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氨基酸检测质谱方法

发布时间:2022-08-05 15:37:10

A. 测定氨基酸含量的方法有几种

1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.
2)比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.
3)测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.
5)液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.
6)平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.

B. 氨基酸质谱检测用正离子模式还是负离子

选择正负离子模式主要是根据化合物的性质,也就是看结构;而流动相环境影响分析的灵敏度。
比如含羧基,磺酸基的物质,一般肯定可以使用负离子模式,因为在一般情况下可以电离为R-COO-,和R-SO3-;在酸性的流动相中,如pH3以下,羧酸根可能就不好电离成负离子了,这时负离子监测的灵敏度下降,而磺酸根酸性较大,仍然可以电离。
而含氮的化合物碱性化合物,包括季氮化合物,一般采用正离子模式,R-NH3+,R2-NH2+,R3-NH+,R4-N+;这些化合物一般容易加和氢离子形成正电荷的离子;同样跟他们的碱性有关,季氮化合物是强碱,一般情况都可以正离子监测的;
两性化合物如氨基酸,有个等电点pH的,根据流动相pH不同选择模式。
一般酸性化合物流动相选pH大于pKa2.0以上,采用负离子模式;反之碱性化合物流动相选pH小于pKa2.0,采用正离子模式
我遇到的情况一般是正离子模式应用更多,一方面流动相由于色谱柱的性质一般偏向酸性(pH2-8),另一方面,普遍采用的ESI离子源是一种超软电离的离子源,在酸性条件下大部分极性较大的化合物都可以加和氢离子,形成正电离子,如没有氮的黄酮类,脂类,糖类等。
且负离子模式相应一般比正离子模式小一个数量级。
在优化质谱条件的时候正负离子都试试哈,看看相应值!~还有,看看样品的基质是否有干扰,看看基线高度和性噪比!

C. 检验氨基酸用什么方法

1.茚三酮反应,氨基酸与其发生反应缩合成蓝色物质。除开脯氨酸和羟脯氨酸,他们与其反应生成黄色衍生物。
2.桑格反应,氨基酸与其反应会生成黄色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。
3.艾德曼反应(DNFB反应),即氨基酸与苯异硫氰酸反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸。

D. 氨基酸检测

你若是问蛋白质,我可以直接告诉你又双缩脲试剂(中学阶段),但氨基酸的检验比蛋白质麻烦多了.一、氨基酸的分离和检测氨基酸的分离和检测手段,以往用化学分析法、层析法、比色法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪.随着高效液相色谱及填料的发展,HPLC在氨基酸检测方面显示了其特有的优越性.但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射特性,为提高分析检测灵敏度和分离选择特性,通常将氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法与柱后衍生法.HPLC与各种衍生相结合的氨基酸分析技术,构成了具有广泛适用性的现代氨基酸分析技术.\x0d二、鉴定是哪种氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法.1、茚三酮反应 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸环境加热) 紫色(脯氨酸、羟脯氨酸为黄色) (检验α-氨基)\x0d2、坂口反应 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸\x0dα-萘酚+碱性次溴酸钠 红色 (检验胍基 精氨酸有此反应)\x0d3、米隆反应(又称米伦氏反应) HgNO3+HNO3+热 红色 (检验酚基 酪氨酸有此反应,未加热则为白色)\x0d4、Folin-Ciocalteau反应(酚试剂反应) 磷钨酸-磷钳酸 蓝色 (检验酚基 酪氨酸有此反应)\x0d5、黄蛋白反应 浓硝酸煮沸 黄色 (检验苯环 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反应)\x0d6、Hopkin-Cole反应(乙醛酸反应) 加入乙醛酸混合后徐徐加入浓硫酸 乙醛与浓硫酸接触面处产生紫红色环 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)\x0d7、Ehrlich反应 P-二甲氨基苯甲醛+浓盐酸 蓝色 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)\x0d8、硝普盐试验 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)

E. 串联质谱是怎样测定氨基酸序列的,以三级四级杆质量分析器为例

牙酸是有剧毒的,以上三点是化学问题,分析示例嗯,60%至70%

F. 质谱法测定氨基酸的原理详细步骤,不胜感激!!!!

用液质联用仪做可以得到氨基酸的M+H峰,可以得到氨基酸的确认

G. 列举三种氨基酸的定量分析方法,说明其工作原理。

就给你找到两种,将就着看吧..你找到了另一种,再告诉我一下
1、化学分析法——甲醛滴定法
甲醛滴定法用于氨基氮的测定, 可以测出样品中总氨基酸的含量,其原理是在中性或弱碱性水溶液中,氨基酸的α—氨基与醛类反应生Schiff碱:α—氨基酸与甲醛反应生成亚甲基亚氨基衍生物
2、分光光度法——茚三酮法
茚三酮是一种能使氨基酸生成在可见光区有吸收的衍生试剂。该方法的基本原理是经阳离子交换柱分离出的氨基酸与茚三酮混合,经加热反应后,一级胺与之生成蓝紫色化合物,二级胺与之生成黄色化合物。两种衍生物使用双通道紫外检测器同步检测,检测波长分别为570nm 和436nm。

H. 测定氨基酸

用高相液相质谱仪可以测氨基酸含量,取标准氨基酸作标准曲线,用质谱作检测器。看有没有质谱信号,应该是没有问题,如果没有信号,则进行衍生,例如苯肼等。不同浓度标准氨基酸提取离子流图的峰面积作标准曲线。最后检测样品,计算含量。

I. 氨基酸的检测方法哪些

1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。

J. 氨基酸鉴别方法

方法太多了,
等电点法。
紫外分光分析。
还有色谱分析。
等电点法和色谱分析都是提供一个分离的环境,需要已知氨基酸作对照。

关于紫外吸收,使用得并不广泛,特地查书,看到以下描述:
有机化合物在紫外区中有些没有吸收谱带,有的仅有较简单而宽阔的吸收光带;
另一方面,如果物质组成的变化不影响生色团及助色团,就不会显着得影响其吸收光谱,例如甲苯和乙苯的紫外吸收光谱实际上是相同的。
因此物质的紫外吸收光谱基本上是其分子中生色团及助色团的特性而不是它的整个分子的特性。所以物质的紫外光谱不能完全决定物质的结构,还必须与红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及其它化学的和物理化学的方法共同配合起来,才能得出可靠的结论。

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