检测dsDNA抗体的标准方法

① 您好医生我的抗双链DNA（抗dsDNA）（免疫印迹

dsDNA——双链DNA，double-stranded DNA。单链DNA——ssDNA，single-stranded DNA。 抗dsDNA（dsDNA抗体）：对诊断SLE有较高的特异性，且与SLE的活动相平行，并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。抗dsDNA抗体与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原造成SLE患者的肾损害。抗dsDNA抗体阳性的患者较阴性患者发生肾炎的危险性高12倍。测定抗dsDNA抗体的方法很多，其中放射免疫法（Farr）敏感，用此法检测其结合率320%为 阳性，短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法（IF－CT或IF－TE）更特异，此法31：5可判阳性。低滴度的抗DNA抗体也可在多种疾病甚至正常人中出现。临床一般认为：1、抗双链DNA（dsDNA抗体）：对诊断SLE有较高的特异性，且与SLE的活动相平行，并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。2、考虑狼疮肾炎的诊断，以及对疗效、预后判断的标准之一。
回复专家:甘肃省人民医院-中西医结合风湿免疫科-王晋平主任医师

② 查免疫十项包括有哪些

免疫十项包括：面抗原、表面抗体、乙肝抗原、乙肝抗体、乙肝核心抗体、乙肝前S1抗原、甲肝抗体、丙肝抗体、人免疫缺陷病毒抗体测定、梅毒。

③ 抗双链DNA（dsDNA）抗体的临床意义是什么

抗DNA抗体有两种类型：抗天然双链DNA抗体和抗变性单链DNA抗体。 抗dsDNA抗体主要识别双螺旋脱氧核糖核酸磷酸支架上的位点，因此与双链、单链DNA均能反应。然而，抗ssDNA抗体识别嘌呤和嘧啶碱基多聚物，不能与双链DNA反应。 抗dsDNA抗体 是系统性红斑狼疮的特异性抗体，和抗Sm抗体一起，...是该病的血清学标志物，阳性率为60%-90%。 不仅见于系统性红斑狼疮患者（70-95%），也与很多其它自身免疫性疾病有关（药物诱导性红斑狼疮（60%），混合性结缔组织病（20-50%），多肌炎/皮肌炎，硬皮病

④ 抗dsDNA抗体是什么

抗U1RNP或者抗SS-A抗体等多种抗体。

抗dsDNA抗体这是一种自身抗体，通常见于系统性红斑狼疮患者病情活动期。这个抗体对于红斑狼疮诊断的敏感性和特异性都是非常高的，通常不会见于其他结缔组织病。因此是可以预示系统性红斑狼疮用户病情活动的，而且随着狼疮患者病情的控制，抗双链DNA抗体是完全可以转为阴性的。

系统性红斑狼疮患者在体内会存在大量的自身抗体，以抗核抗体为代表，还会包括其他抗体，抗双链DNA抗体只是其中的一种而已，另外也会出现抗U1RNP或者抗SS-A抗体等多种抗体。

(4)检测dsDNA抗体的标准方法扩展阅读：

注意事项：

1、抗dsDNA抗体是一种诊断系统性红斑狼疮的实验室指标，一般需要抽血才能测定含量，对于他的印象因素，不必过分担心，只要仪器没问题，一般的检查结果没多大问题。

2、对抗dsDNA的检测结果应结合临床分析，必要时应动态观察。

3、鉴于检测试剂中DNA抗原的来源不同，碱基组成和顺序可能有一定差异，使抗体结合的表位发生变化。

⑤ 目前采用间接免疫荧光法检测患者血清中的dsDNA的最佳基质是

正确答案:A
解析：目前用于检测患者血清中的dsDNA的最佳方法是用马疫锥虫或绿蝇短膜虫作为基质进行间接免疫荧光法，因为这些血鞭毛寄生虫的虫体呈圆形或椭圆形，其动基体由纯净的环状dsDNA构成，除此以外通常不含有其他细胞核抗原
。能与动基体反应的自身抗体只有抗dsDNA抗体，故具有高度特异性
。

⑥ 自身免疫性疾病，常和其他系统性

一、自身免疫性溶血性贫血（AIHA）：机体免疫功能异常，或服用某些药物后，红细胞表面抗原性发生变化，产生抗红细胞膜表面抗原的自身抗体。自身抗体与自身抗原结合，激活补体，破坏红细胞，导致贫血。特点：
（1）体内出现抗红细胞自身抗体。
（2）抗人球蛋白试验（Coombstest）阳性。
（3）红细胞寿命缩短。
（4）AIHA多见于中年女性。
（5）继发性者多继发于淋巴系统恶性病、结缔组织病、感染和药物应用后。
（6）引起AIHA的药物有青霉素、奎尼丁、异烟肼、对氨基水杨酸、磺胺类、甲基多巴等。抗红细胞抗体可分为三类：①温抗体，为IgG型，37°C可与RBC结合，不聚集RBC.②冷凝集素，为IgG型，低温时与RBC结合使其凝集，引起冷凝集素综合征。③DonathLaidsteiner抗体，为IgG型，低温时与两种补体成分结合，温度升高至37°C时，激活补体链，导致溶血，引起陈发性冷性血红蛋白尿症（PCH）。PCH继发于梅毒或病毒感染后。病毒感染后引起的多见于儿童或年轻患者。
二、免疫性血小板减少性紫癜（ITP）：主要表现为皮肤黏膜紫癜，血小板↓，骨髓中巨核细胞可增多，女性多发，发病率1／lOO00，患者有抗血小板抗体，其使血小板寿命缩短。
三、重症肌无力（MG）：患者体内存在神经肌肉接头乙酰胆碱受体的自身抗体，该抗体结合到横纹肌细胞的乙酰胆碱受体上，使之内化并降解，使肌细胞对运动神经元释放的乙酰胆碱的反应性降低。引起骨骼肌运动无力。
四、肺出血肾炎综合征（Goodpasture综合征）：患者体内可检到抗肾小球基底膜Ⅳ型胶原抗体，由于肺泡基底膜与肾小球基底膜有共同抗原，故肺、肾同时发病。青年男性多见，反复咯血、血尿、蛋白尿，最后发展为肾衰。
五、系统性红斑狼疮（SLE）：是一种累及多器官、多系统的炎症性结缔组织病，多发于青年女性。其临床症状比较复杂，可出现发热、皮疹、关节痛、肾损害、心血管病变（包括心包炎、心肌炎和脉管炎）、胸膜炎、精神症状、胃肠症状、贫血等；疾病常呈渐进性，较难缓解。免疫学检查可见IgG、IgA和IgM增高，尤以IgG显着；血清中出现多种自身抗体（主要是抗核抗体系列）和免疫复合物，活动期补体水平下降。抗dsDNA和抗Sm抗体是本病的特征性标志。
SLE的实验诊断：
（1）抗核抗体
1）免疫荧光法检测抗核抗体：该法以小鼠肝细胞、Hep-2细胞（人喉癌上皮细胞株）、Hela细胞（官颈癌细胞株）或小鼠腹水癌细胞等作为抗原片，以Hep-2细胞抗原片敏感性较高。
2）抗DNA抗体：分为天然（双链）DNA（ds-DNA）和变性（单链）DNA（ss-DNA）抗体。Ds-DNA抗体的测定方法有间接免疫荧光法（以短膜虫或马疫锥虫为抗原）、间接酶标抗体法（以短膜虫为抗原）、补体结合抗体法（以短膜虫为抗原，以抗人C3荧光抗体为第二抗体）、酶联免疫吸附试验（ELISA，以DNA为抗原）和放射免疫分析法（即Farr法）等多种方法。
前四种方法检测到的都是低亲和力的抗dsDNA抗体，或敏感性低，或检测结果不稳定、重复性差。Farr法检测dsDNA抗体的特异性最高，结果可靠，重复性好，因此是目前国际上公认的检测抗ds-DNA抗体的标准方法。当抗ds-DNA抗体结合率>20％时对诊断SLE有意义。
3）抗可提取性核抗原（ENA）抗体：目前抗ENA抗体的检测方法有双向免疫扩散或对流免疫电泳和免疫印迹法医|学教|育网搜集整理。近年来随着分子生物学技术的发展，可以以重组抗原为底物，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测特异性抗体。
4）抗增殖细胞核抗原抗体。
（2）抗组蛋白抗体。
（3）抗核糖体抗体。
（4）抗Ku抗体。
（5）皮肤狼疮带试验。
与SLE病情判断有关的免疫学检测包括：
1）血沉和C反应蛋白（CRP），SLE活动时血沉增快，CRP改变不明显。
2）血清蛋白，包括白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原、冷球蛋白冷凝集素等。
3）血清补体，包括总补体（CH50）和Cl、C3、C4、C2及C9.
4）循环免疫复合物（CIC）聚乙二醇（PEG）沉淀法。
5）类风湿因子。
6）细胞免疫功能。
六、类风湿性关节炎（RA）：一种以关节病变为主的全身性结缔组织炎症，多发于青壮年，女性多于男性。本病的特征是关节及周围组织呈对称性、多发性损害，部分病例可有心、肺及血管受累。免疫学检查可见血清及滑膜液中出现类风湿因子，血清IgG、IgA和IgM水平升高。其他自身抗体也可出现：例如，抗角蛋白抗体；抗RA33抗体；抗环瓜氨酸抗体（抗CCP抗体）；抗核周因子等，对类风湿的早期诊断很有帮助。
七、干燥综合征（SS）：干燥综合征是一种侵犯外分泌腺，尤以唾液腺和泪腺为主的慢性自身免疫病，它可同时累及多种脏器。干燥症和干燥性角膜炎是SS的主要临床表现。干燥综合征的实验诊断包括：
（1）抗SS-A和抗SS-B抗体：检测方法有：①双向扩散（DID）法；②对流免疫电泳（CIE）法；③免疫印迹（IBT）法。
（2）其他免疫学异常：①高丙球蛋白血症，呈多克隆性，因此可引起血沉增快、血清絮状和浊度试验异常。②类风湿因子（RF）和循环免疫复合物（CIC），RF多为IgM型，IgG型和IgA型少；CIC可呈阳性。③其他自身抗体，抗核抗体（ANA）在SS患者中可呈阳性。
（3）与SS诊断有关的其他实验：①泪液分泌试验；②唾液分泌试验。

⑦ 什么是dsDNA

抗dsDNA抗体是什么?抗dsDNA抗体常和自身免疫病红斑狼疮联系在一起。红斑狼疮（sle）是一个累及身体多系统多器官，临床表现复杂，病程迁延反复的自身免疫性疾病。红斑狼疮可分为系统性红斑狼疮（SLE）和盘状红斑狼疮（DLE）两大类。红斑狼疮常表现出免疫检察异常，可以出现很多自身抗体的阳性，其中抗核抗体阳性率最高，其次就是抗dsDNA抗体。
抗dsDNA抗体的靶抗原是成双碱基对的DNA双螺旋结构,主要见于系统性红斑狼疮,是目前公认的高度特异性抗体,也被列为狼疮的诊断标准之一。
抗dsDNA抗体在狼疮中,阳性率为60-90%,活动期的狼疮阳性率一般更高,而非活动期的则相应较低.所以抗dsDNA抗体与狼疮疾病活动性紧密相关,其抗体滴度随疾病的活动与缓解而升降。血清中抗dsDNA抗体水平升高时,提示疾病复发；血清中抗dsDNA抗体呈升高水平,同时伴有补体降低,则提示狼疮肾炎的危急性大；狼疮的缓解期血清中抗dsDNA抗体水平降低甚至可以转阴。
综上所述,抗dsDNA抗体常作为狼疮的活动指标,可以用于监测病情变化,药物治疗效果观测。
系统性红斑狼疮患者也可以表现出抗dsDNA抗体阴性，但是阴性者的比例并不大。

⑧ 自身免疫病全项检查都有哪些

免疫系统检查主要包括:血常规、免疫球蛋白测定、补体测定、肿瘤标志物、激素系列、抗核抗体、自身抗体系列如抗Sm抗体等、甲状腺功能测定、生化全项以及抗磷脂抗体等，必要时需要做骨髓穿刺活检等。

具体的检查还需要结合患者具体的临床症状来选择相应的检查。建议患者去正规公立风湿免疫科或者是相关科室就诊，听从医生的建议，接受规范化的检查及治疗，以免延误病情。

免疫性疾病防治原则：

1、免疫缺陷可应用替代疗法，如丙种球蛋白缺乏所致的免疫缺陷可应用丙种球蛋白治疗 ； 还可应用免疫加强剂来提高机体的免疫反应性。

2、脱离或避免导致异常免疫反应的物质，如控制环境、停用某些药物等。

3、Ⅰ型变态反应可进行特异性脱敏疗法来提高机体对致敏物质的耐受性。

4、Ⅰ型变态反应还可应用药物来抑制介质的产生，以阻断免疫反应。

5、应用药物来拮抗介质的作用和它们导致的组织反应。

6、用免疫抑制剂来抑制过度活跃的免疫反应。

7、除去激发免疫反应的感染灶和产生自身免疫的病灶。

8、清除可使临床症状加重的各种刺激。

以上内容参考网络—免疫性疾病、网络—自身免疫性疾病

⑨ 如何正确理解自身抗体实验室检测结果

1. 自身抗体滴度与疾病的相关性 有些自身抗体是高特异性指标。如抗Sm抗体对SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体对AIH等，一旦出现阳性（即使是低滴度）， 基本上就可做出诊断。但如果这些指标为阴性，也不能排除相关疾病的存在。相反有些指标虽然在疾病中的阳性率比较高，但特异性差，在很多疾病甚至健康人群中均可出现阳性（如ANA），这种抗体只有在高滴度时，才对相关疾病有诊断意义。自身抗体的滴度不仅对疾病诊断非常重要，并且有些抗体的滴度(如抗dsDNA抗体)与疾病的活动度密切相关，可用于疗效和病程监控。 2. 关于抗核抗体(ANA)的滴度范围 检测ANA的标准方法为间接免疫荧光(IIF)法，最好用Hep-2细胞和灵长类肝冰冻组织切片作为检测基质。我科实验室采用的是 德国欧蒙公司Hep-2/猴肝检测ANA间接免疫荧光试剂盒。其起始稀释度为1:100，滴度超过1:320时，则提示自身免疫性疾病。由于不同检测系统的起始稀释度和滴度系统不同，检测到的滴度数值不能直接进行比较。对ANA的结果不仅要关心其定性和滴度结果，同时还应了解所用检测系统的实验基质和起始稀释度（正常参考范围）。我科实验室ANA (IIF)的临界值(起始稀释度)为1:100。 在正常人群中ANA阳性率3-15%，抗体滴度较低，在年龄大于60岁的正常人群中ANA阳性率可高达10-37%。 ANA滴度及临床意义如下： ANA滴度 荧光强度 临床意义 <1:100 - ANA阴性，血清标本中未检出抗核抗体。 1:100 (+) 可疑阳性，继续追踪观察。少数正常人群也可能阳性。 1:320 + 弱阳性，提示可能存在相关疾病。极少数正常人也可能阳性。 1:1000 ++ 中等阳性，提示可能存在相关疾病。 1:3200 +++ 强阳性，高度提示存在相关疾病。 1:10000 ++++ 很强的阳性，高度提示存在相关疾病。 3. 自身抗体检测方法对结果的影响 不同的检测方法对实验结果有一定影响，如抗dsDNA抗体检测常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和间接免疫荧光法(IIF)。这 三种方法所能检测的抗体的亲和力差别很大，放射免疫法的特异性最高，IIF次之，ELISA较差。因此ELISA检出抗dsDNA阳性时，应用其它方法确认。 4. 自身抗体流行病学资料的积累 在IIF检测时，很多荧光模型相对应的靶抗原尚不清楚，且这些荧光模型的临床意义不明确。随着对自身免疫性疾病及其相关自 身抗体研究的深入，越来越多的以前认为没有临床意义的抗体成为新的研究焦点。因而对于这些结果，实验室也应该报告，以引起临床的重视，通过临床和实验室的共同努力，不断积累这些荧光模型的流行病学资料。 5. 为何患者ANA阳性，却无明显临床症状？ ANA阴性结果提示患者体内不存在抗核抗体。若患者仅仅出现ANA阳性结果而无其他临床表现或指征，则并不提示自身免疫性疾 病。主要原因如下： 1）ANA在健康人群中的阳性率约为3-15%，而且ANA的产生与患者的年龄相关，年龄在65岁以上的健康人群ANA阳性率可高达1 0-37%。另外健康人群在感染病毒的情况下，也可能出现ANA阳性，但这些抗体多为短暂出现。 2）一些药物治疗可能引起ANA阳性。因此ANA阳性需结合患者用药情况综合判断。 3)一些特殊疾病（如肿瘤）也可能导致ANA阳性。
目前已有的研究表明，自身抗体往往早于临床症状出现。对于SLE患者而言，至少有一种以上SLE相关自身抗体在临床诊断前即 已出现（最早达9.4年前，平均为3.3年），而且抗体与疾病特异性越高，出现的时间越晚。另外，随着SLE病情进展，抗体产生的数量逐渐增加（见参考文献[1]）。 6. 如何认识间接免疫荧光法ANA阴性，而印迹法靶抗原（SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等）结果阳性的实验结果？ 客观上不同的检测方法学之间存在敏感度和特异性的差异。因此针对上述问题应根据靶抗原的实际结果，进行具体情况具体分析。 1）由于SSA和Jo-1抗原在真核细胞中的表达量不高，而且细胞固定剂对于抗原结构也可能产生影响，因此基于培养细胞作为基 质的间接免疫荧光法绝非抗SSA和Jo-1抗体的最佳检测方法（见参考文献[2]）。 2）抗线粒体M2抗体对PBC疾病的诊断具有良好的敏感性和特异性。有研究表明临床明确诊断的PBC患者样本，即使应用大鼠肾 检测抗线粒体M2抗体也可能出现荧光法阴性而重组抗原方法阳性的结果（见参考文献[3]）。 3）对于dsDNA抗体临床检测，由于不同实验体系中所应用的抗原来源不同、抗原呈现形式不同以及反应条件不同等因素的影响， 因此不同实验方法学之间的结果并不具备可比性（见参考文献[4]）。 7. 单独出现Ro52抗体阳性是否具有临床意义？ 目前已有的研究表明，抗SSA抗体主要提示干燥综合症、SLE和新生儿红斑狼疮等疾病。但Ro52抗体在许多疾病中（如风湿性疾 病、感染性疾病和自身免疫型肝病等）均有一定的发生率，因此单独Ro52抗体阳性结果缺乏疾病 ，需结合其他检测指标或临床症状综合判断。例如自身免疫性肝炎患者出现SLA/LP抗体和Ro52抗体同时阳性，则提示患者病情较重、预后较差。

⑩ 抗核抗体十1:100t

抗核小体抗体采用ELISA法测定，测定值>20 RU/mL为阳性。抗dsDNA抗体采用间接免疫荧光法，以马疫锥虫为底物，滴度≥1∶5判为阳性。
就结果看可能采用的血凝法,该抗体的特异性不是很高，有一部分正常人也是阳性的（假阳性），如果不结合其它的免疫学检查结果，是没有多大意义的。