大肠杆菌种属鉴别方法

❶ 生理鉴别试验的原理和反应有哪些

细菌鉴定中常用的生理生化反应
〔目的要求〕了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应方法；通过对不同细菌对不同含碳、氮化合物的分解利用情况，了解基代谢多样性；学习不同培养基基中的不同生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义。
〔实验原理〕各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。细菌的这种代谢方式可供鉴别细菌之用。用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称为细菌的生理生化反应。有些细菌能发酵葡萄糖，而不能分解乳糖；有些细菌能分解某种糖产生有机酸和气体；有的细菌则只产酸不产气。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫（pH4.4红色～pH6.2黄色），当发酵产酸时，培养基由紫色变黄，气体的产生则可由试管中倒置的杜氏小管中有无气泡来判断。大肠杆菌不产生丁二醇，V.P.试验为阴性。其进行混合酸发酵，故甲基红试验为阳性。产气杆菌则进行丁二醇发酵，V.P试验为阳性，甲基红试验为阴性。
〔材料用具〕E.coli ，变形杆菌，枯草芽孢杆菌，产气杆菌，粪水中分离的未知菌种斜面，糖发酵培养基；超净工作台，恒温培养箱，试管，移液管，杜氏小管。甲基红试剂、V.P. 试剂。
〔实验步骤〕各取4支相应的培养基，标记好发酵培养基的名称、所接菌种名及组号，1支接大肠杆菌，1支接变形杆菌，1支接未知斜面菌种，1支不接。
1、 糖发酵试验
2、 甲基红试验
3、 V.P.试验
接种后37℃分别培养24h、48h、48h，观察实验结果，将实验结果填入表中。
〔实验结果〕

表7－1实验结果
编号大肠杆菌枯草芽孢杆菌产气杆菌未知菌CK葡萄糖发酵乳糖发酵甲基红实验V.P.试验〔实验讨论〕
如：讨论通过哪些生理生化反应可以区分大肠杆菌，产气杆菌？

大肠杆菌不产生丁二醇，V.P.试验为阴性。其进行混合酸发酵，故甲基红试验为阳性。产气杆菌则进行丁二醇发酵，V.P试验为阳性，甲基红试验为阴性。

❷ 怎么看出大肠杆菌

用依红-美蓝培养基鉴定，依红-美蓝培养基鉴 是一种鉴别培养基，是用来鉴别大肠杆菌的，若有大肠杆菌，则培养基会变成紫色，并带有金属光泽。

❸ 肠道杆菌的鉴定依据有哪些

大肠杆菌测定
伊红美蓝平板上典型大肠杆菌菌落接种到营养琼脂平板，在(36土1)℃培养18h -24 h 。每个平板至少挑选2个菌落。挑取上述菌落纯培养物接种3.6.3生化培养基和乳糖发酵管，(36士1)0C培养24h 后观察结果。
大肠杆菌与非大肠杆苗鉴别试验方法
靛基质试验:
滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 m L于靛基质试验培养基中混合，静置，观察结果。
出现红色环的为反应阳性;出现黄色环的为反应阴性。
甲基 红(MR)试验:
滴加甲基红指示剂0.2 m 1于MR-VP培养基中混合，观察结果。
出现红色为阳性反应;出现黄色为阴性反应。
维 培(VP)试验:
滴加VP试剂甲液0. 2 mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1mL混匀，静置，观察结果。在15min内出现红色的为阳性反应;无颜色变化的为阴性反应。阴性结果1h后再观察一次出现红 色也为阳性反应。
西蒙氏柠檬酸盐试验:观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应;不变色为阴性反应。
大肠杆菌鉴定结果
靛基质 MR VP 西蒙氏柠檬酸盐 鉴定
＋
－ ＋
＋ －
－ —
－ 典型大肠艾希氏杆菌
非典型大肠艾希氏杆菌
＋
－ ＋
＋ －
－ ＋
＋ 典型柠檬酸盐杆菌
非典型柠檬酸盐杆菌
－
＋ －
－ －
－ ＋
＋ 典型产气肠杆菌
非典型产气肠杆菌
如出现表1以外的生化反应类型，表明培养物可能不纯，应重新划线分离，必要时做重复试验。
结果报告
1M Vic 试 验结果为++一一、一+一一和乳糖发酵管产气者，查其EC肉汤产气管数及其稀释倍
数，对照附录B(资料性附录)中MPN检索表报告样品中大肠埃希氏杆菌MPN /a (mL)值

❹ 如何鉴别大肠杆菌和枯草芽包杆菌

1.装个涂片,用革兰氏染色,枯草芽孢杆菌革兰氏阳性菌,大肠杆菌是革兰氏阴性菌,显微镜看看就知道了。
2.划线分离,大肠杆菌的菌落湿润紧实圆溜溜的,枯草芽孢杆菌的菌落表面粗糙不透明。

❺ 水中大肠杆菌怎么分离鉴定啊

分离就是常规的涂平板
划线分离
大肠杆菌测定
伊红美蓝平板上典型大肠杆菌菌落接种到营养琼脂平板，在(36土1)℃培养18h
-24
h
。每个平板至少挑选2个菌落。挑取上述菌落纯培养物接种3.6.3生化培养基和乳糖发酵管，(36士1)0C培养24h
后观察结果。
大肠杆菌与非大肠杆苗鉴别试验方法
靛基质试验:
滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1
m
L于靛基质试验培养基中混合，静置，观察结果。
出现红色环的为反应阳性;出现黄色环的为反应阴性。
甲基
红(MR)试验:
滴加甲基红指示剂0.2
m
1于MR-VP培养基中混合，观察结果。
出现红色为阳性反应;出现黄色为阴性反应。
维
培(VP)试验:
滴加VP试剂甲液0.
2
mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1mL混匀，静置，观察结果。在15min内出现红色的为阳性反应;无颜色变化的为阴性反应。阴性结果1h后再观察一次出现红
色也为阳性反应。
西蒙氏柠檬酸盐试验:观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应;不变色为阴性反应。

❻ 如何鉴别大肠杆菌

大肠杆菌是革兰氏阴性细菌，用革蓝氏染色法能将其染成红色。而革兰氏阳性细菌则显紫色。
或者伊红美蓝平板培养
http://ke..com/view/29729.htm

❼ 怎样鉴别大肠杆菌

用依红-美蓝培养基鉴定，依红-美蓝培养基鉴
是一种鉴别培养基，是用来鉴别大肠杆菌的，若有大肠杆菌，则培养基会变成紫色，并带有金属光泽。

❽ 如何在光学显微镜下区分大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌

大肠杆菌：菌体大小0.5×（1～3）um，周身鞭毛
沙门氏菌：（0.6～0.9)×（1～3)um，有周身鞭毛
铜绿假单胞菌：菌体大小宽（(0.5～1)um×（1.5～5.0)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。

三种菌全部属于革兰氏阴性无芽孢杆菌，其中铜绿假单胞菌相对较大，可分辨。而大肠杆菌和沙门氏菌大小上相差无几很难分辨。

❾ 大肠杆菌怎么鉴定

大肠杆菌测定
伊红美蓝平板上典型大肠杆菌菌落接种到营养琼脂平板，在(36土1)℃培养18h -24 h 。每个平板至少挑选2个菌落。挑取上述菌落纯培养物接种3.6.3生化培养基和乳糖发酵管，(36士1)0C培养24h 后观察结果。

大肠杆菌与非大肠杆苗鉴别试验方法

靛基质试验:
滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 m L于靛基质试验培养基中混合，静置，观察结果。
出现红色环的为反应阳性;出现黄色环的为反应阴性。

甲基 红(MR)试验:
滴加甲基红指示剂0.2 m 1于MR-VP培养基中混合，观察结果。
出现红色为阳性反应;出现黄色为阴性反应。

维 培(VP)试验:
滴加VP试剂甲液0. 2 mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1mL混匀，静置，观察结果。在15min内出现红色的为阳性反应;无颜色变化的为阴性反应。阴性结果1h后再观察一次出现红 色也为阳性反应。

西蒙氏柠檬酸盐试验:观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应;不变色为阴性反应。

大肠杆菌鉴定结果
靛基质 MR VP 西蒙氏柠檬酸盐 鉴定
＋
－ ＋
＋ －
－ —
－ 典型大肠艾希氏杆菌
非典型大肠艾希氏杆菌
＋
－ ＋
＋ －
－ ＋
＋ 典型柠檬酸盐杆菌
非典型柠檬酸盐杆菌
－
＋ －
－ －
－ ＋
＋ 典型产气肠杆菌
非典型产气肠杆菌

如出现表1以外的生化反应类型，表明培养物可能不纯，应重新划线分离，必要时做重复试验。

结果报告
1M Vic 试 验结果为++一一、一+一一和乳糖发酵管产气者，查其EC肉汤产气管数及其稀释倍
数，对照附录B(资料性附录)中MPN检索表报告样品中大肠埃希氏杆菌MPN /a (mL)值

❿ 如何鉴定大肠杆菌

1、发酵法

这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。

采用这样的方式方法，还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等 。

2、滤膜法

该方法主要过程：加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中，然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁，再进行过滤，将滤膜放在 M-FC 培养基中，两者之间不能够有气泡，然后进行密封，存放温度为 44.5℃，存放时间约 24 h，直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。

然后记录数据，估算每一单位的水溶液菌群数量，然后进行大肠杆菌量值的换算 。

(10)大肠杆菌种属鉴别方法扩展阅读：

大肠杆菌是短杆菌，两端呈钝圆形，革兰阴性。有时因环境不同，个别菌体出现近似球杆状或长丝状 ；大肠杆菌多是单一或两个存在，但不会排列呈长链形状。

大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构，但是不能形成芽孢；多数大肠杆菌菌株生长有菌毛，其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛 。

生化特性

大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中，甲基红试验呈阳性，吲哚产生和乳糖发酵是阳性（个别菌株表现阴性），维-培试验是阴性，尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性（极个别菌株表现阳性），硝酸盐还原试验表现阳性，氧化酶表现阴性，氧化-发酵试验表现为F型