STM微生物检测方法

㈠ 测定微生物的生长有哪些方法各有何优缺点

常用测定微生物生长的方法有：
1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.
优点：可适用于一切微生物,
缺点：无法区别死菌和活菌.
2)比浊法.
原理：由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.
优点：比较准确.
3)测含氮量,
大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)血球计数板法.
优点：简便、快速、直观.
缺点：结果包括死菌和活菌.
5)液体稀释法.
对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.
优点：可计算活菌数,较准确.
缺点：比较繁琐.
6)平板菌落计数法.
取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.
优点,可以获得活菌的信息.
缺点：操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.

㈡ 微生物的传统检测方法有哪些

传统检测有三种方法

1、直接显微镜观察，正常情况，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度以及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征。可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。

2、选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件，选择培养基，其作用是允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养一般是通过观察微生物的同化作用类型或某一特征进行间接判断，得到的微生物往往并不只有一种，但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。

3、鉴别培养基，根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品。与选择培养相比，鉴别培养基的鉴别所得结果的范围比较小，一般可直接测定某微生物的种类。

㈢ 微生物菌体浓度的测定方法有哪些

微生物菌体浓度的测定方法：

1. 活菌计数法

   此法能准确地判断菌液浓度,但有明显的滞后性,无法在第一时间内2确定其实际浓度,待结果出来后,再开始检测,菌的活性将有所下降,给实验室操作带来诸多不便;

2. 比浊法

   此法能快速地判断菌液浓度,但为粗略的估计值,受限于各人肉眼的观察,误差较大,准确性不高。

微生物菌体浓度的测定（纤维制品的抗菌性试验方法为例）

一、菌种：

大肠杆菌(EscherichiacoliATCC8099)

二、试剂与仪器

蛋白胨

牛肉膏

氯化钠

Cary100紫外——可见光分光光度计

三、培养基

营养细菌培养基NB。

蛋白胨5g,牛肉膏粉3g,蒸馏水1000mL,pH6.8±0.2。

营养琼脂培养基NA。

蛋白胨5g,牛肉膏粉3g,琼脂粉15g,蒸馏水1000mL,pH6.8±0.2。

1、对数生长期菌液的制备

取在规定保存代数之内的供试菌种,在火焰旁,挑取一铂金环,在营养琼脂培养基上划线,于37℃±1℃培养24h后,在平板上挑取饱满的单菌落,置于20mL营养细菌培养基中,振荡(110r/min,振幅3cm)培养24h。

2、稳定期菌液的制备

取培养好的对数生长期菌液0.4mL,于20mL营养细菌培养基中,再振荡培养4h,即为稳定期菌液。

四、吸光度(ABS值)的测定

取培养好的稳定期菌液,按不同的设定稀释倍数(5、10、20、40倍),依次进行稀释,(稀释液为1/20NB),在660nm标准波长下,测得一组不同菌液浓度的吸光度。(用空白1/20NB进行测试前调零)。

五、活菌计数

在无菌室内火焰旁进行操作。分别依次测定四个不同稀释倍数的菌落数。每个稀释倍数依次制定几个浓度梯度,用灭菌吸管各吸取1mL注入平皿。注入约15mL,45～50℃的营养琼脂培养基,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待培养基凝固后,翻转平皿,置37℃±1℃培养箱内培养24h后,进行菌落计数。用肉眼观察,点出菌落数,记下各平皿的菌落数后,

求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。

六、标准曲线的制作

运用生物统计ORG数据分析软件,以吸光度ABS值为横坐标,稳定期的菌液浓度为纵坐标绘制标准曲线。

㈣ 微生物的快速检测方法有哪些

目前主要普通培养（简称标）般报告要用仪器、核酸检测（PCR）、目前快速检测（主要包括：免疫磁珠、酶联免疫试剂盒、金标检测卡等根据自需求选择

㈤ 微生物检测包括哪些啊

食品中微生物指标的常见检验项目如下：菌落总数、大肠菌群计数、大肠杆菌计数、肠道致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌）、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、双岐杆菌、空肠弯曲菌、霉菌计数和酵母计数。

一般食品中活菌数达到108cfu.g⁻¹时，则可认为食品处于初期腐败阶段。

(5)STM微生物检测方法扩展阅读

微生物检验方法包括显微镜检、染色技术、培养基制备技术、接种、分离纯化和培养技术等。

接种，将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程。

分离纯化，在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程。

培养，根据培养时是否需要氧气，可分为好氧培养和厌氧培养。根据培养基的物理状态，可分为固体培养和液体培养两大类。

㈥ 测定微生物的生物量有哪些主要方法

测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定的方法主要有四种：

1.直接计数测定：根据微生物种类，有血球计数板和细菌计数板；

2.比浊法：根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比，可以用分光光度计测OD值，用OD值表示样品菌液浓度；

3.核酸计数法：荧光定量PCR技术；

4.活菌计数法：MPN和平板计数法由于测定方法的限制。新鲜土样经氯仿熏蒸后（24h），土壤微生物死亡细胞发生裂解，释放出微生物生物量碳，用一定体积的LK2SO4溶液提取土壤，借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数（KEC），从而计算土壤微生物生物量碳。

㈦ 检测微生物有哪几种方法

1.观察法：用显微镜寻找，医院常用。
2.分析仪法：已经有专用的分析仪。
3.失氧法：将检测物质密闭，检测其中气体成分的变化（氧气、氮气、二氧化碳等）。

㈧ 微生物检测有哪些

1、体积测量法：又称测菌丝浓度法。原理：通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。

菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。

2、称干重法。原理：利用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

3、比浊法。原理：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。

4、菌丝长度测量法。方法：对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度。

㈨ 微生物测定法的方法分类

液体稀释法
在一组试管中分别加入一定的培养基，然后加入不等量的被测物质，再将已培养好的、用于测定的微生物接种进去,在规定的条件下培养一定时间,观察其消长情况并与标准曲线对比，计算出被测物质的含量。
固体平板扩散法
将溶化的固体培养基与被测定微生物混合做成平板，把含不等量被测物质的液体滴入置于平板上(直接滴样法)；或注入平板上的牛津杯内（管碟法）；或吸入圆形滤纸片后，再置于平板上(纸片法)；也可以在平板上挖一定大小的圆孔，然后把被测物滴入孔内（打孔法）；经培养后在物质扩散所及的范围内出现抑菌法（或生长圈）,测量圈的直径,并与标准曲线对比,计算出被测物质的含量（见图[固体平板扩散法 1、3、7 打孔法2、8纸片法4、6管碟法5直接滴样法][]）。
1932年，A.弗莱明在研究溶菌酶和青霉素时，开始使用微生物法测定抗生素的活性。1940年，E.B.钱恩等根据平板上抑菌圈的大小测定青霉素的活性含量。后又经E.P.亚伯拉罕等进一步将上述测定方法予以完善。测定抗生素时常用的微生物有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、黑曲霉等。1935年，W.H.肖普费最先用微生物测定维生素B。1939年,E.E.斯内尔和F.M.斯特朗用乳杆菌测定维生素的含量。1934年，K.A.凯肯等用阿拉伯聚糖乳杆菌测定9种氨基酸。此后,乳杆菌属、链球菌属、明串珠菌属的成员及某些微生物的变异株，逐渐成为最常使用的对象。

㈩ 微生物学的检查方法是有哪些

微生物学检查法

标本

因鼠疫传染性极强，采集标本时必须严格无菌操作。根据病型采取淋巴结穿刺液、肿胀部位组织液、脓汁，血液和痰等。人和动物尸体可取肝、脾、肺、病变淋巴结以及心血等。陈旧尸体取骨髓。将采集标本送至有严密防护措施的专门实验室进行检查，禁止在一般实验室进行操作。

直接涂片镜检

除血液标本外，一般均需涂片或印片，干燥后用甲醇固定，革兰染色或吕氏美兰染色，镜检。在不同材料中，菌体大小、形态有很大差异，除典型形态外，往往可见菌体呈多形态性，需加以注意。

分离培养与鉴定

血液标本需先置肉汤中进行增菌培养。分离培养一般选用血琼脂平板，28摄氏度24小时后，可见较小的露滴状菌落，继续培养则菌落增大至1～2毫米，中央厚而致密，周边逐渐变薄。取可疑菌落进行涂片染色镜检，噬菌体裂解试验，血清凝集试验，特异荧光抗体染色等作出鉴订。

血清学试验

可用于检查鼠疫耶尔森菌抗原或特异性抗体。敏感而特异的试验方法有ELISA、固相放射免疫分析，SPA协同凝集试验等。

检测核酸

用DNA探针杂交方法或PCR技术检测鼠疫耶尔森菌核酸，有助于鼠疫的诊断。PCR敏感性极高，蚤体内有10个鼠疫耶尔森菌感染即可用PCR技术检出。

诊断检查

诊断：取决于病人有接触史及肺部受累表现，病因诊断取决于痰、血或淋巴结吸出物革兰染色、培养，有条件的单位可作直接荧光素标记抗体染色，可提供快速的病因诊断。