活细菌的鉴别方法

‘壹’ 细菌要怎样识别

单个细胞是无色透明的，为了便于鉴别，需要给它们染上颜色。1884年丹麦科学家革兰姆创造了一种复染法，就是先用结晶紫液加碘液染色，再用酒精脱色，然后用稀复红液染色。

经过这样的处理，可以把细菌分成两大类，凡能染成紫色的，叫革兰氏阳性菌；凡被染成红色的，叫革兰氏阴性菌。这两类细菌在生活习性和细胞组成上有很大差别，医生常依据革兰氏染色法，选用药物，诊治疾病。为纪念革兰姆，复染法又称革兰氏染色法。

细菌家族的成员，如果固定在一个地方生长繁殖，就形成了用肉眼能看见的小群体，叫菌落。菌落带有各种绚丽的色彩，如绿脓杆菌的菌落是绿色的，葡萄球菌的菌落是金黄色的。

细菌菌落的形状、大小、厚薄和颜色等特点，是鉴别各种菌种的依据之一。弗莱明就是通过观察到金黄色的葡萄球菌落减少或消失，从而发现“吃”掉葡萄球菌的青霉素，划时代地揭开了抗生素的秘密。

‘贰’ 细菌鉴定办法有哪些，常见细菌的鉴定办法就可以

细菌的鉴定通过分离培养获得的病原菌，必须达到不含有其他微生物的纯培养程度，才能进行系统鉴定。系统鉴定就是通过病原菌的形态结构、生长特性、抗原性和病原性等检测，并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型。微生物鉴定的程序通常是根据其形态，生长、生化特性等定种，最后根据抗原的免疫血清学检查定型。(一)形态学检查各种细菌的形态，在适宜的环境下是相对稳定的。但环境的改变，如培养基条件的改变，抗生素和化学药品的作用等，均可使细菌产生不规则的形态，并可出现细胞壁的缺陷和多样性。为此，在作细菌形态鉴定时，必须按被检菌的生长要求，选择适宜的培养基和培养条件，以及适宜的培养时间和检查方法，才能作出正确的形态学鉴定。形态学检查一般包括二方面：肉眼观察和显微镜检查。1.肉眼观察肉眼观察主要观察细菌在固体、液体、半固体，鉴别培养基上的生长情况。在固体培养基上要观察菌落形态、大小、颜色是否均匀一致，表面是光滑湿润，还是干燥无光或呈皱纹状，边缘是整齐还是不规则，菌落是隆起、扁平，还是乳头样，是透明、半透明或不透明。在液体培养基中，要观察培养基是否呈均匀浑浊，管底有无沉淀，液面有无菌膜，是否产气等。在半固体培养基上应观察细菌是否沿着接种线生长，是呈毛刷样生长还是均匀生长，上下生长是否一致。在鉴别培养基上，应观察其生长情况是否与预期的相一致，在血琼脂培养基上还要观察是否溶血及溶血圈的特点，在某些培养基上还要注意是否有臭味等。2.显微镜观察在作细菌个体形态学检查时，要根据被检菌的种类和检查项目，选用相应的染色方法，同时要注意选择适合的培养基以及细菌培养的时间，才能达到预期的目的。一般以18－24小时（生长时间长的细菌除外）的幼嫩培养菌为宜。例如，作革兰氏染色检查时，培养时间长的陈旧细菌，可能由阳性变为阴性。作细菌运动性检查时，液体培养基的幼嫩培养物（几小时到十几小时）最为适宜。作炭疽荚膜染色时，因炭疽杆菌在一般培养基上不形成荚膜，而在动物体内形成明显的荚膜，因此，应先接种小鼠，取死亡动物的病料作涂片标本镜检。作鞭毛染色时，以液体培养基为宜。芽胞的形成，因细菌种类不同，往往对培养条件如培养基、空气和培养时间等而异，但一般均要求较长时间。镜检时除注意其基本形态结构和大小（要用测微计测量）外，还应注意其排列状态、菌端形状、有无两极染色、有无形成芽胞和荚胞等。必要时可用电镜观察其微细结构。3.常用的几种染色方法涂片用的载玻片需用清洁液洗净、擦干、不留油质，否则培养物不能均匀地推开。被检材料如果是肉汤培养物，用铂金耳环取一滴，均匀涂抹于载玻片上，涂抹的范围约有手指甲大即可。随后，在酒精灯火焰上加热使之固定（即火焰固定）；被检材料如果是固体培养物，先滴一滴水（常用生理盐水）于载玻片上，用铂金耳环取少许培养物，在水滴中混匀，培养物不宜太多，菌体看不清楚。脓汁、淋巴液、乳汁也按同样方法制备抹片。血液和病变组织，直接涂抹在载玻片上，组织抹片也不能太厚，否则看不见细菌，细菌培养物抹片用火焰固定，组织抹片常用甲醇或甲醛固定。

‘叁’ 微生物镜检中如何分辨死菌还是活菌

染色啊。般用美蓝与碱性品红的复合染料进行死菌的区分。染色后，活菌染为蓝色，死菌和培养基偏红，在显微镜下很好区分

‘肆’ 细菌鉴定办法有哪些，详细些哦~~

我刚刚参加了这方面的培训呢，呵呵。
一般细菌的常见生理生化鉴定实验有：糖(醇)类发酵试验、甲基红(Methyl red)试验、V.P试验、吲哚试验、柠檬酸盐利用试验、靛基质(吲哚)试验、硫化氢试验、淀粉水解试验。这样的资料很多的，你每个实验都网络下就可以了。我这里都拷出来是不实际的。

‘伍’ 野生菌的菌株鉴定主要有哪些方法基本的过程是什么

毒菌的颜色比较鲜艳，有疣，毒菌的帽子上会有疙瘩，有的有红斑、沟托、沟裂，有的菌子上有菌托、菌环，一般的毒菌摘断以后有浆汁流出来，味道刺鼻。
此外，还可以从以下几方面加以识别：
一是观外形。一般的毒菌的颜色较可食用菌鲜艳，菌伞上呈红紫、黄色或杂色斑点。柄上有环和托。
二是闻气味。毒菌往往有辛辣、恶臭及苦味，可食用菌则有菌菇固有的香味。
三是变色试验。用葱白在菌盖上擦一下，如果葱白变成青褐色，说明有毒，反之无毒；毒菌煮熟后遇上银器往往变成黑色或褐色。
四是牛奶试验。将少量鲜牛奶洒在菌表面，如果牛奶在其表面发生结块现象，则可能有毒。
五 看分泌物
将采摘的新鲜野蘑菇撕断菌株，无毒的分泌物清亮如水（个别为白色），菌面撕断不变色；有毒的分泌物稠浓，呈赤褐色，撕断后在空气中易变色。

‘陆’ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

‘柒’ 细菌鉴定的基本原则是什么

细菌鉴定是指将分离培养获得的病原菌，通过纯化培养使其达到不含有其他微生物的纯培养程度，继而进行系统鉴定。而菌种保藏机构在收集一些已经冻干的菌种时，应在开启后经过两代的适应性培养方可进行复核性的系统鉴定。系统鉴定是通过细菌的形态结构、生长特性、抗原性、病原性以及目前流行的核酸测定方法等检测，并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型(群)。目前菌种保藏机构通常使用的细菌鉴定方法大致有以下几种：

1、传统方法

常规宏观菌落形态学观察，主要观察菌落在其适合的培养基上的生长状况：细菌在固体培养基上的生长形态、大孝颜色是否均匀一致，菌落个体表面及边缘的生长状况;在液体培养基上的浑浊状况、沉淀状况、液面菌膜状况;半固体上穿刺接种后，观察细菌是否沿着接种线生长以及其生长状态是呈毛刷样生长还是均匀生长，上下生长是否一致。在鉴别培养基上培养。

细菌的个体形态学观察，即通过显微镜观察。观察前细菌需要着色，要根据预先确定的观察项目选择与之相对应的染色方法，目前常用的染色方法包括革兰氏染色法、美蓝染色法、Ziehl—Neelsen染色法、姬姆萨染色法、鞭毛染色法、芽胞染色法等。尽量挑选对数生长期的细菌进行染色观察，此时的细菌生长处于幼期，利于观察，因为一些陈旧细菌的染色结果会有变化，如本为革兰氏阳性菌经过长期搁置后染色结果可能为革兰氏阴性。同时细菌培养时要注意培养基的挑选，一些细菌的特殊结构如荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞等，其表达是需要在特定的培养基上才能正常发育，有的细菌如炭疽在一般的培养基上不形成荚膜，只在动物体内形成明显的荚膜，所以需先接种实验动物后用病料进行涂片镜检。在镜检时观察细菌基本形态结构和大小及其排列状态、菌端形状、有无两极染色、有无形成芽胞和荚胞等。

‘捌’ 鉴别活死细菌的直接计数法

将细菌涂布到培养皿上培养一段时间，肯能不能长出菌斑就行了

‘玖’ 细菌活力鉴定 怎么鉴别细胞死活呢

先滴浓度相对高的溶液在其周围，在显微镜下观察其细胞形态，发生变化则先前有活性。再滴低浓度的平衡，细胞形态不能复原则表明在刚才的高浓度下已失活，剩下的复原的则为有活性的。