤维素膜上的宿主细胞DNA。这些探针可以不依赖宿主细胞DNA来制备,例如用随机引物制备探针。探针上标记酶﹑生物素﹑放射性同位素﹑地高辛(Dig)等。由于地高辛标记核酸探针,操作方便、灵敏度高,已标记的探针在4℃贮存可达两年之久,方便随时应用,所以现在常采用地高辛标记核酸探针,用光标记法将光敏Dig标记到探针上,制成光敏-Dig-核酸探针,再与固定在硝酸膜上的靶核酸进行靶DNA分子杂交,使之与抗Dig-碱性磷酸酶结合,最后可用不同的检测方式进行检测,
发光检测
和显色检测均可,灵敏度可达10pg以下2,基于DNA结合蛋白的方法Threshold®
Immunoassay分析系统是基于两种DNA序列非特异性蛋白,单链DNA(ssDNA)结合蛋白(SSB)和抗ssDNA
的单抗。检测的基本过程是当生物素—DNA单链结合蛋白和尿素酶—抗ssDNA
的单抗与变性的宿主细胞DNA结合最终形成复合物,通过亲合素将此复合物连接到生物素—硝酸纤维素膜,在通过洗涤所有非特异性的被洗脱掉,最后放于有
尿素溶液
的读数仪,尿素酶催化尿素分解成NH3和CO2
导致PH值发生变化,读数仪根据PH值的变化换算成DNA的量,从而达到检测残余DNA含量的目的。3,PCR法,其中以实时定量PCR法最为突出荧光定量
PCR是基于PCR扩增时,在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,产物的增加可以通过荧光信号指示,通过实时监控PCR体系中的荧光信号,对样本中初始模板进行定量分析。定量PCR可实时检测产物量,通过加入已知浓度的
标准样品
绘制标准曲线,然后根据待测样品在标准曲线中的位置推算初始模板的浓度,从而达到检测残余DNA含量的目的。此外,对DNA的定量技术也有很多,可以看下这篇文章《核酸定量技术及其在生物检测中的应用》
H. 如何对目的基因进行检测与鉴定
可以从三方面对目的基因进行鉴定:
1、直接测定:按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。
2、mRNA测定:根据目的基因组得出其转录的mRNA组成,利用探针检测。
3、蛋白测定:可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白,也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。
(8)dna检测定性方法扩展阅读:
对目的基因进行鉴定和检测的多种方法:
基因鉴定技术是一项生物学检测技术,人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA,每个人的DNA都不完全相同,人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多,因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异,由此可以识别不同的人。
所谓“DNA指纹”,就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质,因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。
基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交,这种分子杂交是在缓冲液中进行的,由于DNA分子杂交时,两个分子相遇的机会不是很大,所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子。
而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段,所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的,而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。
网络-对目的基因进行检测与鉴定
I. dna亲子鉴定的鉴定步骤
DNA亲子鉴定步骤如下:
第一步:DNA提取
把样本细胞核中所含有DNA提取出来,然后进行一定的纯化,化除样本中的杂质。
第二步:PCR扩增
PCR的中文名为聚合酶链式反应,简单的说,PCR扩增这一步就是把我们所需要的片段通过酶促反应,在PCR仪上进行大量复制,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度。
第三步:后PCR反应
这一步主要是上测序仪检测的准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的的内标,主要是用来标记检测的片段长度。
第四步:毛细管测序仪检测
由于DNA带有电荷,通过毛细管电泳的方法,不同片段DNA长度的电泳速度不同,在同样的电压,同样的电泳时间下,泳动的距离不同,这些长短不同距离可以通过前期加入的内标测量分辨出来,同时可通过一定的软件显示在电脑上,方便检测人员处理和分析数据。
第五步:分析数据,出具报告
主要是检测人员将所得结果进行分析汇总、计算,然后出鉴定结论和报告。