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瘦肉精检测仪器和方法

发布时间:2022-09-04 15:15:31

㈠ 怎样辨认含瘦肉精的肉类

瘦肉精检测方法
目前,检测瘦肉精的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。而我国结合自己的实际情况,2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为0.05μg/
kg,优点是检测精确度高,而且假阳性率低;缺点是检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC-MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC-MS法的缺点同HPLC相似。
目前,英国的Randox
Laboratories
litd和德国的R-biopharm公司均开发出了检测肉品、饲料中瘦肉精的ELISA试剂盒。

㈡ 现在瘦肉精的检测方法有哪些

(1)胶体金快速检测法将待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,待检物与金标试剂的结合物又与试纸条发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果,从而实现特异性免疫诊断。测试卡分析快速,仅需3~5分钟,无需专业人员操作,无需借助仪器,可以凭肉眼观察到结果,定性检测,测试卡可常温保存。

(2)酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其原理是利用抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方法将辣根过氧化物酶(HRP)与克仑特罗(CL)结合,形成酶偶联克仑特罗。将固相载体上已包被的抗体与特异性的抗克仑特罗抗体结合,然后加入待测克仑特罗和酶偶联克仑特罗,它们竞争性与克仑特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变化计量待测克仑特罗含量。若待测克仑特罗多,则被结合的酶偶联克仑特罗少,有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克仑特罗含量,比色法的最佳波长为450纳米。

㈢ 双汇“瘦肉精”是怎么回事

双汇宣称“十八道检验、十八个放心”,但猪肉不检测“瘦肉精”。河南孟州等地添加“瘦肉精”养殖的有毒生猪,顺利卖到双汇集团旗下公司。那么瘦肉精是什么?有什么危害呢?
一、“瘦肉精”的化学本质
瘦肉精的化学名为盐酸克伦特罗。它是一种人工合成的β-肾上腺素能兴奋剂,具有扩张支气管的作用,常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。当其应用剂量达到治疗量的5~10倍时,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉积减少,因此俗称为“瘦肉精”。在畜牧业生产中一些非法生产者将其作为一种生长促进剂添加到动物饲料中,用以改善胴体的品质,同时也造成食品中瘦肉精的残留。所以,瘦肉精既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是严重危害畜牧业生产和人体健康的毒品。该品为白色或类白色的结晶性粉末,无臭、味苦、易溶于水。
二、生猪食用“瘦肉精”后的表现
1、猪毛色光亮,皮肤红润,喜睡不愿动,吊肚,臀部肌肉丰满紧绷,脂肪薄,有经验的肉贩用手抓捏臀部肌肉的厚度,即可判别该猪是否食用瘦肉精。有的
猪背部肌肉丰满凹下成槽,驱赶时起身困难,气喘,个别跛行。
2、高温季节驱赶猪易发生应激反应,表现为猪行走困难,站立不稳,四肢发抖,全身肌肉震颤,并伴有呼吸困难,喘气急促,很快就会死亡。
3、一般在临上市前20天在饲料或饮水中临时添加喂食,在库存饲料中检测难以发现,如喂食超过20天,猪会出现站立不稳,肌肉震颤等迹象。
4、宰后胴体肌肉颜色深红,肌肉饱满、结实、不易渗出液体,皮薄,脂肪较少。而未食用“瘦肉精”的猪肉相对色淡,脂肪较厚、肌肉切面容易渗出液体,由于肉贩误导,消费者不会区分的话,就很容易买到不健康的猪肉,一些不法肉贩为了自己的利益,要求农户喂食,否则压级压价,甚至不予收购,导致该毒品在生猪养殖环节中蔓延。
三、瘦肉精残留对人体的危害
瘦肉精的化学结构稳定,在体内不会破坏分解,以原形排出体外。研究显示瘦肉精完全能耐受100℃高温,要经126℃油煎5分钟才会破坏减半。因此常规烹调对肉食品残留的瘦肉精起不到破坏作用。如果生猪在屠宰前没有足够休停时间(一般停药28天以上),
则在肌肉和内脏器官有较高浓度的药物残留。人食用后重者出现心慌、肌肉震颤、头疼、神经过敏等症状;轻者感觉不明显,但长期食用可致“慢性中毒”,引致染色体畸变,诱发恶性肿瘤。
四、瘦肉精的检测
“瘦肉精”在组织中残留的检测方法有高效液相色谱法、气质联用测谱法、酶联免疫吸附测定法等。现常用酶联免疫吸附测定法进行检测,所需仪器设备:酶标读数仪、离心机、震荡器、微量移液器。所需试剂和材料均由试剂盒厂商提供。检测结果小于1.0ng/ml时可判为未检出,大于时判为检出。此结果应根据需要与否而决定是否进行定量确证。
肉的质量直接关系到咱老百姓的健康,是不可忽视的大事。与前些年社会普遍关注的“注水肉”问题相比,含瘦肉精的猪肉对人体的伤害更直接,又因其在肉的外观上不易辨别,故这种形式的伤害也更具隐蔽性,也更厉害。

㈣ 瘦肉精检测问题

目前,检测瘦肉精的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。而我国结合自己的实际情况,2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种:即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱法(GC-MS)。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法,其最低检测限为 0.05μg/kg,优点是检测精确度高,而且假阳性率低;缺点是检测过程烦琐、检测时间长,需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC-MS法与HPLC法相比,检测灵敏度更高,假阳性率更低,已将GC-MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC-MS法的缺点同HPLC相似。 (1)试剂和材料 以下所有试剂,除特别注明外,均为分析纯试剂;水为符合GB/T6682规定的二级水。 ①盐酸克伦特罗对照品:含盐酸克伦特罗不得少于98.5% ②盐酸 ③无水甲醇 ④氢氧化钠 ⑤磷酸二氢钾 ⑥磷酸 ⑦盐酸溶液 取盐酸4.2ml,加水至1000ml,即得。 ⑧o.5mol/L磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾68g,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.O,用水稀释至1000ml,即得。 ⑨0.05mol几磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾6.88,加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3.0,用水稀释至1000mi,即得。 a.氢氧化钠溶液 取氢氧化钠48,加水使溶解成100mi,即得。 b.盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg/mi) 准确称取28.3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至25ml,一20~C以下保存,有效期1年。 ⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg/mi) 取lmg/mi储备液o.5ml到50mi量瓶中,加水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng/m1) 取1(ug/m1工作液o.5ml到:50mi量瓶中水至50mi,2~8~C保存,有效期1个月。 ⑿盐酸克伦特罗检测试剂盒(2~8~C冰箱中保存) ⒀固相萃取柱C,s:100mglml含碳量≥17% (2)仪器和设备 ①酶联免疫反应读数仪 ②分析天平 精度0.00001g ③天平 精度0.01g ④冷冻离心机 ⑤50mi具塞离心管 ⑥匀浆机 ⑦微型振荡器 ⑧回旋振荡器 ⑨微量移液器 单道20uL,50ul,100uL;多道50~250uL, ⑩干热浓缩器 ①空气压缩机 (3)测定步骤 ①试料的制备(尿) 取供试尿lml,于3000r/min离心l0min,上清液作为供试试料,直接供酶联免疫测定法测定。 取空白尿lml,于3000r/min离心l0min,上清液作为空白试料,直接供酶联免疫测定法测定。 取空白尿2ml,于3000r/min离心l0min,上清液1.0ml添加l00ug/L的克伦特罗对照溶液20/H。作为2ug/l空白添加试料,直接供酶联免疫测定法测定。 ②试料的制备(肝) 取约l00g新鲜或冷冻后融化的空白或供试猪肝,用匀浆机以10000r/rain匀浆1-2min,使均匀呈糊状,一20~C以下冰箱中贮存备用。 取均浆后的供试肝样,作为供试试料。 取均浆后的空白肝样,作为空白试料。 取均浆后的空白肝样(1土0.05)e添加l00ng/m1的克伦特罗对照溶液20tzL作为2ng/g空白添加试料。 a:提取(肝) 取(1士o.05)z试料,置50ml离心管中;加盐酸溶液5.0mi,旋涡混匀,中速振荡1.5h;在10-15~C下以4000r/mill以上速度离心15min;上清液移人另一50ml离心管中,加入氢氧化钠溶液300gL,混匀,振荡15min;加0.5mol/l磷酸二氢钾溶液4。0ml,混匀,2-8~C放置过夜;取上述溶液于10~15~C以4000r/111113以上的速度离心15min,上清液备用。 b.净化(肝) C,,固相萃取柱依次用无水甲醇3mi、0.05mol/L磷酸二氢钾溶液2mi预洗,不使柱床干涸;将备用上清液全部过柱;用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液2ml淋洗,挤干,弃去所有淋洗液;用无水甲醇2mi洗脱,流速控制在0.5ml/mm以下,挤干,收集洗脱液;于50~60~C下用氮气或空气缓缓吹干洗脱液;残余物用水1.0ml溶解,以4000r/mill以上的速度离心15rain,清液作为试样溶液供酶联免疫测定法测定。 ③测定 a.室温应控制在19~30~C。 b.取在19-30~C放置1-2h的试剂盒,按每个标准溶液和试样溶液至少两孔计算所需酶联板条的数量,插入框架。每个微孔加入用缓冲溶液100倍稀释的抗体100~tL,封口膜封板,室温孵育30min。 c倒出孔内液体,将酶联板倒置在吸水纸上拍打,使孔内没有残余液体。用多道移液器加水250pL到酶联板的微?L内,稍后倒出孔内液体,再将酶联板倒置在吸水纸上拍打,如此重复操作洗板3次。 d.分别吸取标准溶液、空白试料、空白添加试料和供试试料各20uL,分别放入不同微孔底中央,并在每孔内加入用缓冲溶液100倍稀释的酶结合物100~I。,在微型振荡器上混匀,用封口膜封好,室温孵育30min。 e.倒出孔内液体,将酶联板倒置在吸水纸上拍打,使孔内没有残余液体,重复洗板3次。 f.用多道移液器加入用底物缓冲溶液10倍稀释的底物100uL,室温避光孵育15min。 g.用多道移液器每孔加终止液100uL。 h.在1h内将酶联板放于酶标仪内,于450nm波长处测定吸光度值。 (4)计算 用数据分析软件对结果进行分析,绘出标准曲线,并得出试料中克伦特罗的含量。 (5)灵敏度和回收率 本方法的平均检测下限为0.1mg/Kg。 本方法在1ug/kg添加浓度水平上猪尿回收率范围为60%一120%,猪肝回收率范围为40%~120%。参考资料/ http://www.zgny17.com

㈤ 瘦肉的检验方法是什么如题

吃瘦肉每天别超过2两 吃瘦肉多了对人体健康也产生危害,若把瘦猪肉作为日常膳食结构中主要的食物来源,会增加发生高血脂、动脉粥样硬化等心血管疾病的危险. 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对各种动物肉的脂肪进行了测定, 在《2002年中国食物成分表》标明,以100克重量为例,各种肉类的脂肪含量如下:兔肉为2.2克,马肉为4.6克,牛肉为4.2克,而瘦猪肉为7.9克,若把瘦猪肉作为日常膳食结构中主要的食物来源过量食用,也会增加发生高血脂、动脉粥样硬化等心血管疾病的危险. 最近,英国皇家研究院布比斯医生经过分析研究表明:多吃瘦肉对人体健康的危害更甚于肥肉,因为瘦肉在烹制过程中,会自动产生一种致癌物质———杂环胺.动物实验表明:杂环胺是一种损害基因的物质,会使体内的脱氧核糖核酸(DNA)发生诱变.瘦肉中的杂环胺能被大肠直接吸收进入血液中,西方国家肠癌发病率高于其他国家肠癌发病率,这与他们常食瘦肉,尤其喜食大量红色牛排有关. 此外,瘦肉中蛋氨酸含量较高.蛋氨酸是合成人体一些激素和维护表皮健康必需摄取的一种氨基酸,但在一些酶类催化激活下,在热理化处理过程中的蛋氨酸,会产生一种叫同型半胱氨酸的有机物.现代医学认为:同型半胱氨酸会直接损害动脉血管壁的内皮细胞,促使血液中的胆固醇和甘油三酯等脂质沉积并渗入动脉血管壁内,形成动脉粥样斑块,进而引发动脉粥样硬化.食瘦肉过多,蛋氨酸就会增多,同型半胱氨酸含量也相应地增加,加速动脉粥样硬化的发生. 可见,不能因为瘦肉饱和脂肪酸少就不限制它的食用.一般来讲,成人每天食肉量应为1~2两,根据个人的体重和肥胖程度可适当增减,若需要补充蛋白质,可适当增加牛奶和豆制品的摄入. 西方营养学家研究认为,中国、日本等亚洲国家乳腺癌、直肠癌发病率低于西方国家,这与亚洲国家常食大豆及其豆制品有关.大豆中含有一种抗癌活性物质———异黄酮,其中2/3为三羟异黄酮类,对强致癌物———苯并(a)芘和甲基苯蒽等,均有明显抗诱变作用,对乳腺癌和大肠癌有较强的抑制作用.因此,提倡人们少吃些瘦肉,多吃些大豆及其制品,以维护身体的健康. 别买皮薄颜色太鲜红纯瘦肉 10月10日,湘潭市畜牧、公安部门联合宣布:对湘潭影响最大的一起瘦肉精案件,在公安和畜牧部门的共同努力下告破.此案侦查过程历时一年多,两部门联合追缴了7公斤瘦肉精.据报,此前已有100多公斤已流入我省的湘潭、株洲、娄底等地. “瘦肉精”学名克伦特罗,该药物既不是兽药,也不是饲料添加剂,而是肾上腺类神经兴奋剂.猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成,加速脂肪的转化和分解,提高了猪肉的瘦肉率,因此称为“瘦肉精”.但使用剂量须在人用药剂量的10倍以上,才能达到提高瘦肉率的效果.由于用量大、使用时间长、代谢慢,所以直至屠宰上市,“瘦肉精”在猪体内的残留量都很大,通过食物进入人体,会导致使人体慢性中毒,给消费者健康造成极大隐患. 长沙市畜牧局兽医药政处谢罗马处长建议,消费者购买猪肉时要拣带些肥膘(1-2cm)的肉,皮不要太薄,颜色不要太鲜红. 主要成分是蛋白质.检验方法是剀氏定氮法. 蛋白质的测定方法 pro的测定方法分为两大类:一类是利用pro的共性,即含氮量,肽链和折射率测定pro含量,另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定pro含量.但是食品种类很多,食品中pro含量又不同,特别是其他成分,如碳水化合物,脂肪和维生素的干扰成分很多,因此pro的测定通常利用经典的剀氏定氮法是由样品消化成铵盐蒸馏,用标准酸液吸收,用标准酸或碱液滴定,由样品中含氮量计算出pro的含量.由于食品中pro含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微量法,但它们的基本原理都是一样的. 一 凯氏定氮法 这种方法是1883年Kjeldahl发明,当时凯氏只使用H2SO4来分解试样,来定量谷物中的pro,他只知用H2SO4分解试样,而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程,所以只使用H2SO4分解试样,需要较长时间,后来由Gunning加入改进,他改进的办法是在消化时加入K2SO4使沸点上升,这样加快分解速度,因为温度由原来硫酸沸点的380上升到400℃,提高了不到67℃所以速度也就加快了,凯氏定氮法至今仍在使用. 我们在检验食品中pro时,往往只限于测定总氮量,然后乘以pro核算等数,得到蛋白质含量,实际上包括核酸、生物碱、含氮类脂、叶啉和含氮色素等非蛋白质氮化合物,故称为粗pro. 1 凯氏常量定氮法: 不论常量、半微量以及微量定氮法它们的原理都是一样的,首先第一个步骤是消化: (1)消化:样品与硫酸一起加热消化,硫酸使有机物脱水.并破坏有机物,使有机物中的C、H氧化为CO2和H2O蒸汽逸出,而pro则分解氮,则与硫酸结合成硫酸铵,留在酸性溶液中. (2)在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解,它与硫酸反应生成硫酸氢钾,可提高反应温度,一般纯硫酸加热沸点330℃,而添加硫酸钾后,温度可达400℃,加速了整个反应过程.此外,也可以加入硫酸钠,氢化钾盐类来提高沸点.其理由随着消化过程硫酸的不断地被分解,水分的逸出而使硫酸钾的浓度增大,沸点增加.加速了有机的分解.但硫酸钾加入量不能太大,否则温度太高,生成的硫酸氢铵也会分解,放出氨而造成损失. 为了加速反应过程,还加入硫酸铜,氧化汞或硒粉作为催化剂以及加入少量过氧化氢,次氯酸钾作为氧化剂.但为了防止污染通常使用硫酸铜. 所以有机物全部消化后,出现硫酸铜的兰绿色,它具有催化功能,还可以作为碱性反应指示剂. (1)蒸馏:样液中的硫酸铵在碱性条件下释放出氨,在这操作中,一是加入氢氧化钠溶液要过量,二是要防止样液中氨气逸出. (2)吸收与滴定: 蒸馏过程中放出的氨可用一定量的标准硫酸或标准盐酸溶液进行氨的吸收,然后再用标准氢氧化钠溶液反滴定过剩的硫酸或盐酸溶液,从而计算出总氮量. 半微量或微量定氮通常用硼酸溶液吸收后,再用标准盐酸直接滴定,硼酸呈微弱酸性,用酸滴定不影响指示剂变色反应,它有吸收氨的作用. 1.操作步骤: 准确称取样品中0.50-2.00g→于500ml凯氏瓶中→加10g无水K2SO4→加0.5gCuSO4→加20ml H2SO4→在通风橱中先以小火加热,待泡沫消失后,加大火力,消化至透明无黑粒后,将瓶子摇动一下使瓶壁炭粒溶于硫酸中→继续消化30分钟→至到样液呈绿色状态,停止消化,冷却→加200ml水→连接蒸馏装置→用硼酸作吸收液→在K氏瓶中加波动珠数粒和80ml50% NaOH→立即接好定氮球→加热→至到K氏瓶内残液减少到三分之一时,取出用水冲洗→用0.1N HCl滴定. N(V2-V1)0.014 W 计算: 总氮量%= (N(V2-V1)×0.014)/W × 100 0.014----氮的毫克当量数 pro%=总氮%×K 乳制品K=6.38(N=15.7%) 小麦粉K=5.79(N=17.6%) 动物胶K=5.6(N=18.0%) 冰蛋K=6.7(N=14.8%) 大豆制品K=6.0(16.7%) K=6.25则(N=16%) K-换称等数 各种试剂的作用: 浓H2SO4: A :脱水使有机物炭化,然后有机物炭化生成碳,碳将H2SO4还原为SO2,本身则变为CO2 B: 氧化 C: pro与浓H2SO4生成NH3↑,CO2,SO2,H2O↑ D: NH3与H2SO4生成硫酸铵 (1)CuSO4的作用(催化剂) CuSO4为红色沉淀,当C完全消化后,反应停止,红色消失,变为兰色,即为消化达到完全,兰色为CuSO4的颜色 (2)K2SO4的作用(提高沸点) 沸点由330℃提高到400℃加速了反应过程. (3)硒粉和过氧化氢,氧化汞都为催化剂,但为了防止污染通常采用硫酸铜 (4)50%NaOH的作用 下面我就针对几点来说明为何影响氨化完全和速度快的因素: (1)K氏烧瓶和取样量 如果称1g以上的样品,就需要K氏烧瓶最小500ml,800~1000ml的更好,这样的K氏烧瓶对于缩短氨化时间,加热的均匀性和完全氨化效果最好. (2)分解剂 A H2SO4和K2SO4的添加量 有机无分解需要H2SO4量,H2SO4应根据有机物种类不同而加的量就不同,如果试样含脂类高,则加H2SO4多,为了提高分解温度,要大量添加K2SO4,但不能太多,也不能太少,太少则氨化不充分.K2SO4和H2SO4的添加比例是: 1g样品 K2SO4: H2SO4=7g:12ml 这种比例在国内外都使用,是公认的 还有一种比例: K2SO4:H2SO4=10:20ml B 催化剂 用作催化剂的有Hg、HgO、Se,硒化合物,CuSO4、TiO2,对Hg,HgO有毒但结果好,Se与CuSO4得到结果是一种,TiO2,的结果偏低,采用不同的催化剂则消化时间不同, HgO消化麦子为38,Se与CuSO4消化麦子55,TiO2消化麦子70,所以在给出测定结果时要注明催化剂的类型. (3)热源的强度 消化时热源的强度同迅速消化和完全氨化关系很大,即便盐类K2SO4加得多,如果热源弱,也是没有意义的,热源过强导致H2SO4损失,使氨回收率低,另外K氏瓶的容量大小,颈部的粗细和长短等,也与热源的强度有关. (4)氨的蒸馏和吸收及滴定 蒸馏有两种: 1 直接蒸馏(装置简便,准确性好) 2 水蒸汽蒸馏 蒸馏加NaOH是50%,加的量为H2SO4量的4倍,硫酸量为12ml,则NaOH为12×4=48ml,而且一般高于这个理论值,即加到50~55ml,如果NaOH量加的不够就变成H2S, H2S是强酸,使颜色变红. 吸收液有: 1标准H2SO4 用标准碱返滴定,甲醛红指示剂 2 硼酸 用HCl进行滴定,混合指示剂 目前都用硼酸吸收液,用硼酸代替H2SO4,这样可省略了反滴定,H2SO4是强酸,要求较严,而硼酸是弱酸,在滴定时,不影响指示剂变色范围,另外硼酸为吸收液浓度在3%以上可将氨完全吸收,为保险期间一般用4%. 〈6〉实验注意事项 a.样品应时均匀的,若是固体样品应事先研细,液体样要混合均匀. b.样品放入K氏烧瓶时,不要黏附瓶颈上,万一黏附可用少量水缓慢冲下,以免被检样消化不完全,使结果偏低. c.消化时,如不容易呈透明溶液,可将K氏烧瓶放冷后,加入30%过氧化氢催化剂2~3ml,促使氧化. d.在整个消化过程中,不要用强火,保持和缓的沸腾,使火力集中在K氏烧瓶底部,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下,使氮有损失. e.如硫酸缺少,过多的硫酸钾会引起氨的损失,这时会形成硫酸氢钾,而不与氨作用,因此当硫酸过多底物被消耗掉或样品中脂肪含量过高时,要添加硫酸量. f.混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色,如果没有溴甲酚绿,可单独使用0.1%甲醛红乙醇溶液. g.氨是否完全蒸馏出来,PH试纸检查馏出液是否为碱性. h.向蒸馏瓶中加入浓碱时,往往出现褐色沉淀无.这时由于分解促进剂与加入的硫酸铜反应,生成氢氧化铜,经加热后又分解生成氧化铜的沉淀,有时Cu离子与氨作用生成深兰色的络合物. i.消化剂绿色后继续消化30分钟即可. 2 K氏微量定氮仪法 3 K氏半微量定氮仪法 (2 、 3原理一样) 操作方法大同小异,半微量法消化后,定容100ml,然后吸25ml蒸馏吸收液吸收. N(V2-V1)0.014 W*10/100 计算总氮%=(N(V2-V1)×0.014)/(W×10/100)×100 对于微量定氮仪法,仪器有了改进,样液称样少,蒸馏消化液也少,其它基本一样. 4 K氏自动定氮法 原理与上面一样,仪器,采用K氏自动定氮仪:其装置内具有自动加碱蒸馏装置,自动吸收和滴定装置以及自动数字显示装置,消化装置:由优质玻璃制成的K氏消化瓶以及红外线装置的消化炉. 二 水扬酸比色法: 1 原理: 样品中的pro经H2SO4消化转化为铵盐溶液后,在一定的酸度和温度下与水扬酸钠和次氯酸钠作用生成有颜色的化合物,可以在波长660nm处比色测定,求出样品含氮量,计算蛋白质含量. 2 方法 (1)标准曲线的绘制 取6个25ml容量瓶编号 0 1 2 3 4 5 6 分别加空白酸液 2ml 分别加磷酸盐缓冲液 5ml 稀释至总体体积至15ml 分别加水扬酸钠 5ml 37C水浴 15分钟 加入次氯酸钠 2.5ml 37C水浴 15分钟 取出试液于660nm下进行比色,绘标准曲线. (2)样品处理: 准确称样0.20~1.00g→于K氏瓶中→加15mlH2SO4和5g催化剂→电炉上加热到沸腾后→加大 火力消化→直到出现暗绿色时→摇动瓶子→K氏瓶全部消化后→冷却→加水至250ml容量 瓶. (3)样品测定: 准确吸取上述消化溶液10ml→于100ml容量瓶中→定容→准确吸2ml→于25ml容量瓶中→加 5ml磷酸缓冲液→以下操作与标准曲线绘制的步骤相同 并以试剂空白微对照,测得样液的光密度,从标准曲线查出其含氮量. (4)计算 C×F 含氮%= ---------------------------× 100 W×1000×1000 C---从标准曲线中查出测定样液的含氮量(Ug) F---样品溶液的稀释倍数 W---样品重量(g) pro%=总氮%×K(K可为6.25,也可查) 3注意事项: A 当天消化液最好当天测定,结果重现性好,如果样液改至第二天比色就有变化. B 当在PH和试剂适当范围内加入氯源后,颜色的显色和温度有关,应严格控制反应温度. C 这种方法测定结果基本与K氏法一致. 4 试剂 (1)氯标液:称经110℃干燥2h的硫酸铵0.4719g→于烧瓶中定容10ml→此液1ml相当于 1.0mg氮标液→使用时配制成1ml相当于2.50Ug氮标液. (2)空白酸液:称0.50g蔗糖→加15mlH2SO4和5g催化剂→与样品一样消化→定容250ml→ 使用时吸收此液10ml→加水至100ml为工作液备用. (3)磷酸盐缓冲液:称7.1g磷酸氢二钠→加38g磷酸三钠→加20g三九石酸钾钠→加400ml水 溶解→过滤→另称35gNaOH溶于100ml水中→冷至室温→缓缓地搅拌加入磷酸盐溶液中→加 入水稀释至1000ml备用. (4)水扬酸钠溶液:称25g水杨酸钠和0.15g亚硝基铁氰化钠溶于200ml水中过滤,加水稀释 至500ml (5)次氯酸钠溶液:吸4ml安替富民液,用水稀释至100ml 5 仪器 (1)分光光度计 (2)恒温水浴 三 紫外分光光度法 1 原理: pro及其降解产物的芳香环基 ,在紫外区内对某一波长具有一定的光选择吸收,在280nm下,光吸收与pro浓度(3~8mg/ml)成直线关系,因此,通过测定pro溶液的吸光度,并参照事先用K氏定氮法分析的标准样品,从标准曲线查出蛋白质的含量. 2 试剂: (1) 0.1mol/l柠檬酸水溶液. (2)8mol/l脲[(NH2)2CO]的2NNaOH溶液. 脲的2N氢氧化钠液 (3) 95%乙醇 (4) 无水乙醚 3 仪器 (1) 751型的紫外分光光度计 (2) 离心机 4 操作方法 (1)标准曲线的绘制:准确称取样品.2.00g,置于50ml烧瓶中,加入0.1mol/l柠檬酸水溶液30ml,搅拌30分钟使其充分溶解,用四层纱布过滤于玻璃离心管中,以每秒钟3000~5000转的速度离心10分钟,分别吸出上清夜0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml于6个10ml容量瓶钟,每个容量瓶,8mol/l脲的氢氧化钠溶液充分摇2分钟(如果离心再次离心),取透明液于比色皿中,在280nm下测定其吸光度.(做参比值) 以事先用K氏定氮法测定的样品中蛋白质的含量微横坐标上面的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线. (2)样品测定 准确称取试样1.00g→于50ml烧杯中→加0.1mol/l柠檬酸溶液30ml→搅拌10分钟→四层纱布过滤到离心管中→用8mol/L脲的NaOH溶液定容,摇匀后于280nm下测吸光度,从标准曲线上查出pro的含量. 计算: 蛋白质= C/W× 100 C----从标准曲线上查得的pro含量(mg) W----测定样品溶液相当于样品量(mg) 说明: a.此法运用于糕点,牛乳和可溶性pro样品,测定糕点时,应把表皮颜色去掉. b.温度对pro水解有影响,操作温度应控制在20~30℃. 四 双缩脲法-皮尼克法 1 原理: 双缩脲在碱性条件中,能与CuSO4结合成红紫色的络合物.pro分子中含有肽链与双缩脲结构相似,也呈此反应.本法直接用于测定像小麦粉等固体试样的pro含量.但作为铜的稳定剂,酒石酸钾钠比甘油好些.小麦粉中的pro能直接地一边抽出一边进行定量. 2 试剂 ⑴甘油作为稳定剂:取10ml10N KOH溶液,3.0ml甘油加到937ml水中,激烈搅拌,同时加入4%CuSO450ml. ⑵酒石酸钠作稳定剂,吸10ml10N KOH溶液和20ml25%酒石酸钾钠溶液加到930ml水中,激烈搅拌,同时加入4%CuSO4液40ml. 配制以上两种溶液、试剂,必须澄清,无氢氧化铜生成,否则重配. 3 方法:样品测定 标准曲线绘制 准确称0.6g样品→使用试剂(1) 准确称0.5g样品→使用试剂(2) 假如用试剂(2) (1)准确称样→0.5g→于80ml离心管→加1mlClC4→混合→加50ml酒石酸钾钠稳定剂→盖上盖子离心10min(4000转/分)→放置1小时→吸混合液15ml→于20ml离心管中→离心到完全透明→取上清夜5ml于→10ml容量瓶→加水定容→于550nm处测定吸光度,从标准曲线上查出pro含量. (2)标准曲线绘制 按样品测定方法,根据样品中pro含量,取离心澄清样液0.0 2.0 4.0 8.0 10.0ml于10ml容量瓶中→分别加水定容,按照样品测定其吸光度. 事先用K氏定氮法测定样品中pro含量为横坐标,以上述吸光度为纵坐标绘制标准曲线. 4 计算:蛋白质%=C/W×100 C----从标准曲线上查得得pro含量(mg) W----测定样液时相当于样品重量(mg)

㈥ 一般食品出现问题,比如鱼里面含有孔雀石绿、猪身上有瘦肉精,这些都是通过什么检测出来的

目前,孔雀石绿的检测方法以理化检测法和免疫学检测法为主。其中理化检测法包括:薄层层析法、分光光度法、高压液相色谱法、液相色谱质谱联用法、气相色谱质谱联用法等。酶联免疫检测法
酶联免疫法(ELISA)的基本原理是将酶分子与抗体分子共价结合,结合产物不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。底物可在酶的作用下使其所含的供氢体由无色的还原型转变成有色的氧化型,出现颜色反应,颜色反应的深浅与样品中相应抗体或抗原的量呈一定的比例,显色反应可通过酶标仪进行定量测定。ELISA方法是一种既特异又敏感的检测方法,可分为:间接竞争抑制法、抗体/抗原包被直接竞争法和夹心法。
而对于猪肉中的“瘦肉精”,检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)和高效液相色谱一质谱联用法(HPLC-MS),这些都是比较传统的办法,由于这些方法对仪器设备、操作人员的要求较高,耗时较长,在检测过程中往往是作为确认检验方法。目前,实验室中最常用的是酶联免疫吸附法,它是运用抗原抗体反应的原理对猪肉中“瘦肉精”作出定量定性的分析,一般实验只需2~3小时,具有成本低、速度快、检测灵敏度高、仪器设备简单等优点。另外有一些快速检测方法。

㈦ 瘦肉精检测仪多少钱怎么用一般人能会用吗

瘦肉精检测仪多少钱?怎么用?一般人能会用吗?
1、瘦肉精检测仪多少钱?一般来说是按照产品不同、检测功能和检测项目的不同来定义,所以价格也会有高低不等,所以还是要看你选择什么样的。
2、怎么用?一般人能会用吗?
操作很简单,设备里面自带教学视频,1分钟学会3分钟速测。

㈧ 瘦肉精检测方法有哪几种

目前的瘦肉精检测方法,大致有一下四种方法,市场上的一些检测物品也是根据这些方法衍生而来的。

气象色谱-质谱法,简称GC-MS,GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来,能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析,而且具更高的检测极限。

高效液相色谱法,此法适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物,而且,HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用,容易实现分析过程的自动化。其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高,而且假阳性率低;缺点是样品处理时间长,检测过程烦琐、难于操作,需贵重仪器,在实际应用中受到一定的限制。

酶联免疫吸附法,利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,通过化学方法将植物辣根过氧化物酶(HRP)与克伦特罗(CL)结合,形成酶偶联克伦特罗。将固相载体上已包被的抗体(羊抗兔IgG抗体)与特异性的抗克伦特罗抗体结合,然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗,它们竞争性与克伦特罗抗体结合,洗涤后加底物,根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。

胶体金免疫层析法,利用竞争法胶体金免疫层析技术,检测液中的Clen与金标垫上的金标抗体结合形成复合物,若Clen在检测液中浓度低于灵敏度值,未结合的金标抗体流到T区时,被固定在膜上的Clen-BSA偶联物结合,逐渐凝集成一条可见的T线;若Clen浓度高于灵敏度值,金标抗体全部形成复合物,不会再与T线处Clen-BSA偶联物结合形成可见T线。

如何检测"瘦肉精"猪肉

可以用瘦肉精检测仪,瘦肉精检测仪HED-SSJ 可现场快速检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。仪器预留其他项目检测程序和端口,根据日后需求可方便的自主增加检测项目。日后可升级为检测抗生素、兽药残留、动物疫病、病害肉、的综合类型仪器。

㈩ 如何检测“瘦肉精”的残留

目前,检测“瘦肉精”残留的方法主要有四种,即高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、毛细管区带电泳法(CE)和免疫分析技术(IA)。目前,我国将HPLC法作为“瘦肉精”检测残留的半确证性方法,其最低检测限范围为1~15纳克/克。IA技术主要有放射免疫分析技术(RIA)和酶免疫分析技术(EIA)。RIA最低检测限可达到0.5纳克/克,国外已生产出RIA测定克伦特罗的试剂盒。检测克伦特罗较高效的EIA是ELISA技术,检测限可达0.05纳克/克,最高可达0.003纳克/克。我国研制的“瘦肉精”多克隆抗体检测试剂盒,对样品检测的特异性强,检测时间短,可同时检测多个样品。

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