‘壹’ 氯化铝测总黄酮步骤
首先进行样品溶液的制备,制备好样品后进行测试。
准备70%乙醇溶液,料液比1_8 ,80度下回流2h。 取10g样品放入圆底烧瓶中加入80ml, 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。3AlCl3法测定总黄酮含量准确移取一定量的芦丁标准溶液或箬叶总黄酮提取液于10mL容量瓶中,加入乙醇5mL,0.5mol.L-l三氯化铝溶液0.50mL,pH为5.4的HAc-NaAc缓冲液2mL,用水定容至10.00mL。显色20min后,在415nm下以不加AlCl3的试液为空白,测定吸光度。
‘贰’ 硝酸铝显色法测定总黄酮含量的原理是什么啊 所加试剂的作用是什么
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.
如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮, 再加硝酸铝络合,最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环,生成 2’羟基查耳酮而显色.
它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.
‘叁’ 黄酮抗氧化性活性的测定方法有哪些
1 抗氧化活性的化学评价方法
1. 1 FRAP 法
1. 2 TEAC 法
1. 3 DPPH 法
1. 4 ORAC 法
1. 5 TRAP 法
1. 6 TOSC 法
1. 7 F - C 法
2 抗氧化活性的生物评价方法
2.1CAP - e 法
2.2CAA 法
‘肆’ 如何快速检测物质中是否含有黄酮类物质
用有机溶剂例如四氢呋喃萃取之后,用HPLC(高效液相色谱)的方法检测其中是否含有黄酮类物质,这是定性,同时也可以做定量的方法。
使用TLC(薄层色谱)的方法可以进行定性的检测。注意需要至少用两种不同的展开剂使样品与标准品对比。
另外,也可以用将黄酮在碱性环境下与铝络合而形成的有色络合物,通过分光光度计检测的方法进行定量或半定量的检测。
‘伍’ 为什么用三种方法对黄酮进行定性分析
用机溶剂例四氢呋喃萃取用HPLC(高效液相色谱)检测其否含黄酮类物质定性同做定量
使用TLC(薄层色谱)进行定性检测注意需要至少用两种同展剂使品与标准品比
另外用黄酮碱性环境与铝络合形色络合物通光光度计检测进行定量或半定量检测
感觉这样的提问没有意义
建议自己下去查查资料
‘陆’ 总黄酮与单体黄酮的测定方法有什么不同
总黄酮采用芦丁为标准品即可测定,单体黄酮需要对应的标准品。
黄酮含量的测定方法:
1、 对照法
1)
① 对照品制备:精密称取芦丁对照品20.8mg,置于100ml容量瓶中,加70%乙醇使溶解并稀释至刻度,摇匀。
② 样品溶液制备
精密称取样品0.50g,精密加入70%乙醇50ml,称定重量,超声处理30分钟,称定重量,用70%乙醇补足减失重量,即得。
③ 标准曲线的制备
精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,分别置于25ml比色管中,加70%乙醇10ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加1mol/L氢氧化钠溶液10ml,加70%乙醇置刻度,摇匀,放置15分钟。各取10ml置于50ml容量瓶中,用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。
2)
①样品溶液的制备:
分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取,料液比1:15,提取两次,每次30min,将两次提取液合并浓缩至一定体积,用30%甲醇定容至50ml容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中,稀释至刻度,再从100ml容量瓶中取出1.5ml溶液,放至10ml容量瓶中,定容,为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择:分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线,均在350 nm 处有一强吸收,因此选择350 nm为测定波长。
③标准曲线的制定:
精密称取芦丁对照品10.3mg,用少量30%乙醇溶解后,转移至50ml容量瓶,用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml容量瓶中,于350 nm 波长处测定吸光值,以芦丁空白为参比,以芦丁浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线,提示在4.12~12.36mg/103ml浓度之间,吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。
④含量测定结果:
分别吸取2.2.1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中,按标准芦丁一吸光度测定法,以样液空白参比,于350nm 波长下测定吸光值,计算各提取液中总黄酮含量。
计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。
注:上式为通过回归方程转化而来,式中A为测得样品液的吸光度值,W为称样量。
‘柒’ 怎样准确建立总黄酮的检测方法
本人最近提取植物总黄酮,其主要成分含有芦丁、槲皮素、异槲皮素、金丝桃苷、紫云英苷等多种黄酮类化合物。经查阅《国药大典》,以芦丁作标样建立标准曲线: 精密称取芦丁25mg ,加甲醇定容至25 ml ,取10ml 并且用蒸馏水释至100 ml 。分别准确吸取0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6.0 ml 于25 ml 容量瓶中用10%甲醇定容各容量瓶至6ml,加含5 % NaNO2 水溶液1ml ,摇匀静置6 min ,再加含10 %Al (NO3) 3 水溶液1 ml ,摇匀静置6 min,再加含1. 0mol/L NaOH水溶液10 ml ,用蒸馏水稀释定容至刻度,摇匀静置16 min,在480~540 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长在508 nm处,得到芦丁浓度( x) 与吸光度( y) 的关系的回归方程。
‘捌’ 用芦丁测黄酮含量的方法
称取0.010g芦丁,用30%乙醇溶解并定容至100ml 的容量瓶中,制成0.1mg/ml的芦丁标准溶液。
分别吸取刚配制好的芦丁标液0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0ml置于6个50ml的容量瓶中,依次编号0~5,用30%乙醇补至10ml后,加入0.8ml的5%的NaNO2摇匀,静置6分钟再加入0.8ml的10%的硝酸铝摇匀,静置6min,加入10ml的1mol/l的氢氧化钠,摇匀15min后显色置于510nm处分光光度计测吸光度。
芦丁就是个标准 黄酮就是以芦丁为计量的.
测黄酮的吸光度,标准曲线上,读出黄酮含量就是芦丁含量。
‘玖’ 黄酮类化合物的含量测定方法哪些
黄酮类化合物的含量测定方法哪些
黄酮类化合物(flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基,第一位上的氧原子具碱性,能与强酸成盐,其羟基衍生物多具黄色,故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类,小部分以游离态(苷元)的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物,它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
盐酸-镁粉还原反应
取药材粉末少许与试管中,用乙醇或甲醇数毫升温浸提取,取提取液加镁粉少许振摇,滴加几滴浓盐酸,1-2min内即出现颜色。大多黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类显红-紫红色,黄酮类显橙色,异黄酮及查尔酮类无变化。如芦丁的盐酸镁粉反应中溶液由黄色变红色。
其他还原反应还有:盐酸-锌粉反应,黄酮、黄酮醇类常不显色,只有二氢黄酮醇类可被锌粉还原呈深红色;钠-汞齐反应,黄酮类成分可产生黄、橙、红等色;四氢硼钠(钾)反应,仅二氢黄酮醇类可被四氢硼钠还原呈红色,其他黄酮类不反应。
金属盐类试剂络合反应
黄酮类成分和铝盐、镁盐、铅盐、锆盐等试剂反应,生成有色的络合物,可供某些类型黄酮的鉴别。产生络合作用的条件是黄酮类成分必须具备下列条件之一,如5-羟基、3-羟基或邻二羟基。根据有色络合物的最大吸收波长,可进行定量测定。常用的试剂有三氯化铝、醋酸铅、醋酸镁与二氯氧化锆等试剂。