Ⅰ 常用的生物碱提取,分离方法是什么
一、生物碱的提取:
1.水或酸水提取法
(1)生物碱在植物体内都以盐的形式存在,常以无机酸水提取。使生物碱的大分子有机酸盐变为小分子无机酸盐,增大在水中的溶解度,且方法比较简便。
(2)常用0.1%~l%的硫酸、盐酸或醋酸、酒石酸溶液作为提取溶剂,采用浸渍法或渗漉法提取。
(3)主要缺点是提取液体积较大,浓缩困难,且水溶性杂质多。故用酸水提取后,一般可采用下列纯化和富集生物碱的方法:
1)阳离子树脂交换法
生物碱盐在水中可解离出生物碱阳离子,能和阳离子交换树脂发生离子交换反应,被交换到树脂上。交换完全后,用中性水或乙醇洗除柱中的杂质。最后,再用适当的方法(酸水或酸性乙醇)将生物碱从树脂上洗脱下来。
2)萃取法
将酸水提取液碱化,生物碱游离后,如沉淀,过滤即得;如不沉淀,以适当亲脂性有机溶剂萃取,回收溶剂,即得总生物碱。
2.醇类溶剂提取法
(1)游离生物碱或其盐均可溶于甲醇、乙醇,可用醇回流或渗漉、浸渍等方法提取。
(2)优点:适应性广,不同碱性的生物碱和盐均可用,提取出来的水溶性杂质较少。缺点:脂溶性杂质多。
(3)还可配合酸水-碱化-萃取法处理去除脂溶性杂质。
具体方法是醇提液回收醇后加稀酸水搅拌,滤过,滤液调碱性后以亲脂性有机溶剂萃取,回收溶剂即得总生物碱。
3.亲脂性有机溶剂提取法
(1)大多数游离生物碱都是亲脂性的,故可用氯仿、苯、乙醚等提取游离生物碱。可采用浸渍、回流或连续回流法提取。
(2)但一般要将药材用少量碱水湿润后提取,以便使生物碱游离,也可增加溶剂对植物细胞的穿透力。
(3)挥发性生物碱如麻黄碱可用水蒸气蒸馏法提取。可升华的生物碱如咖啡碱可用升华法提取。
二、生物碱的分离:
1.利用碱性差异进行分离
(1)总碱中各生物碱的碱性不同,可用pH梯度萃取法进行分离。
(2)将总生物碱溶于氯仿等亲脂性有机溶剂,以不同酸性缓冲液依pH由高至低依次萃取,生物碱可按碱性由强至弱先后成盐依次被萃取出而分离,分别碱化后以有机溶剂萃取即可。
(3)将总生物碱溶于酸水,逐步加碱使pH值由低至高,每调一次pH值,即用氯仿等有机溶剂萃取,则各单体生物碱依碱性由弱至强先后成盐依次被萃取出而分离。
2.利用溶解度差异进行分离
(1)游离生物碱:如苦参中苦参碱和氧化苦参碱的分离,可利用氧化苦参碱极性稍大难溶于乙醚,苦参碱可溶于乙醚的性质,将苦参总碱溶于氯仿,再加入10倍量以上乙醚,氧化苦参碱即可析出沉淀。汉防己中汉防己乙素极性大于甲素,故在冷苯中的溶解度小于甲素,借此可用冷苯法将两者分离。
(2)生物碱盐:不同的生物碱与不同酸生成的盐是溶解度也不同:如麻黄中分离麻黄碱、伪麻黄碱,即利用二者草酸盐的水溶性不同,提取后经处理得到的甲苯溶液,经草酸溶液萃取后浓缩,草酸麻黄碱溶解度小而析出结晶,草酸伪麻黄碱溶解度大而留在母液中。
3.利用特殊官能团进行分离
(1)酚性或含羧基生物碱在碱性条件下成盐溶于水,可与一般生物碱分离。
(2)内酯或内酰胺结构的生物碱可在碱性水液中加热开环生成溶于水的羧酸盐而与其他生物碱分离,在酸性下又环合成原生物碱而沉淀。
4.利用色谱法进行分离
(1)吸附柱色谱:常用氧化铝或硅胶作为吸附剂,有时也用纤维素、聚酰胺等。
(2)分配柱色谱:对某些结构特别相近的生物碱,可采用分配色谱法。
(3)其他:高效液相色谱、制备性薄层色谱、干柱色谱、中压或低压柱色谱等也常用于分离生物碱。
Ⅱ 用HPLC测定苦参碱是用C18柱还是氨基柱好
HPLC一般指高效液相色谱 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统
Ⅲ 生物碱的主要沉淀试剂有
生物碱(alkaloid)是一种天然的含氮有机化合物,中药中重要的有效成分之一,主要存在于多种植物体内,种类多,根据结构的不同可分为12种,大多具有显着的生理活性。
生物碱检测
生物碱检测方法
1. 酸性染料比色法:主要利用生物碱与酸性染料发生化学反应,生成有色离子对,离子对定量溶于某些有机溶剂,最后对其进行比色测定。一般用于总生物碱含量的检测。按酸性染料的不同,酸性染料比色法可以分为溴甲酚绿法、澳麝香草酚蓝法和甲橙提取比色法。比色法操作繁琐、结果重现性差、稳定性低。
2. 薄层色谱法:是用微量注射器分别吸取一定量样品及标准品溶液点在高散薄层板上,吹干,分别以不同的展开剂展开,挥干溶剂,Drangendorff试剂显色。薄层色谱法分离效果较好、重现性良好,但样品需纯化。
3. 近红外光谱法:适用于复杂天然产物的定性定量分析。无需制备样品、在建立可靠的校正模型后,可直接对包装材料中的样品进行无损检测,快速、无污染、低成本、多组分同时检测,非常适用于工业现场的在线检测和原位分析。
4. 气质联用法:适用于具有挥发性且遇热不分解的部分生物碱,如苦参碱、麻黄碱、槟榔碱等。GC-MS法分离效果好、灵敏度高、重现性好。
5. 高效液相色谱法:HPLC具有分离效率高(一般一次分离仅需几十秒钟至几分钟)、灵敏度高、样品用量少、自动化在线检测、成本低、模式多样等特点。HPLC可分别与紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器、蒸发光检测器、电化学检测器联合使用,都可检测生物碱的含量,而且得到的结果准确度高。
迪信泰检测平台以液相/气相分享为依托,建立了高效液相色谱/液质联用/气质联用等生物碱检测平台,同时拥有紫外、二极管阵列、蒸发光等多种检测器,满足您的不同需求。目前,迪信泰检测平台可检测荷叶碱、长春质碱、苦参碱、贝母素甲/乙、异莲心碱等20多种生物碱。
Ⅳ 谁了解苦参提取物对未分化癌是否真的有效果.
苦参提取物目前国内外研究最多是苦参碱,下面这篇文章你看一下有帮助吗?
苦参碱抗肿瘤作用及其机制的初步研究中华首席医学网 2007年11月01日 22:35:18 Thursday 点击次数:22
作者:马玲娣 张彦 文世宏 何于娟 刘小珊 康格非 蒋纪恺
作者单位:南京医科大学附属常州第二人民医院中心实验室,常州 213003
《中国免疫学杂志》2007年5月23卷5期 中医中药与免疫
加入收藏夹 【摘要】 目的:研究中药苦参碱(Matrine)的抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法:MTT比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期的改变。建立荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算肿瘤生长抑制率;MTT法测定苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖作用的影响;ELISA法检测苦参碱治疗后小鼠血清中IL�2和IL�12的活性。结果:苦参碱可显着抑制小鼠肿瘤细胞的体外分裂和增殖,且抑制作用呈浓度和时间依赖性,使G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞增殖指数降低。苦参碱对小鼠实体瘤生长具有显着抑制作用,抑瘤率高达60.7%以上;明显抑制小鼠静止PBMC的体外增殖作用;不能提高荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12的含量。结论:苦参碱具有较强的抗肿瘤作用,体内体外却表现出一定的免疫抑制作用,提高机体的免疫功能不是苦参碱发挥抗癌活性的主要机制。
【关键词】 苦参碱;肿瘤;免疫调节
Preliminary studies on anti�tumor activies of matrine and its immunological mechanism
MA Ling�Di, ZHANG Yan, WEN Shi�Hong, HE Yu�Juan, LIU Xiao�Shan, KANG Ge�Fei, JIANG Ji�Kai.
The Central Laboratory, the Second Changzhou Hospital, Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Changzhou 213003, China
〔Abstract〕 Objective:To explore the inhibitory effects of matrine on tumor growth and the possible mechanisms related to immunological functions.Methods:The tumor cell growth repression rate was measured by MTT colorimetry. Flow cytometry was used to analyze the cell cycle of H22 cells. The H22 BALB/c xenograft tumor models were established. The anti�tumor effect of matrine was observed and tumor growth inhibitory rate(IR) was calculated. The effect of matrine on the proliferation of peripheral blood mononuclear cell(PBMC) separated from H22 tumor�bearing BALB/c was determined by MTT assay in vitro; the content of serum IL�2 and IL�12 were examined by ELISA assay.Results:Matrine inhibited proliferation of the H22 tumor cells in both time and concentration�dependent manners, with increased the cell numbers at G1 phase and decreased numbers at S and G/M phase showing the possible mechanism for lowering cell proliferation rate. The tumor inhibition rate of matrien came up to 60.7% in tumor�bearing mice. Matrine significantly suppressed the proliferative activity of PBMC from tumor�bearing mice. Furthermore, martine could not increase the contents of murine serum IL�2 and IL�12.Conclusion:Matrine could inhibit tumor cell growth directly but not exert the anti�tumor efficiency through reinforcing the immune function.
〔Key words〕Matrine;Tumor;Immunoloregulation
苦参碱是我国传统中药苦参中提取出的一种主要的活性成分,具有消炎抗菌、抗过敏、抗心率失常等多种药理学作用〔1,2〕。我们多年来的研究表明,苦参碱在体外可诱导人白血病细胞K562向正常形态分化,有效抑制K562细胞的体外增殖〔3,4〕。随着对苦参碱提纯和药效作用的深入研究,发现苦参碱还具有抗肿瘤作用,但目前对苦参碱抗肿瘤尤其是抗实体瘤方面的研究还不够深入,其体内外的抗肿瘤机制仍不明了,尤其是与荷瘤机体免疫功能之间的关系还是未知。为了认识苦参碱抗癌作用的机理和特点,我们选用小鼠H22肝癌细胞为研究对象,建立荷H22肝癌移植瘤小鼠模型,观察了苦参碱对H22细胞的抑制作用和其对荷瘤小鼠免疫功能的影响,以期探讨苦参碱抑瘤作用与机体免疫功能之间的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
苦参碱购自陕西省科学院西安植物园植物化学开发研究所,纯度为99.9%;RPMI1640培养基Gibco公司产品;胎牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品;刀豆蛋白A(Con A)及MTT〔3�(4,5)�双甲基�2�噻唑�(2,5)�二甲基溴化四氢唑盐〕均为美国Sigma公司产品;小鼠淋巴细胞分离液:天津灏阳生物制品科技有限责任公司出品;IL�2和IL�12 ELISA kit购自广州晶美生物过程有限公司;环磷酰胺(CTX)为上海华联制药有限公司产品,200 mg/支,批号000211;H22腹水型小鼠肝癌细胞由重庆医科大学基础医学院病理生理教研室惠赠;SPF级BALB/c小鼠,重庆医科大学实验动物中心提供;96孔细胞培养板:丹麦Duke公司;CO2培养箱:德国Heraeus公司;光学显微镜:日本Olympus;酶联免疫吸附检测仪美国Bio�Rad MODEL550型;电子数显游标卡尺:广州一途电子有限公司YT�203型。
1.2 方法
1.2.1 苦参碱对H22细胞生长的影响
收集对数生长期H22细胞,调整浓度为5×104 ml-1,接种于96孔细胞培养板中,每孔200 μl,实验分为实验对照组(只加试剂)和阴性细胞对照组(只加RPMI1640培养液)。实验组中加入终浓度分别为0.2、0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml的苦参碱。每种浓度均设8个平行孔。培养板置于37℃、饱和湿度、5%CO2孵箱中常规培养44小时后,离心弃上清,各孔均加入RPMI1640 200 μl,5 mg/ml MTT溶液20 μl,继续培养4小时,离心弃上清,加入二甲基亚砜200 μl,振荡器上振荡5分钟溶解蓝色结晶,混匀后以酶标仪于570 nm处读取各孔吸光度值(A570),计算肿瘤细胞的生长抑制率。
细胞生长抑制率(%)=1-实验组A570均值对照组A570均值×100%。
1.2.2 苦参碱对H22细胞周期的影响
取对数生长期H22细胞,调整浓度为3×105 ml-1/20 ml,接种于100 ml细胞培养瓶中,加入苦参碱,使其终浓度分别为0.5、1.0和1.5 mg/ml,37℃、饱和湿度、5%CO2培养48小时后收获细胞,PBS洗涤2次,70%冷乙醇固定,RNase消化,碘化丙啶(PI)室温染色30分钟后,经流式细胞仪检测细胞周期时相分布,计算细胞增殖指数(PI)。
PI(%)=S+G2/MG1+S+G2/M×100%。
1.2.3 荷H22肝癌移植瘤小鼠模型的建立
对数生长期H22细胞,以RPMI1640调整细胞浓度为5×106 ml-1,于BALB/c小鼠左侧下腹部行无菌皮下接种,接种量为0.2 ml细胞悬液,细胞总数为1×106个。接种24小时后称重分组,将BALB/c小鼠随机分为4组:苦参碱高浓度组(Mhigh)和低浓度组(Mlow),给药量分别为50 mg/kg体重和100 mg/kg体重;阳性对照组给予20 mg/kg体重的CTX;阴性对照组(N.S control)给予等量无菌生理盐水。每组小鼠20只,每日以腹腔注射(i.p)方式给药,0.2 ml/只,隔日1次,连续注射7天。
1.2.4 苦参碱对H22荷瘤小鼠移植瘤生长情况的影响
停药后次日处死小鼠,剥出瘤体称重,计算肿瘤生长抑制率(IR)。
抑瘤率(%)=对照组平均瘤重-治疗组平均瘤重对照组平均瘤重×100%。
1.2.5 苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖反应的影响
1.2.5.1 小鼠外周血单个核细胞(PBMC)的分离〔5〕
BALB/c小鼠颈椎脱臼致死,无菌取脾,盛有无菌Hanks液的平皿中轻轻捻碎脾组织,以250目不锈钢筛网过滤,收集得到脾细胞悬液。用小鼠淋巴细胞分离液按常规方法操作,分离得到小鼠PBMC悬液。台盼蓝染色计数活细胞数95%以上,以含10%胎牛血清的RPMI1640配成1×106 ml-1细胞悬液。
1.2.5.2 苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖反应的影响〔6〕
试验组为含有5 μg/ml ConA的小鼠PMBC悬液,内加入不同浓度的苦参碱溶液,使其终浓度分别为100、200和500 μg/ml。阳性对照组仅含5 μg/ml ConA,空白对照组为加入等体积PBS溶液。将上述细胞悬液分别加入到96孔细胞培养板中,每孔200 μl,试验组和对照组均设6个复孔(n=6)。加好样品的96孔培养板置于37℃、5%CO2的孵箱中培养72小时, MTT法步骤同前述。根据以下公式计算刺激指数(SI):
SI(%)=实验孔A570均值对照孔A570均值×100%。
1.2.6 苦参碱对荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12水平的影响〔7〕
各组小鼠停药后次日摘眼球放血,静置后离心(3 000 r/min,10分钟)分离血清。ELISA法检测荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12的活性。
1.2.7 统计学处理
实验数据以x±s表示,多组间差异性比较采用方差分析(one way ANOVA),使用SPSS 10.0统计学软件进行分析。
2 结果
2.1 苦参碱对H22细胞生长的抑制作用
0.2 mg/ml苦参碱作用于H22细胞48小时后,细胞生长被抑制2%左右,0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml苦参碱均可显着抑制H22细胞的增殖,生长抑制率分别为15%、54%、86%和92%,且抑制作用呈剂量�效应依赖性,见表1,提示苦参碱可直接杀伤体外培养的H22细胞,具有较强的细胞毒作用。表1 苦参碱对H22细胞的增殖抑制作用(略)
2.2 苦参碱对H22细胞细胞周期的影响
0.5、1.0和1.5 mg/ml苦参碱作用48小时后G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,作用具有明显的剂量依赖性,见表2,显示苦参碱可有效抑制细胞周期的正常转换,使细胞在G1期堆积,细胞阻滞于G2/M期,从而阻止细胞的有丝分裂,使细胞增殖受到抑制。表2 不同浓度苦参碱对H22细胞周期的影响(略)
2.3 苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用
苦参碱处理组小鼠的瘤体体积分别为(10.00±3.8)mm3和(12.19±5.4)mm3,明显小于N.S对照组小鼠瘤体体积(40.04±9.7)mm3,成瘤时间也明显晚于N.S对照组;50 mg/kg和100 mg/kg剂量苦参碱的抑瘤率分别为60.71%和63.53%,明显高于对照组(P<0.01),抑瘤效果接近CTX;高浓度组与低浓度组的抑瘤效果接近,无明显量效差异(P>0.05),见图1。
2.4 苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖反应的抑制作用
苦参碱单独作用时,明显抑制小鼠静止PBMC的体外增殖,SI小于PBS对照组(P<0.01),对ConA活化了的小鼠PBMC增殖表现出一定的协同刺激作用,但刺激作用随苦参碱浓度的增高而降低,见表3。表3 苦参碱对小鼠PBMC体外增殖活性的影响(略)
2.5 苦参碱对荷瘤小鼠血清中IL�2和IL�12水平的影响
苦参碱治疗后,血清中IL�2和IL�12的水平没有明显改变(P>0.05),提示苦参碱不能促进荷瘤小鼠合成和分泌IL�2和IL�12,见表4。表4 苦参碱对荷瘤小鼠IL�2和IL�12水平的影响(略)
3 讨论
本研究中,我们通过体内外实验观察了苦参碱对小鼠H22肝癌细胞的作用,发现苦参碱作用后H22细胞分裂相减少,胞内颗粒明显增多,大量空泡出现,显示出较强的细胞毒性。苦参碱对H22细胞的增殖抑制作用具有时间和浓度的依赖性,低浓度苦参碱对H22细胞的抑制作用不明显,而0.5 mg/ml及更高浓度的苦参碱则可使细胞数量明显减少,增殖受到明显抑制。此外,苦参碱可使G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞阻滞于G1→S期;细胞增殖指数降低,与细胞增殖抑制试验的结果相一致,表明苦参碱可以影响肿瘤细胞内DNA的复制和合成,抑制细胞的正常分裂;抑制细胞进入S期,从而使细胞在G1期堆积,出现G2/M阻滞,从而抑制细胞的增殖〔8〕。
苦参碱对小鼠H22实体瘤的生长也有明显的抑制作用,抑瘤率达60%以上。实验过程中发现,给以苦参碱治疗的部分小鼠给药后15天始终未形成明显的肿瘤结节,仅在接种处的皮肤表面出现紫红色溃疡性结痂,另有部分小鼠实验初期出现了肉眼可见的皮下肿块,但随着治疗的进行,肿块逐渐缩小至不见;苦参碱治疗后的小鼠,皮下瘤块的出现时间也普遍晚于对照组1~2天, 肿瘤生长速度也明显减慢,表明苦参碱能显着抑制小鼠肿瘤的发生和发展。由于实验中采用的是经腹腔注射的全身给药方式,可以排除苦参碱局部用药产生的毒性作用,表明苦参碱的抑瘤作用是通过机体自身的抗肿瘤机制起作用。
本研究发现,苦参碱不管是对荷瘤小鼠静止PBMC以及ConA活化了的PBMC的体外增殖反应都具有一定的抑制作用,显示了苦参碱在抗肿瘤同时,对免疫功能有一些抑制作用〔9,10〕。抗肿瘤免疫应答反应中,IL�2和IL�12是调节机体细胞免疫功能的两种重要的细胞因子,但本研究结果显示,苦参碱作用前后,小鼠血清中IL�2和IL�12的水平无明显改变,提示苦参碱对小鼠的抗肿瘤细胞免疫应答反应没有明显促进作用〔11〕。
以上研究结果表明,苦参碱对肿瘤所致的小鼠免疫功能低下状态没有明显改善,体内体外实验中都显示出了一定的免疫抑制效应,其抗肿瘤作用主要不是通过提高机体的免疫功能来实现的,还存在有其他的作用机制。
【参考文献】
1 肖培根. 新编中药志 〔M〕. 北京:化学工业出版社, 2002:555�561.
2 刘 梅,刘雪英,程建峰.苦参碱的药理研究进展 〔J〕. 中国中药杂志,2003;28(9):801�804.
3 Zhang Y,Jiang J K,Liu X S et al. Differentiation and apoptosis in K562 erythroleukemia cells inced by matrine 〔J〕.Natural Medicine,1998;52(4):295�298.
4 Zhang L P,Jiang J K,Tam J W et al. Effects of matrine on proliferation and differentiation in K562 cells 〔J〕. Leuk Res,2001;25(9):793�800.
5 沈关心,周汝麟. 现代免疫学实验技术 〔M〕. 武汉:湖北科学技术出版社, 2002:396�398.
6 杨 镇. 肿瘤免疫学 〔M〕. 武汉:湖北科学技术出版社, 1998:31�64.
7 金伯泉.细胞和分子免疫学 〔M〕.第2版.北京:科学出版社,2001:475�479.
8 司维柯,尚桃元,康格非. 苦参碱对人肝癌细胞HepG2的细胞形态学影响和相关增殖因素的变化 〔J〕.第三军医大学学报,2000;22(6):553�556.
9 毛慧生, 刘洪隐, 李 川 et al. 苦参碱对肿瘤细胞恶性表型及免疫功能的调控作用 〔J〕. 中国肿瘤临床, 1996; 23(11): 799�803.
10 冯亚珍,周 蓉,李秀枝 et al. 苦参碱调节免疫功能的实验临床研究进展 〔J〕. 中华实验和临床病毒学杂志,1996;16(5):308�310.
11 曹雪涛. 白细胞介素2的基础与临床 〔M〕. 北京:北京科学技术出版社, 1990:80�98.
Ⅳ 苦参碱能喷李子树吗在开花前可以吗
如果喷,尽量早些。
李子在开花期间,不要打什么农药,以免影响座果。李子树是异花授粉植物,在开花期间需要蜜蜂等昆虫帮助其完成授粉,在此期间不能喷洒杀虫剂。
苦参碱是由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成的, 是一种生物碱。苦参总碱是苦参所有生物碱的统称(苦参总碱检测方法为滴定法),其主要成分有苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱等多种生物碱,以苦参碱、氧化苦参碱含量最高。其他来源为苦豆子果实,山豆根及山豆根地上部分,纯品外观为类白色至白色粉末。苦参素农药的使用方法:
苦参碱是天然植物性农药, 对人畜低毒, 是广谱杀虫剂,具有触杀和胃毒作用。对各种作物上的黏虫、菜青虫、蚜虫、红蜘蛛有明显的防治效果。害虫一旦触及本药,即麻痹神经中枢,继而使虫体蛋白质凝固,堵死虫体气孔,使害虫窒息而死。速效性差,应搞好虫子情预测预报,在害虫毛虫,菜青虫,低龄期施药防治。对于水生动物的毒性尚不明确。按照苦参碱降解的速度,一般毒性很低,首先要确定喷药浓度是否合适,另外喷药的高毒,喷到茎叶,不到达稻田根部应该对扣蟹危害不大。
配比:0.3% 苦参碱水剂、1% 苦参碱醇溶液、0.2% 苦参碱水剂、1.1% 苦参碱粉剂、1% 苦参碱可溶性液剂。
使用方法:
防治蔬菜虫害:青虫、小菜蛾、谷子黏虫等 在卵孵化高峰期到低龄幼虫期(2~3龄)喷药,每667平方米使用0.3%水剂100~150克,或0.36%水剂80~120克,或1%可溶性液剂30~45毫升,或2%水剂1 5~20毫升,兑水40~50千克均匀喷雾。该药剂对低龄幼虫效果好,对4~5龄幼虫敏感性差。
防治果树虫害:在害螨迅速发生初期开始喷药,10~15天1次,连喷2次。一般使用0.3%水剂250~300倍液,或0.36%水剂300~350倍液,或1%可溶性液剂800 --1 000倍液,或2%水剂1 500~2 000倍液均匀喷雾。
防治地下虫害:每667平方米使用o.3%水剂700~1300毫升,或o.3 6%水剂600~1 200毫升,或1%可溶性液剂200~400毫升,或2%水剂100~200毫升兑水后灌根处理。
Ⅵ 氧化苦参碱的简介
氧化苦参碱又名苦参素.
植物来源:本品系从豆科属植物苦参(Sophora flavescens Ait.)或平科植物广豆根(Sophora subprostrata Chun et T.Chen)中分离出来的生物碱。
英文名称:Oxymatrine
CAS NO: 16837-52-8
熔点及溶解度:mp.162℃~163℃(水合物),207℃(无水物),溶于水,氯仿,乙醇,难溶于乙醚,甲醚,石油醚。
分子式及分子量:分子式C15H24N2O2;264.36
分子结构:
有效成份:Matridin-15-one,l-oxide.(1β)-;C15H24N2O2
应用剂型:胶囊 针剂
规格含量:98%
检测方法:HPLC
产品形状:透明颗粒结晶
物理性质:熔点207℃-208℃,易溶于水、甲醇、氯仿、苯,难溶于乙醚
生产工艺:主要由水提、萃取、结晶等工序完成
保存方法:阴凉干燥、避光、避高温
保 质 期:2年(暂定)
Ⅶ 苦参碱溶解性及稳定性
苦参碱
熔点及溶解度:mp.76℃,溶于水,苯,氯仿,乙醚和二氧化碳,难溶于石油醚。
植物来源:豆科植物苦参Sophora flavescens的干燥根。
英文名称:Matrine
别名:母菊碱
C15H24N2O 248.37
本品系从豆科槐属植物苦豆子(Sophora alopecuroides L.)果实或地上部分提取的一种生物碱。按干燥品计算,含C15H24N2O 不得少于98.0%。
【性状】 本品为白色针状结晶或结晶性粉末;无臭,味苦;久置露空气中,有引湿性,并变为淡黄色。
本品在乙醇、氯仿、甲苯、苯中极易溶解,在丙酮中易溶,在水中溶解,在热水、石油醚中略溶。
比旋度 取本品,精密称定,加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含20mg的溶液,依法测定(中国药典2000年版二部附录Ⅷ L)比旋度为+31.0°至+36.0°
【鉴别】(1)取本品约5mg,加稀盐酸10ml溶解后,分置两支试管中,一管中加碘化汞钾试液1滴,生成白色沉淀;另一管中加碘化铋钾试液1滴,生成橙红色沉淀。
(2)取本品与苦参碱对照品 分别加流动相制成每1ml约含0.08mg的溶液,照有关物质项下的方法试验,供试品主峰的保留时间应与对照品的保留时间一致。
【检查】碱度 取本品0.2g,加水40ml溶解后,依法测定(中国药典2000年版二部附录Ⅵ H),pH值应为9.5~10.5。
溶液的澄清度与颜色取本品0.5g,加水25ml溶解后,溶液应澄清无色。如浑浊,与1号浊度标准液(中国药典2000年版二部附录Ⅸ B)比较,不得更浓。如显色,与黄色1号标准比色液(中国药典2000年版二部附录Ⅸ A)比较,不得更深。
氯化物 取本品0.5g,依法测定(中国药典2000年版二部附录Ⅷ ),与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较,不得更浓(0.01%)。
干燥失重 取本品,先在60~70℃加热干燥1~2小时,再升高温度至105℃,干燥至恒重,减失重量不得过1.0%(中国药典2000年版二部附录Ⅷ L)。
炽灼残渣 取本品2.0g,依法检查(中国药典2000年版二部附录Ⅷ N),遗留残渣不得过0.1%。
重金属 取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(中国药典2000年版二部附录Ⅷ H),含重金属不得过百万分之二十。
有关物质 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)测定,以氨基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-磷酸水溶液(pH2.0)-无水乙醇(80:10:8)为流动相;检测波长为220nm;理论板数按苦参碱峰计算,应不低于1000。
测定法 取本品适量,加流动相分别制成每1ml中含0.5mg的溶液作为供试品溶液与每1ml含0.001mg的溶液作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高为记录仪满量程的20%;再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分保留时间的2倍,供试品溶液色谱图中各杂质峰面积之和不得大于对照品溶液主峰面积(2%)。
【含量测定】取本品约0.2g,精密称定,置锥形瓶中,精密加入硫酸滴定液(0.05mol/L)20ml,加甲基红指示液2滴,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显微黄色,并将滴定的结果用空白试验校正,每1ml硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于24.84mg的C15H24N2O。
【作用与用途】抗菌消炎药。抗肝炎药。
【贮藏】遮光,密闭,凉暗处保存。
【制剂】(1)苦参碱栓(2)苦参碱注射液
【有效期】暂定2年。
苦参碱的主要药理作用如下:
A、 保肝、护肝作用:苦参碱可减少肝细胞损伤,并促进其再生,改善肝脏微循环,以利胆红素的摄取、结合与排泄,从而达到抗炎、保肝扩肝以及退黄降酶的功效,最终使肝病理组织学得到明显改善;
B、 抗病毒:苦参碱对HBV-DNA的复制有明显的抑制作用,使肝炎患HBeAg转阴率达51%,抗HBc--lgM转阴率达50%;
C 、抗肿纤维化:主要通过保护肝细胞膜,抑制纤维化因子的释放,调控贮脂细胞(HSC)的功能等多个环节发挥抗肝纤维化的作用;
D 、双向调控免疫,有效改善病理性组织;
E 、抗肿瘤作用:主要通过抑制细胞膜上Na,k-ATP酶并激活腺苷酸环化酶,进而抑制肿瘤细胞生长作用;同时,苦参碱还可抑制肿瘤细胞与内皮细胞的粘附,从而减少肿瘤的转移等;
F 、 毒理试验证实苦参碱对动物呼吸系统及心血管系统无明显影响,急性毒性LD50为64.4mg/kg。长期毒性试验未发现有毒理意义的病理损伤,致突变试验均为阴性,表明本品没有明显毒性。
临床应用:苦参碱在1958年首次被分离和确认,是一类独特的生物碱(喹里西啶生物碱,也称羽扇生物碱tetracyclo-quinolizindine alkaloids), 存在于Sophora类植物中,主要用来治疗癌症,病毒性肝炎,白细胞减少症,支气管哮喘和喘息型气管炎,心脏病(例如病毒性心肌炎),细菌性痢疾及肠炎,以及皮肤病牛皮癣和湿疹(psoriasis and eczema)等。
Ⅷ 苦参碱的作用和使用方法是什么
(1)英文通用名 matrine(2)商品名称 绿诺、绿地1号、绿酶、绿宇、碧绿、绿小青、京绿、绿丫丹1号、绿丫丹2号、维绿特、家稼乐、蚜螨敌、五丰、杀确爽等。
(3)剂型 0.3%高渗水乳剂,0.3%、0.38%、0.8%、2.5%乳油,0.2%、0.3%、0.5%水剂0.38%、1.1%粉剂,1%可溶性液剂。
(4)性质和作用 苦参碱是从苦参的根、茎、叶片、花中分离提取得到的植物天然性农药。该产品低残留、无污染、无公害,对人畜低毒,对作物安全,不易产生抗药性,同时有促进作物生长的作用。
中国农业大学农药教学科研实验基地开发的杀确爽(1%苦参碱可溶性液剂)是全国农业技术推广服务中心推荐产品,杀虫广谱,具有触杀、胃毒作用。害虫接触后,首先作用于神经系统,麻醉中枢神经,后中枢神经产生兴奋,进而作用于横膈膜及呼吸肌神经,使害虫窒息死亡。对多种作物上的鳞翅目害虫,蚜虫、叶螨类等均有较好的防治效果。
(5)使用方法①防治枣、苹果、梨、桃等果树的食心虫、卷叶虫、潜夜蛾、尺蠖、毛虫、刺蛾等害虫,在幼虫入果之前和低龄幼虫期,每亩用杀确爽4号0.2~0.5克有效成分喷雾,或用1200~1500倍杀确爽3号或杀确爽4号喷雾,可有效防治之。
②防治枣、苹果、梨、桃等果树的蚜虫、叶蝉等害虫,在其发生初期,每亩用0.5~1克有效成分喷雾,或用1200~1500倍杀确爽2号、杀确爽5号喷雾,可有效的防治。
③防治枣、苹果、梨、桃等果树及棉花的红蜘蛛、木虱等和小菜蛾、棉铃虫、菜青虫等抗性害虫,在发生初期和低龄幼虫期,每亩用0.8~1.5克有效成分喷雾,或用1000~1500倍杀确爽3号或杀确爽6号喷雾,可有效的防治。
(6)注意事项①使用时应遵守农药使用保护规则,作好个人保护。
②贮存在避光、阴凉、通风的环境条件处。
③严禁与酸性农药混用。
Ⅸ 苦参碱(生物碱)生物碱提取物分离纯化注意事项
苦参碱属于一种生物碱,具有一定的生物毒性,可以用作杀虫剂的添加剂。通常我们从豆科植物苦参中进行天然提取;提取方式可以借鉴常规的植物提取物;在该产品的分离纯化方面需要主要好以下几个方面;
1.首先我们尽可能的要在源头上进行分析,检测把控、评估及成本核算。目的是选择出来适合于工业提取的原材料;
2.其次提取方面参展常规的提取方式进行提取;
3、然后难点在于杂质和目标物苦参碱的分离方面,通常有溶剂萃取和柱层析方式可以进行;柱层析方面,目标物性质不同,对于树脂的性能要求也有很大差异(孔道、极性、官能团、粒径等指标),因此首先选择好合适的树脂类型至关重要。国内西安蓝晓科技分离纯化填料、技术整套设备方面非常全面,有专门针对苦参碱的树脂LSD-001;同时有成熟的层析相关经验可以咨询其技术人员;
4、最后是整个工艺的把控,需要建立并且控制工艺方面各关键技术点,做到工艺和产品的平稳;
欲了解产品请点击链接:https://lanxiao.1688.com/
Ⅹ 液相苦参碱检测方法
一、 色谱条件:
色谱柱:ODS柱子
检测波长:220nm
流动相: 乙腈:磷酸水溶液(PH:2.0):无水乙醇
80 :10 :8
流速:1ml/min
灵敏度:0.01AUFS
柱温:室温
进样量:10μl
二、 溶液制备:
1. 对照品溶液制备:
精密称取苦参碱对照品约5mg于50ml容量瓶中,加流动相溶液定容。
2. 样品溶液制备:
精密称取苦参提取物样品适量于50ml容量瓶中,加入约30ml流动相超声振荡30min后,静置至室温流动相定容,用0.45μm滤膜过滤即得。