‘壹’ 如何制备抗凝血
柠檬酸钠与血中钙离子形成难解离的可溶性络合物,而阻止血液凝固,但仅用于体外抗凝血,而且使血中钙离子减少,必要的时候要添加钙离子。
肝素钠在体内外均有抗凝血作用,我们自己实验室做实验用的是肝素钠。
‘贰’ 采集静脉血液标本,使用抗凝管与非抗凝管有什么不同谢谢。
抗凝管内含有抗凝剂,可以使血液保持液态,不凝固。非抗凝管一般只是具有真空抽血的功能,不能抗凝。血液沉淀后的结果来抗,抗凝管内可以得到血浆,儿非抗凝管得到的是血清。
‘叁’ 血标本采集存在的问题应采取哪些防范措施
楼主,你好~~
1 标本容器的选择不当
不同的检验标本需要不同的检验容器。采样所用的容器是否恰当是直接影响检验结果的因素之一。常见的使用容器不当有以下情况:血清标本使用有抗凝剂的试管;全血标本使用干燥试管;血培养标本使用未经消毒的,密封不严的培养瓶或不按无菌技术操作造成容器污染而导致杂菌生长,培养失败。这些都是由于标本容器使用不当人为造成的错误。因此,根据不同的检验目的选择标本容器,必须按要求进行采集和使用。同时抽取几项检验血标本时,一般注入容器的顺序为:血培养瓶,抗凝管,干燥试管。动作应迅速准确。
2 采血的时机不当
血液中的很多成分易受饮食影响。血标本做生化检验,应在病人空腹时采取。但某些病例的空腹血也可使检验结果受到影响。常见原因是:取血前一天晚上病人大量饮酒或半夜加餐,均会使空腹血待测指标发生变化。取血前使用药物也会影响检验结果,在临床上常常遇到病人血糖浓度很低,可病人一般情况良好,调查发现病人输入大量维生素c,使血糖测定结果偏低;做细菌培养,在使用抗生素之后留取标本,会使培养阳性率降低。因此护士要根据检验内容,事先通知病人,向病人交代清楚有关的注意事项,严格掌握标本采集的适宜时机。
3 采血部位不当
临床上有个别护士贪图方便,直接从输液的针头上接上注射器抽血,或静脉点滴时从同一血管近心端采血标本,使检验标本含有大量新输入的液体;血气分析标本取静脉血送检;这些都会使检验结果与病人病情不符,因此对输液输血病人,采集血标本时应在对侧肢体采取。血气分析标本应采取动脉血。
4 采血量不当
取血时要根据不同的检验目的,选择不同的抗凝剂试管。不同的抗凝剂试管,要求的采血量不同,要注意抗凝剂与血液要有一定比例,不能过多过少,并将血液与抗凝剂轻轻摇匀。血抗凝剂过多,易造成血液稀释,结果偏低,样品渗透压改变,细胞形态发生改变。抗凝剂过少或与血液未混匀,均可出现血液凝固或出现肉眼看不见的小凝块,而影响检测结果的准确性,往往给临床医生带来假象,延误了诊断和治疗。
5 采血的方法不当
采集血标本所用方法可直接造成血液成分的变化,如抽血前止血带在病人臂上缚的时间过长或过紧,都会造成血液成分的变化。对于一些采血困难,缚止血带过长的病人,可以在针头刺入静脉后的短时间内放松止血带,等待数分钟再抽血。气体,易挥发物质,ph值等测定时,可采用一些特殊的方法。如:注射器中事先装有灭菌的抗凝剂,取血后立即将注射器针头斜面刺入橡皮塞中,尽量避免血液空气接触而影响血液成分含量或其ph值。血气标本采动脉血时最好是血液自动流入注射器内。另外,采血方法不当常可导致标本溶血而影响和干扰检测项目。红细胞内液的某些化学成分与血清浓度不同,红细胞内液浓度高时,溶血导致血浆中浓度增高,反之可产生不同的稀释作用。通常标本发生溶血的原因:注射器、针头及容器含水分;采血部位用酒精消毒后,酒精未完全挥发;反复皮下穿刺,甚至刺破血管;抽血速度过快,产生血泡并将泡沫注入容器;振荡血液时过于剧烈;两次抽血注入同一试管内等。因此,取血时最好使用一次性注射器,采血部位皮肤消毒后应等皮肤干燥后再抽血,抽血后取下针头,将血液顺管壁缓慢注入试管内,避免将泡沫或用力将血液急速推入容器造成溶血。
6 病人和标本不符
望阅读愉快~~O(∩_∩)O~~
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‘肆’ 如何配制血液抗凝剂
1 (酸性)柠檬酸葡萄糖溶液B(ACD)(用于新鲜抽提或者是冻存的血样品)
柠檬酸钠:1.32%(M/V)
柠檬酸:0.48%(M/V)
葡萄糖:1.47%(M/V)
‘伍’ 高浓度血液样本如何制取
液(血液样本)RNA抽提试剂提取DNA时,血液样品如何保存?提取步骤是怎样的
2011-05-30 超过14用户采纳过TA的回答
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博凌科为TRIpure LS Reagent 血液(血液样本)RNA抽提试剂
TRIpure LS Reagent试剂是直接从来源于人,动物、植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。在提取血液等液体样品的RNA时按一定体积比加入该试剂即可.省去了在处理样品前离心去除液体的步骤。
使用该试剂可以同时提取DNA及蛋白质。提取的RNA样品可以用于后继的RT-PCR、Northern blot、dot杂交及体外转录等实验。回收的DNA片段可以用于PCR反应。
血液样品的保存:
为了保证提取效果,请选择新鲜的血液进行RNA的提取。在收集到血液样品后,需要加入抗凝剂。抗凝剂的选择首选EDTA,其他抗凝剂如:柠檬酸盐、肝素或者ACD也可以使用。加入抗凝剂的血液样品最好在几个小时内进行RNA提取实验。不同种类的mRNA,其半衰期也不尽相同。调控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短。因此,为了保证所提取的RNA能够包含更全面的信息,请尽量避免使用保存时间过长的血液进行RNA的提取。
基本步骤:
◆ 按照3:1的体积比例加入TRIpure LS reagent和待提取的液体样品(固体样品用水调整体积比至3:1)振荡混匀。
◆ 加入氯仿帮助有机相和水相分层。
◆ 异丙醇沉淀RNA。
◆ 漂洗RNA沉淀。
◆ RNase-free H2O重新溶解RNA沉淀。
注:本产品不需要进行红细胞裂解的步骤,更快,纯度高。
产品特点:
◆ 方便--- 不需要分离红细胞和白细胞
不需要进行另外的红细胞裂解步骤。
保存条件:
2-8℃避光保存一年。
提取范围:
血液、血清、血浆、病毒培养液以及任何液体形式的样品中提取RNA。
产量:
每1ml液体样品或1mg组织或1×106培养细胞预期的RNA产量
1.人和动物全血,15~20μg
2.人淋巴细胞(约7×107白细胞),60~70μg
3.肝和脾,6~10μg
4.肾,3~4μg
5.骨骼肌和脑组织,1~1.5μg
6.胎盘,1~4μg
7.上皮细胞(1×106 cultured cells),8~15μg
8.纤维母细胞(1×106 cultured cells),5~7μg
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‘陆’ 抗凝标本立即做有什么影响
看什么标本了,血离子标本放置过久会使钾离子升..分离胶管贮存的血标本再离心致钾离子增高。严密控制标本误差因素,作为实验分析前质控的标本质量控制应予以广泛重视,随着现代医学科学技术的迅速发展,临床检验技术不断改进、完善和更新,实验方法学研究在微量、简便、快速、准确的基础上,正朝着超微量、高精度、大批样、多指标和自动化的方向发展,但是,全面质量管理和临床医学科研的日益深入与拓展,都对检验质量提出了更高的要求,而在预防性质量控制的诸多因素中,标本误差的控制十分重要。
标本误差,系指被检标本在取送及保存过程中引入的误差,这类误差在标本正式检验之前即已存在。由于临床医院的生化血样多由医护人员取送,环节多、时间长,部分医护人员对于标本误差因素的认识不足而未能重视,这些都可给检验质量带来一定影响。本文从实验室内外的不同角度,结合临床上抽送生化血样的具体情况做一些分析,供临床同道参考。
‘柒’ 如何检测抗凝血效果
【摘要】 目的 比较病人用EDTA抗凝血和枸橼酸钠抗凝血检测PT、INR结果的差异。方法 120位受试对象用枸橼酸钠和EDTA抗凝各采两管血,分离血浆后在STAGO仪器上检测PT,对两种抗凝方式所得PT、INR结果进行线性回归分析,分析其相关性及其结果间有无显着性差异。结果 以枸橼酸钠法测得PT为y,EDTA法测得PT为x,两者间PT线性方程为y=0.86x-2.8,R2=0.97,PT结果相关性好,但差异有显着性。INR线性方程为y=0.95x+0.03,R2=0.98,相关性好且差异无显着性。讨论 EDTA抗凝血浆检测PT在临床上是可接受的,但前提条件是应建立自己的参考区间,报告INR结果时还应统计EDTA抗凝血的MNPT(正常人平均PT),根据公式INR=(PT/MNPT)ISI计算INR值。
【关键词】 EDTA; 凝血酶原时间
现阶段进行凝血项目检测都是用枸橼酸钠抗凝,抽取血液量与枸橼酸钠的比例是9:1,在真空采血管中包含固定量的0.3 ml抗凝剂,真空采血管内的负压保证了从血管中吸出2.7 ml血液。但是在实际情况中偶尔会发生血液量不足的问题,比例发生改变会影响凝血结果[1]。使用EDTA抗凝管可能会解决这个问题,因为EDTA粉末在抗凝过程中几乎不对血液造成稀释,也就不会发生稀释比例的改变。本文研究在于诠释用EDTA抗凝时所测得的PT、INR结果与枸橼酸钠抗凝时的相关性。
1 材料和方法
1.1 仪器和试剂 Stago 公司生产的STA型全自动凝血分析仪,使用Stago 公司配套试剂,配套质控品。Dade-Behring公司生产的INR校准血浆;
1.2 标本来源 收集本院健康体检者标本60例,男30例,女30例,年龄20~53岁;收集本院心胸外科心脏瓣膜置换术后及其它原因致PT延长病人标本60例,男35例,女25例,年龄21~55岁。
1.3 实验方法
1.3.1 枸橼酸钠抗凝血MNPT的计算 同一仪器使用不同生产厂家、不同批号的凝血活酶试剂所计算出的正常人平均PT(MNPT)值是不一样的,故我们应重测所用凝血活酶试剂匹配的仪器MNPT值,而不应使用生产厂家给我们提供的MNPT值[2]。计算MNPT需要至少20份正常血浆。本实验我们挑选60名健康体检者,经过仪器测试PT值,剔除>2S的数据, 经统计学处理,计算得出枸橼酸钠抗凝血的MNPT值。
1.3.2 EDTA抗凝血MNPT的计算 60名健康体检者的EDTA抗凝血,测试PT结果后,剔除>2S的数据, 经统计学处理,计算得出EDTA抗凝血的MNPT值。
1.3.3 Local ISI(仪器区域国际敏感指数)的建立 仪器不可使用试剂说明书上附带的ISI值,因为此ISI值是试剂制造商用手工方法所测出的,并非是实验室仪器对所用批号凝血活酶试剂的Local ISI[3],所以要重新建立Local ISI。用已标注INR值的校准血浆复溶后,在Stago仪器上测PT 2~3次,得出PT秒数均值,INR=(PT/MNPT)Local ISI,将枸橼酸钠及EDTA抗凝血各自的MNPT结果及已知的INR结果代入上式,即可求出Local ISI=lgINR/(lgPT-lgMNPT),故能分别求出两种抗凝方式各自的Local ISI。
1.3.4 PT、INR的检测 本院健康体检者标本60例,本院心胸外科心脏瓣膜置换术后及其它原因致PT延长病人标本60例用枸橼酸钠和EDTA抗凝管各抽一管血,3 500 r/min离心5 min,以制备乏血小板血浆,在4 h内完成检测。根据公式INR=(PT/MNPT)Local ISI,得到INR值。
1.4 统计学方法 对枸橼酸钠和EDTA抗凝所得的各120份标本的PT、INR结果进行线性回归统计,分析其相关性,并用配对t检验分析两者间是否存在显着性差异。
2 结 果
2.1 MNPT结果 橼酸钠抗凝血MNPT为13.8 s,EDTA抗凝血MNPT为18.6 s。
2.2 Local ISI结果 橼酸钠抗凝血Local ISI为1.24,EDTA抗凝血Local ISI为1.33。
2.3 枸橼酸钠抗凝血的PT结果为y,EDTA抗凝血的PT结果为x,结果见表1。经线性回归统计,两者间PT线性方程为y=0.86x-2.8,R2=0.97, PT结果相关性好,经配对t检验,t=-29.8,P=0.0<0.05, 差异有显着性。
2.4 枸橼酸钠抗凝血的INR结果为y,EDTA抗凝血的INR结果为x,结果见表1。经线性回归统计,两者间INR线性方程为y=0.95x+0.03,R2=0.98, INR结果相关性好,经配对t检验,t=0.699,P=0.492>0.05,差异无显着性。表1 枸橼酸钠与EDTA抗凝血的PT、INR检测结果
3 讨 论
3.1 研究发现PT、INR结果间是有相关性的,在临床上使用EDTA抗凝管检测PT是可行的。但同时也发现,PT结果间差异有显着性,两种抗凝方式下PT的生物参考区间是不同的,所以要建立EDTA抗凝下PT的参考区间。INR结果间差异无显着性,因为我们重新计算了EDTA抗凝下的MNPT,从上述结果可见,EDTA抗凝下的MNPT比枸橼酸钠抗凝下MNPT要长,通过PT/MNPT在一定程度上消减了EDTA抗凝下PT的延长,INR结果有良好的相关性。因此我们可以报告INR结果或者通过公式换算PT结果y=0.86x-2.8。
3.2 PT结果间的差异主要是因为标本的稀释不同造成的,因为枸橼酸钠抗凝管中存在0.3 ml抗凝剂,血液:抗凝剂=9:1,而EDTA管中抗凝剂是固体粉末,加入血液后几乎不对血液稀释,因而抽取血液量的多少十分关键,这也是分析前质量控制的一个环节。
3.3 使用EDTA抗凝血的优势在于抗凝管可与血液学分析使用同一管血液,血样进行完血液学分析后可分离血浆,用于凝血项目检测,便于检验科仪器自动化的建立。使用一管血液不仅节省抗凝管,而且病人没有必要抽取更多管血液,也便于医疗废弃物的处理,不会因为血量的多少造成稀释不同而影响结果。
3.4 本文使用经过计算的EDTA抗凝下的Local ISI,与枸橼酸钠抗凝下的Local ISI是不一样的,因为现阶段没有EDTA抗凝下的INR定值血浆存在,以后若有INR定值血浆来校准ISI会使得EDTA抗凝的使用更方便,更有市场。
【参考文献】
[1] 徐爱丽,毛庆民,张乐研.标本采集量对PT、APTT检测结果的影响[J].临床军医杂志,2007,35(6):913.
[2] 倪赞明,徐明光,王晓明,等.凝血酶原时间ISI/INR系统测定中的一些问题及改进意见[J]检验医学,2006,21(5):492�495.
[3] 许蕾,王学锋,李泳,等.血浆凝血酶原时间测定中建立仪器区域国际敏感指数的实验控讨[J]检验医学,2004,19(5):441�443.
‘捌’ 如何制备血清和血浆
血清和血浆均是不含细胞(包括血小板)等有形成分的血液液体部分,其主要区别是血清不含凝血因子和血小板,血浆则含有凝血因子,它们的制备方法如下:
1、血清的制备:获得的血液不能抗凝,盛于离心管或可以离心的器皿中,静置或置37℃环境中促其凝固,待血液凝固后,将其平衡后离心(一般为3000rpm,离心 5~10min),得到的上清液即为血清,可小心将上清吸出(注意切勿吸出细胞成分),分装备用。
2、血浆制备:在盛血的容器中先加人一定比例的抗凝剂(抗凝剂:血液 = 1:9,将血液加到一定量后颠倒混匀,离心(离心条件同上)后所得的上清液即为血浆。初用者最好将上清移至另一清洁容器,吸出血浆时用毛细吸管贴着液面逐渐往下吸,切忌不能吸起细胞成分。
3、富含血小板血浆制备:将获得的血液经800rpm,离心5min,其上清即为富含血小板血浆。

(8)如何制成不同抗凝比例的标本方法扩展阅读:
鉴别方法
1、血清
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。
而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
2、血浆
血浆是血液的液体成分,血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆,约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%),其中溶解的物质主要是血浆蛋白,还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞,同时也是运输分泌产物的主要媒介。
将新鲜血液离心,使血细胞沉降,上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。
参考资料来源:网络-血清
‘玖’ 交叉配血两个标本抗凝集可以不一样吗
可以治两个标准抗炎及必须是一样的不可以