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活细菌计数方法中的平均值如何求

发布时间:2022-04-30 06:52:53

如何计算培养基上的细菌数

先将液体细菌稀释到合适的倍数,涂到有刻度尺的载玻片上。有细胞计数器辅助计算各个方格中的细胞数,求平均值。在乘上稀释的倍数就好了
固体的方法也差不多是这样。

⑵ 如何进行活菌的菌落计数

梯度稀释涂平板,之所以要稀释是为了避免菌液浓度太高,涂不开,形成不了单菌落或菌落数量太多不好数。待菌落长出后,选取有30到100个菌落的平板计数,一般是三个同梯度的平板,取平均值,乘稀释倍数即可

⑶ 你好,想请教你一下有效活菌数的问题

根据我国现行的微生物肥料标准NY227-1994,以平板上出现30-300个菌落数的稀释度平板为计数标准。根据你的数据,三个稀释度的平均菌落数为179、54、6,所以取前两个稀释度的值。
标准中写明“若有两个稀释度,其平均菌落数均在30-300之间,应按两者菌落总数之比值来决定。若其比例小于2应计数两者的平均数,若大于2则计数其中稀释较小的菌落总数”。179:54=3.3,比值大于2,所以最后应取稀释度为-4的数据,即179。最后的最后,根据你给出的活菌数公式,结果为179*5*10^4=9.0*10^6(个/g)或(个/ml)
PS:以上是我个人观点,仅供参考哈
PPS:再多嘴一句~~据我所知,生物有机肥的有效活菌数至少要在两千万以上,但是根据算出来的结果,要不是这肥料有问题,要不就是实验过程中有差错了。

⑷ 活菌计数法公式

100000稀释度的舍去,只看1:1000稀释度和10000稀释.
计算公式:每克样品中菌落数=(C/V)*M
C为某一稀释浓度下平均菌落数,V代表涂布平板时所用稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数.
1:1000稀释度时
C=179 ,V=0.2 ,M=1000.
每克样品中菌落数=895000
10000稀释度时
C=53.67 ,V=0.2 ,M=10000
每克样品中菌落数=2683500
两者结果相差过大,需重新实验
一般来说,只有一个稀释度满足在这个范围内,不会有两个的.

⑸ 微生物计数方法有哪些

测定微生物计数的方法有很多,主要有以下几种:
1.血细胞计数法
将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数.
①此法的缺点是不能区分死菌和活菌.
②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数.
③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化
2.稀释涂布平板法
原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.
①这一方法常用来统计样品中活菌的数目
②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定.但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等.
④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法.染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞.
3.滤膜法
滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器.然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积上)的细菌数.
此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数.例如测定饮用水中大肠杆菌的数目:将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养.在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目.
此法也是统计样品中活菌的数目.
4.比浊法
原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量.实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确.
5.显微镜直接计数法
在课本生物选修1生物技术实践P22中“除了上述活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法.”这里说的显微镜直接计数,我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数.再如滤膜法也一样,可以有两种情况.
另外,微生物计数法发展迅速,多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目.

⑹ 统计活菌数量的方法都有哪些

统计菌落数目的方法有直接计数法和间接计数法两种。
1. 直接计数法
直接计数法是将稀释的样品滴在计数板上,盖上盖玻片,然后在显微镜下计数4〜5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再按公式求出每 毫升样品中所含的细菌数。计算公式 为:每毫升原液所含细菌数=每小格平 均细菌数X400X1 000X稀释倍数。这种方法的优点是所需设备比较简单,能迅速得到结果,而且在计数的同时还可以观察到所研究的微生物的形态特征; 缺点是不能区分死菌与活菌。
2. 间接计数法
在应用稀释涂布平板法计数时,首先要将待测样品配制成均匀的系列稀释液,尽量使微生物细胞分散开,再把稀释液接种到平板上,进行培养观察。但值得注意的是,统计的菌落数往往比活菌 的实际数目低,而且统计的结果一般用 菌落数而不用活菌数来表示。计算公式为:每克样品中的菌落数= (C+V)X M,其中,C表示某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V表示涂布平板时所 用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。

什么是活菌计数法

活菌计数法,其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。

具体操作
将待测样品经一系列 10 倍稀释,然后选择三个稀释度的菌液,分别取 0.2ml 放入无菌平皿,再倒入适量的已熔化并冷至 45 ℃ 左右的培养基,与菌液混匀,冷却、待凝固后,放入适宜温度的培养箱或温室培养,长出菌落后,计数,按下面公式计算出原菌液的含菌数:
每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿
菌落平均数×稀释倍数× 5
此法还可以将稀释的菌液取 0.2ml 加到已制备好的平板上,然后用无菌涂棒将菌液涂布整个平板表面,放入适宜温度下培养,计算菌落数,再按上公式计算出每毫升原菌液的所含活菌总数。

⑻ 如何对活细胞进行计数

哪里找最出色的生命科学学术交流论坛?>>> 用台盼蓝拒染法计数活细胞: 1. 彻底混合细胞悬液,取100礚样本至一支试管中. 2. 台盼蓝染色有两种方法。一是首先用细胞培养液稀释细胞样本,然后用台盼蓝溶液(产品号 #07050) 1/2稀释样本(细胞和台盼蓝的稀释比为1:1)。或者直接用台盼蓝溶液稀释样本。 例如:1/40稀释样本 加入50礚 细胞悬液至950礚 IMDM+2% FBS (1/20 稀释),混合,然后取100礚稀释的细胞悬液加入100礚台盼蓝溶液中(终稀释度为1/40)。或取20礚细胞悬液加入780礚台盼蓝溶液中(终稀释度为1/40)。 3. 涡悬振荡,混合稀释的细胞样本。 4. 血细胞计数器的准备:首先用酒精清洁其小室和盖玻片,然后用脱脂绵擦干。 5. 仔细的将盖玻片覆盖两个小室。 6. 用微量移液器或毛细管吸取稀释的样本。 7. 用微量移液器或毛细管将样本充满两个小室。不要过满或不足。 8. 计数4个大方格中细胞核的总数(1x1x0.1mm)或>100个细胞。分别死细胞和活细胞。死细胞染成蓝色的死细胞(因为细胞完整性破坏,细胞吸收台盼蓝),活细胞透明有折光(未染色)。 9. 活细胞计数按以下方法计算: 每个方格中活细胞总数平均值x稀释倍数x104= 活细胞数/mL 10.活细胞百分比计算方法如下:

⑼ 如何对活细胞进行计数

用台盼蓝拒染法计数活细胞:
1. 彻底混合细胞悬液,取100礚样本至一支试管中.
2. 台盼蓝染色有两种方法.一是首先用细胞培养液稀释细胞样本,然后用台盼蓝溶液(产品号 #07050) 1/2稀释样本(细胞和台盼蓝的稀释比为1:1).或者直接用台盼蓝溶液稀释样本.
例如:1/40稀释样本
加入50礚 细胞悬液至950礚 IMDM+2% FBS (1/20 稀释),混合,然后取100礚稀释的细胞悬液加入100礚台盼蓝溶液中(终稀释度为1/40).或取20礚细胞悬液加入780礚台盼蓝溶液中(终稀释度为1/40).
3. 涡悬振荡,混合稀释的细胞样本.
4. 血细胞计数器的准备:首先用酒精清洁其小室和盖玻片,然后用脱脂绵擦干.
5. 仔细的将盖玻片覆盖两个小室.
6. 用微量移液器或毛细管吸取稀释的样本.
7. 用微量移液器或毛细管将样本充满两个小室.不要过满或不足.
8. 计数4个大方格中细胞核的总数(1x1x0.1mm)或>100个细胞.分别死细胞和活细胞.死细胞染成蓝色的死细胞(因为细胞完整性破坏,细胞吸收台盼蓝),活细胞透明有折光(未染色).
9. 活细胞计数按以下方法计算:
每个方格中活细胞总数平均值x稀释倍数x104= 活细胞数/mL

⑽ 微生物计数方法有哪些

测定微生物细胞数目的方法有很多,介绍几种

1.血细胞计数法

将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数。

①此法的缺点是不能区分死菌和活菌。

②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数。

③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化

2.稀释涂布平板法

原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。

①这一方法常用来统计样品中活菌的数目

②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。

③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定。但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等。

④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法。染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞。

3.滤膜法

滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积上)的细菌数。

此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数。例如测定饮用水中大肠杆菌的数目:将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目。

此法也是统计样品中活菌的数目。

4.比浊法

原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大。因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量。实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确。

5.显微镜直接计数法

在课本生物选修1生物技术实践P22中“除了上述活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。”这里说的显微镜直接计数,我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数。再如滤膜法也一样,可以有两种情况。

另外,微生物计数法发展迅速,多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目。

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