磺胺类总量检测方法

‘壹’ 兽药残留检测方法

（1）按照分离或者检测原理分类①理化分析方法，包括波谱法、色谱法及其联用技术，如高效液相色谱（HPLC）、气相色谱法（GC）、液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）、气相色谱-质谱法（CC-MS）、薄层色谱法（TLC）、毛细管电泳（CE）等。

②免疫分析法，如放射免疫测定法（RIA）、酶免疫测定法（EIA、ELISA）、荧光免疫测定法（FIA）等。

③生物测定法，如微生物学测定法（microbiologyassays）、放射受体测定法（radioreceptorassays）等。

（2）按照被测组分数量分类单组分残留分析法（singleresieanalysis）、多组分残留分析法（multi-resieanalysis）。

（3）按分析目的分类①筛选分析方法（screeningmethods）：一般提供被测组分是否存在或者浓度是否超过最高残留限量的初步信息。对筛选分析方法只要求具备半定量和一定的定性能力，但必须灵敏度高、过程简单、分析速度快。

②常规分析方法（routinemethods）：要求具有准确的定量分析能力，但不一定具有准确的定性能力。

③确证分析方法（confirmatorymethods）：不仅要求高的灵敏度，而且特别要求具有准确的定性分析（给出被测组分的结构信息）和定量分析能力。残留组分绝对量极小的测定只能用色-质联用确证方法。

‘贰’ 磺胺类的检测方法

是将2种或2种以上的分析方法联合使用，以达到高灵敏度、高精确度的要求。用于动物性食品中磺胺类药物残留检测的联用方法主要有气相色谱、串联质谱(GC MS)和高效液相色谱 串联质谱(HPLC MS)。GC/MS法是残留分析常用的确证方法，不但能提供结构信息,而且灵敏度高。检测猪肉中的磺胺类药物快速、准确，方法的最低检出限为0.1-0.5g/kg。由此可见此法是一种灵敏度高、选择性好、特异性强、快速的分析确证磺胺类药物残留的方法。但是其仪器设备的购置和运行费用较高成为常规分析方法尚有待进一步研究。

‘叁’ 《关于发布动物源食品中兽药残留检验方法的通知》（农牧发〔2001〕38号文）

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB 191 包装储运图示标志
GB 4789.2 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定
GB 4789.3 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定
GB 4789.4 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验
GB 4789.5 食品卫生微生物学检验 志贺氏菌检验
GB 4789.10 食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
GB 4789.11 食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验
GB/T 5009.11 食品中总砷的测定方法
GB/T 5009.12 食品中铅的测定方法
GB/T 5009.15 食品中镉的测定方法
GB/T 5009.17 食品中总汞的测定方法
GB/T 5009.19 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法
GB/T 5009.44 肉与肉制品卫生标准的分析方法
GB/T 6388 运输包装收发货标志
GB 7718 食品标签通用标准
GB 9687 食品包装用聚乙烯成型品卫生标准
GB 11680 食品包装用原纸卫生标准
GB/T 14931.1 畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量测定方法（高效液相色谱法）
GB/T 14931.2 畜禽肉中己烯雌酚的测定方法
GB/T 14962 食品中铬的测定方法
NY/Y 330 肉用仔鸡加工技术规程
NY 5035 无公害食品 肉鸡饲养兽药使用准则
NY 5036 无公害食品 肉鸡饲养兽医防疫准则
NY 5037 无公害食品 肉鸡饲养饲料使用准则
NY 5038 无公害食品 肉鸡饲养管理准则
SN 0341 出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法
关于发布动物源食品中兽药残留检测方法的通知（农牧发〔2001〕38号）

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1 鸡杂碎 offals
包括鸡头、鸡颈、鸡内脏、鸡爪、鸡翅尖、鸡骨架、鸡碎皮、鸡碎肉。
3.2 硬杆毛 feather
长度超过12 mm的羽毛，或羽毛根直径超过2mm的羽毛。
3.3 肉眼可见异物 visible abnormal materials
有碍食用的屠宰加工废弃物、污染物，如羽毛、黄皮、粪便、胆汁污染物及塑料、金属、饲料等其他非可食性异物。

4 技术要求
4.1 原料
4.1.1 屠宰前的活鸡应来自非疫区，其饲养规程符合NY 5035、NY 5036、NY 5037、NY 5038标准的要求，活鸡屠宰加工符合NY 330的要求并经兽医卫生检验检疫合格。
4.1.2 进口产品应有中华人民共和国进出境动植物检疫检验机关出具的检疫合格证明，未通过检疫的产品不得进口。
4.1.3 产品应整齐一致，单位包装内产品种类单一，不得将不同产品（例如鸡爪、鸡头、鸡翅等）混装。
4.2 感官指标
感官指标应符合表1规定。

不知道下面适不适合你

无公害鸡杂碎感官指标

项 目 指 标

色泽 表面有光泽，具有产品固有的色泽
气味 具有产品固有的气味，无异味
淤血面积/cm2 不得检出
硬杆毛（带皮产品）/（根/10 kg） ≤1
外源性水分/（%） ≤5
肉眼可见异物 不得检出

注：冻鸡杂碎应解冻后观察。

4.3 理化指标
理化指标应符合表2规定。

表2 无公害鸡杂碎理化指标

项 目 指 标

挥发性盐基氮/（mg/100g） ≤15
汞（以Hg计）/（mg/kg） ≤0.05
铅（以Pb计）/（mg/kg） ≤0.10
砷（以As计）/（mg/kg） ≤0.50
铬（以Cr计）/（mg/kg） ≤1.0
镉（以Cd计）/（mg/kg） ≤0.10
六六六/（mg/kg） ≤0.20
滴滴涕/（mg/kg） ≤0.20
金霉素/（mg/kg） ≤0.10
土霉素/（mg/kg） ≤0.10
四环素/（mg/kg） ≤0.10
磺胺类（以磺胺类总量计）/（mg/kg） ≤0.10
呋喃唑酮/（mg/kg） 不得检出
氯羟吡啶/（mg/kg） ≤0.01
己烯雌酚/（mg/kg） 不得检出
氯霉素/（mg/kg） 不得检出

4.4 微生物指标
微生物指标应符合表3规定。

表3 无公害鸡杂碎微生物指标

项 目 指 标

菌落总数/（cfu/g） ≤5×105
大肠菌群/（NPN/100 g） ≤1×103
沙门氏菌 不得检出
志贺氏菌 不得检出
致病菌 金黄色葡萄球菌 不得检出
溶血性链球菌 不得检出

5 检验方法
5.1 感官检验
按GB/T 5009.44 规定方法检验。
5.2 理化检验
5.2.1 按发性盐基氮：按GB/TT 5009.44规定方法测定。
5.2.2 汞：按GB/T 5009.17规定方法测定。
5.2.3 铅：按GB/T 5009.12规定方法测定。
5.2.4 砷：按GB/T 5009.11规定方法测定。
5.2.5 铬：按GB/T 14962规定方法测定。
5.2.6 镉：按GB/T 5009.15规定方法测定。
5.2.7 六六六、滴滴涕：按GB/T 5009.19规定方法测定。
5.2.8 金霉素、土霉素、四环素：按GB/T 14931.1规定方法测定。
5.2.9 己烯雌酚：按GB/T 14931.2规定方法测定。
5.2.10 磺胺类：按《关于发布动物源食品中兽药残留检验方法的通知》（农牧发〔2001〕38号文）规定方法测定。
5.2.11 氯霉素：按SN 0341规定方法测定。
5.2.12 呋喃唑酮：按《关于发布动物源食品中兽药残留检验方法的通知》（农牧发〔2001〕38号文）规定方法测定。
5.2.13 氯羟吡啶：按《关于发布动物源食品中兽药残留检验方法的通知》（农牧发〔2001〕38号文）规定方法测定。
5.3 微生物学检验
5.3.1 菌落总数：按GB 4789.2规定方法检验。
5.3.2 大肠菌群：按GB 4789.3规定方法检验。
5.3.3 沙门氏菌：按GB 4789.4规定方法检验。
5.3.4 志贺氏菌：按GB 4789.5规定方法检验。
5.3.5 金黄色葡萄球菌：按GB 4789.10规定方法检验。
5.3.6 溶血性链球菌：按GB 4789.11规定方法检验。

6 标志、包装、贮存、运输
6.1 标志
产品标志应符合GB 7718的规定，箱外标志应符合GB 191和GB/T 6388的规定。
6.2 包装
6.2.1 包装材料应符合GB 11680和GB 9687的规定。
6.2.2 包装印刷油墨无毒，不应向内容物渗漏。
6.2.3 包装物不得重复使用，生产方和使用方另有约定的除外。
6.3 运输、贮存
6.3.1 运输
产品运输时应使用符合食品卫生要求的冷藏车（船）或保温车，不得与有毒、有害、有气味的物品混放。
6.3.2 贮存
产品不得与有毒、有害、有异味、易挥发、易腐蚀的物品同处贮存。冻鸡杂碎在–18℃以下贮存。

‘肆’ 根据检测原理不同,食品中抗生素残留的检测方法可分为哪几种

分为四种：酶抑制率法 分光光度法 胶体金法 滴定分析法

酶抑制率法

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

分光光度法

不同的物质由于其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有其特有的吸收光谱。即使是相同的物质由于其含量不同，对光的吸收程度也不同。标准曲线法就是利用这一特性来测定物质含量，先配制一系列浓度由小到大的标准溶液，分别测定出它们的A值，以A值为横坐标，浓度为纵坐标，作标准曲线。在测定待测溶液时，操作条件应与制作标准曲线时相同，以待测液的A值从标准曲线上查出该样品的相应浓度。

胶体金法

将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，产生显色反应。当光源照射到检测带，反射光被收集并转化为电信号，根据信号的强弱即可判断被测物质的阴阳性。

滴定分析法

滴定分析法是将一种已知准确浓度的试剂溶液，滴加到被测物质的溶液中，直到所加的试剂与被测物质按化学计量定量反应为止，根据试剂溶液的浓度和消耗的体积，计算被测物质的含量。

‘伍’ 用亚硝酸钠滴定法测定磺胺类药物的含量，需注意的反应条件和终点判断的方法有哪些

永停滴定法，永停滴定法又称死停滴定法（死停终点法），是把两个相同的铂电极（或者其他金属电极）插入滴定溶液中，在两个电极之间外加一小电压，观察滴定过程中通过两个电极间的电流突变，根据电流的变化情况确定滴定终点。

若溶液中同时存在某氧化还原对的氧化型及其对应的还原型物质，在此溶液中插入铂电极，按照Nernst方程式，铂电极将反映出l2/电对的电极电位。

(5)磺胺类总量检测方法扩展阅读：

氧化还原电对：可逆电对、不可逆电对。

可逆电对滴定不可逆电对：电流计指针从停在零点附近到发生偏转并不再回到零点为滴定终点。

不可逆电对滴定可逆电对：

可逆电对滴定可逆电对：电流先上升后下降再上升再，下降的最低点为滴定终点，第一次上升最高点为半中和点。

应用：

以NaNO2为标准溶液，测定芳伯胺类化合物含量，准确度高。

Karl Fischer法测定药物中微量水分。

‘陆’ 我们想做牛奶中的磺胺总量的检测，不知有什么快速的方法，最好检测磺胺的种类能多一些

美国charm公司有这种试纸条

‘柒’ 简述利用重氮化法测定磺胺类药的滴定条件

重氮化法测定磺胺类药的滴定条件：
1 盐酸酸性条件
2 滴定前加入溴化钾作催化剂加快滴定速度
3 滴定时将滴定管尖端插入液面下2/3处
4 采用永停滴定法指示终点。
重氮化法测定磺胺类药的滴定过程：
。。。（略）。。。

‘捌’ 磺胺嘧啶的药物分析

方法名称：联磺甲氧苄啶片—磺胺嘧啶的测定—分光光度法
应用范围：该方法采用分光光度法测定联磺甲氧苄啶片中磺胺嘧啶的含量。
该方法适用于联磺甲氧苄啶片。
方法原理：取该品适量加盐酸溶液使溶解并定量稀释，摇匀，照紫外-可见分光光度法，以0.1mol/L盐酸溶液为空白溶液，以324nm为测定波长（λ2），340为参比波长（λ1），在测定波长与参比波长处测定吸光度，求出吸光度的差值（△A），另取磺胺嘧啶对照品适量，同法测定吸光度，计算，即得。
试剂：1.盐酸溶液（1→3）
2. 0.1mol/L盐酸溶液
仪器设备：可见分光光度计
试样制备：1. 供试品溶液的制备
取该品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺嘧啶100mg），置100mL量瓶中，加盐酸溶液（1→3）10mL，充分振摇使其溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置50mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2. 对照品溶液的制备
另取磺胺嘧啶对照品约100mg，精密称定，置100mL量瓶中，加盐酸溶液（1→3）10mL，充分振摇使其溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置50mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：精密量取上述供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法，以0.1mol/L盐酸溶液为空白溶液，以324nm为测定波长（λ2），340为参比波长（λ1），在测定波长与参比波长处测定吸光度，求出吸光度的差值（△A），另取磺胺嘧啶对照品适量，同法测定吸光度，计算，即得。
参考文献：中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.687。

‘玖’ 如何测定鸡胸肉中6种磺胺类药物残留

还可以用CHERM II和基因芯片检测仪来测

基因芯片的文献较少，目前也无相关的标准，只有实验室方法和厂商方法
维普搜索文献中较有用的如下：
应用蛋白芯片检测兽药残留 中国动物保健-2007年12期
翟淑平[1] 郭志红[1] 王艳[2] 王国青[1]
[1]北京市兽药监察所 [2]生物芯片北京国家工程研究中心
摘 要:（前后省略）
蛋白芯片检测兽药残留的方法，具有简单快速和高通量的特点，可以满足社会发展对食品安全检测产品的需要。该试剂盒可以实现对猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝和牛奶中磺胺总量（包括磺胺二甲基嘧啶、磺胺喹嗯啉、磺胺甲嗯唑、磺胺异嗯唑、磺胺间甲氧嘧啶）、链霉素总量（包括链霉素、双氢链霉素）、恩诺沙星以及氯霉素的定量检测。

应用CHERM II放射免疫分析的方法则较多，技术也较成熟

其中标准有：
GB/T 21173-2007 动物源性食品中磺胺类药物残留测定方法 放射受体分析法
SN/T 1765-2006 动物组织中磺胺类抗生素残留量检测方法 放射免疫受体筛选法

文献的话，维普得到：
鱼肉和鸡肉中磺胺类药物残留的放射免疫测定 李佐卿 倪梅林... 中国卫生检验杂志-2005年6期
此外，福建出入境检验检疫局的林杰、黄晓蓉等人做了虾、猪、鳗鱼等的检测研究