Ⅰ 什么是培养基简述选用和设计培养基的原则和方法
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定.
(一)四个原则
1.目的明确在设计新培养基前,首先要明确配制该培养基的目的,例如,要培养何菌?获何产物?用于实验室作科学研究还是用于大规模的发酵生产?作生产中的“种子”,还是用于发酵?等等.
2.营养协调
3.物理化学条件适宜
4.经济节约
(二)四种方法
1.生态模拟 在自然条件下,凡有某微生物大量生长繁殖的环境,则可认为该处一定具备该微生物生长繁殖所必需的营养和其他条件.因此,就可以模拟该天然基质或直接取用该天然基质(经过灭菌)来培养相应的微生物.在实践中,的确可以利用生态模拟的办法来配制各类“初级的”天然培养基.例如,可用肉汤、鱼汁来培养多种细菌;用水果汁来培养各种酵母菌;用润湿的麸皮、米糠来培养多种霉菌;用米饭或面包来培养根霉;用肥土来培养放线菌;以及用玉米芯来培养脉孢菌(Neurosporaspp.),等等.
2.查阅文献 一个科学工作者决不能事事都依靠直接经验.多查阅、分析和利用一切文献资料上的对自己直接或间接有关的信息,对设计有自己特色的培养基配方有着重要的参考价值.
3.精心设计 在设计、试验新配方时,常常要进行各项因素的比较或反复试验,因此,工作量是很大的.为了提高工作效率,应努力借助优选法或正交试验设计法等行之有效的数学工具.
4.试验比较 要设计一种优化的培养基,在上述三个方法的基础上,最终还得通过实际试验和比较来加以确定.试验的规模一般都遵循由定性到定量、由小而大地逐步扩大的原则.例如,可先在培养皿上作生长谱试验(auxanographicmethod),然后进行摇瓶培养试验,再进行台式发酵罐试验,最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐的规模.
生长谱试验的基本操作是这样的:如果我们要试的是某一微生物的碳源,则先准备一个不加碳源的琼脂培养基,待融化并冷却至45℃左右时,混入供试菌悬液,摇匀后倒成琼脂平板,俟其凝固后,将待试碳源一一用小镊子夹取少许并整齐地放在平板上.经温箱培养适当时间后,凡在某碳源周围出现该菌的“生长圈”者,即为它可利用的碳源.用同样原理也可寻找合适氮源和生长因子.
Ⅱ 培养基的配制
培养基的配制:
1、称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮薯仔。薯仔切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
2、加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
3、分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
5、包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
培养基配制注意事项:
1、培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。
2、PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
3、调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
4、培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。
5、培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。
(2)鉴别培养基设计方法扩展阅读
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基。
根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等。
根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。
培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。配好后不宜久置,最好现配现用。
Ⅲ 请举例如何运用鉴别性培养基和选择性培养基
首先要了解鉴别培养基和选择培养基的目的:
1.
鉴别培养基的目的是鉴定出是否有某种菌,比如大肠杆菌在伊红美兰培养基中能被准确的鉴定出来,但是让大肠杆菌迅速繁殖,用的却是肉汤培养基。这点说明鉴别培养基的本质是鉴别,但不一定是微生物旺盛繁殖的培养基。
2.
选择性培养基的目的是使得目标菌大量繁殖,成为培养基中的优势菌群。比如马丁氏富集培养基,对于酵母菌的生长非常有利。这说明选择培养基的本质是富集目标菌,经过培养可以得到大量的目标菌,方便后期的筛选分离和纯化。
通过以上分析,只要看出鉴别培养基和选择性培养基的本质区别,即可有更深的理解。
Ⅳ 选择培养基和鉴别培养基的区别是什么
一、含义不同:
选择培养基根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培养后会发生某种变化,从而区别不同类型的微生物。
二、时间不同:
选择培养基上的菌类,有2种或两种以上时,只有适应环境(选择培养基的基底)的菌种才能存活。
鉴别培养基上的菌类,有两种或两种以上时,在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培养后会发生某种变化,从而区别不同类型的微生物(但培养基上的各个菌种均不死亡)。
(4)鉴别培养基设计方法扩展阅读:
鉴别培养基(differentialmedium)用于鉴别不同类型微生物的培养基。在培养基中加入某种特殊的化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。
Ⅳ 高中生物书中~有哪些选择培养基~鉴别培养基
高中生物需要知道的选择培养基主要有:
1.以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌
2.不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物
3.培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
4.培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌
鉴别培养基主要有:
伊红--美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌
Ⅵ 鉴别培养基和选择培养基怎么分辨,分别举个
鉴别培养基加入一些化学物质,微生物的代谢产物什么的可以和这种物质发生反应,产生明显的变化,以便鉴别和筛选。
选择培养基是根据所要选择的微生物的特殊营养需求,在培养基中减少某种养分等操作,通过 抑制别的微生物的生长 ,来达到筛选所需微生物的目的。
Ⅶ 什么是选择性培养基什么是鉴别性培养基阐述各自的原理。
选择性培养基是通过条件的改变来筛选出来众多微生物中的一种,通常是在培养基中加入对其他杂菌抑制的药物来抑制其他类群的生长只留下想要的一种,或者不加其他类群所需的营养只留下这一种。鉴别性培养基只是要鉴定出混合菌中有这一种菌,通常都用鉴别的试剂加进去看反应结果就可以。
Ⅷ 选择培养基和鉴别培养基区别
选择培养基和鉴别培养基区别:
一、定义不同
选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。
鉴别培养基是指一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。
二、用途不同
选择培养基用于抑制大多数其他微生物的生长,或者造成有利于该菌生长的环境,一段时培养间后使得该菌成为优势菌。
鉴别性培养基用于鉴定不同微生物。
(8)鉴别培养基设计方法扩展阅读:
培养基注意事项:
确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。
同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。
另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自独立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。
Ⅸ 什么是选择性培养基什么是鉴别性培养基
选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。
鉴别性培养基又称鉴别培养基,一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。此类培养基一般用于鉴定不同微生物。