鉴别虫核酸的方法

A. 新冠核酸检测增加肛拭子采样，是否能更加有效的检测出病毒

新冠核酸检测增加肛拭子采样，的确能更加有效的检测出病毒，一部分感染者粪便或肛拭子核酸阳性的持续时间比上呼吸道持续时间更长，对于重点人群可以选择肛拭子采样。

如果已经被集中隔离观察了，或者有发热或其他不适，消化道有不适表现，是入境人员和感染者密切接触人员就需要更加全面的检测，加上咽拭子，鼻拭子，还会使用到肛拭子检测，能更加的准确，更好的减少漏网之鱼。肛拭子和鼻咽拭子就是一样的了，本人或者家属可以在12小时或24小时内拿到结果。 目前各地的疫情形势仍然严峻，疫情还处于紧张的阶段，希望大家能主动接受采样和筛查，有序排队参加检测配合医护人员工作，坚决打赢这场疫情防控阻击战，迎接春天的到来。

B. 请推荐虾肝肠胞虫的检测方法

目前已报道的虾肝肠胞虫检测方法主要为分子生物学方法，包括恒温荧光PCR法、原位杂交、普通核酸扩增（PCR）和实时定量荧光PCR等方法。据已有的研究，相对于普通PCR方法，恒温荧光PCR法灵敏度更高，可检测低于103个核酸拷贝量，而且简单快速，还可实时监控；而较于实时荧光定量PCR法，恒温荧光PCR法设备价格适中、性价比高。因此，对于亲虾孵化场来说最好采用恒温荧光PCR法进行检测，避免因样品的代表性和检测灵敏度问题导致阳性苗种流向市场。
使用ZYD-S1恒温荧光分子检测仪，配合虾肝肠胞虫（EHP）核酸检测试剂盒，利用恒温PCR法能够快速，简便地鉴别虾苗、亲虾是否感染虾肝肠胞虫，及早防控，避免经济损失。

C. 活的虫子怎样做标本

材料：昆虫针30支左右、适合大小的底板1块、小KT板2块、透明的塑料片

1、将昆虫放到还软缸里，几小时后，把回软好的昆虫从干燥皿里取出来。

D. 病毒鉴定常用方法有哪些

寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。
开展蚊媒寨卡病毒检测时，对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。
开展寨卡病毒实验室检测时，应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。
（一）临床标本检测。
1．病原学检测
病原学检测主要适用于急性期血液标本，一般认为发病7天内检测阳性率高。
（1）核酸检测：采用荧光定量RT-PCR方法，是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。
（2）病毒分离：将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK21、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。
2．血清学检测
（1）血清特异性IgM抗体：发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体，但发病7天后检出率高。可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应，易于产生假阳性。
（2）中和抗体：采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒感染，可以确诊。
（二）媒介标本检测。
1．标本处理
将分类后的伊蚊成蚊或幼虫，按照采集地点，每10～20只为一份进行研磨处理。
2．病毒核酸检测
用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测
3．病毒分离
病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。

E. 核算检测方法

第一步，采集分泌物。
首先，医务人员会使用咽拭子擦拭受检者鼻腔或者喉咙扁桃体处，采集唾液分泌物，这个过程其实蛮疼的。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
第二步，进行留样。
将人体分泌物采集出来以后，咽拭子浸到保存液中，将管子盖子旋好进行留样。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
3
第三步，样本送检。
然后，将样本装入到干净的密封袋中封好，送到相关部分进行检测。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
4
第四步，核酸提取。
相关部门将送来的样本，送到指定实验室做核酸提取实验。
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5
第五步，荧光PCR核酸检测。
核酸提取出来以后，再使用荧光PCR进行检测使用，检测是否有扩增反应，也就是判断阴性还是阳性。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
6
最后，出核酸检测报告。
最后，根据核酸检测的荧光PCR反应结果，得出核酸检测检车报告，本人查询结果即可。
核酸检测要经过哪些步骤 核酸检测步骤流程
END
方法总结
1
1、采集分泌物。
2、进行留样。
3、样本送检。
4、核酸提取。
5、荧光PCR核酸检测。
6、核酸检测报告。

F. 快速鉴定RNA和DNA的方法是什么

DNA和RNA的鉴别，较常用的方法是利用两类核酸中不同的戊糖各自具备的不同的颜色反应，而得以定性鉴别。其中鉴定DNA的方法称为二苯胺法，鉴定RNA的方法称为地衣酚（苔黑酚，3，5-二羟基甲苯）法。上述颜色反应不但可用于两类核酸的定性鉴定，也是定糖法定量测定核酸的依据。

G. 有谁提过马胃蝇幼虫DNA吗具体方法步骤是什么（如果答案很详细，我会追加财富值的）

(1).浓盐法
利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

（2）.阴离子去污剂法:
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.
（3）.苯酚抽提法:
苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

（ 4）.水抽提法:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS