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电泳图的分析方法

发布时间:2022-06-07 21:41:34

㈠ 半定量RT-PCR电泳图如何分析

半定量RT-PCR参照的做法一般有两种:

1) 将要比较的两个样品的BETA-ACTIN 调成一样的亮度,然后就可以直接比较目的基因的亮度了。方法的结果比较直观,但较费事。
2) 不进行调平,一个样品里将目的基因和BETA-ACTIN直接比较,用软件就可以做到,然后将不同样品的这个比值进行比较就可以了。方法比较简单,但结果不够直观。
1.每个标本都要做自己的内参,不能用同一个内参!
2.每个标本在实际做前都要摸最佳循环数,包括内参,但内参的循环数不一定要和目的基因一样,都要选择上升期的中间数作为最佳循环数,否则进入平台期就没有可比性了!所以内参要有它自己的最佳循环数!
3.电泳扫描后,计算灰度值,先用同一标本的内参和目的进行比较,然后用这个相对值再去和其他你所要比较的平行组进行比较,一般每组4个样本以上。这样就可以知道各组之间的差别了!

㈡ 如何分析SDS-PAGE电泳图扫描后图上蛋白条带的量

SDS-PAGE检测蛋白是一种定性的检测方法,图上蛋白条带不能做到精确定量。
一般只能通过一些对照样品来比较分析图上蛋白条带的量。
比如用已知蛋白量的样品(BSA)和需检测的蛋白样品跑在附近的泳道,通过对比染色后样品的大小,颜色,深浅来估计出需检测蛋白样品的量。

㈢ 做PCR扩增,电泳图该怎么分析啊

1. 首先需要的是marker,即有既定片段长度的DNA片段。
2. 看胶,里点样孔越近的DNA片段长度越大,离点样孔远的DNA片段长度小。

以你的图片看,5.6两个孔的片段比前边4个孔的片段短,如果你知道前边4个孔的片段长度,可以估计一下。
条带上方的模糊的一片应该是引物二聚体来的。做连接或者其他操作前用PCR产物回收试剂盒回收一下,就可以去掉引物二聚体了。

㈣ pcr扩增产物的凝胶电泳图怎么分析

通过凝胶成像系统拍摄图片,注意调整对比度。如果是写报告的话,可以标记出marker各条带的分子量以及亮度,详见说明书;

然后说明扩增片段与目的片段大小相同,均为xx;如果图像上有杂带可以分析一下,比如可能是引物二聚体之类的情况,以便下次实验可以酌量调整退火温度或者各成分的用量。

(4)电泳图的分析方法扩展阅读:

电源电压

在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长。

片段越大,因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大,因此电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段有效分离所加电压不得超过5V/cm。

嵌入染料的存在

荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状DNA迁移率降低15%。

离子强度影响

电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。

㈤ 电泳图蛋白质的怎么看

电泳图蛋白质这样看。




1、直接将带条带的凝胶放在凝胶呈像系统中进行定量分析。

2、将所需要的条带剪切下来,用X体积蒸馏水溶解,通过紫外分光光度计在280纳米条件下,测定吸光度值。根据仪器目前标准曲线计算蛋白质浓度,与蒸馏水体积相乘,得到蛋白质质量。

3、如果样品中含有荧光成分,可以进行荧光分析。


电泳图谱(electrophoregram)是通过电泳将一个混合物样品(如血清)在支持介质上分成区带。但须将电泳条经过染色,使区带显示出来而得电泳图谱。还可以进一步在光密度计上进行扫描而获得记录图谱。

带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象,称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同,对混合物各组份进行分离、纯化和测定的技术称为电泳技术。

可分离的样品即可以是大分子的蛋白质、多糖、核酸,也可以是小分子的氨基酸,核苷等。

电泳方式差别很大.但基本原理是一致的,即:待分离样品中各种分子在同一pH下带电性质和带电量以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子在电场中产生不同的迁移速度,从而实现对样品分离、鉴定或提纯。

㈥ 【急!】如何分析电泳图【有例子】【大谢啊!!!】

首先先说明一点,我水平很有限的。谢谢了
1.质粒是环状的,拥有高级结构,而且不同的高级结构在相同条件电泳时拥有不同的迁移率(超螺旋>线性>开环),我不知道你的mark是什么?所以也不好说。
2.①很多原因造成切开的质粒粘性末端又重新粘接起来
②众多原因造成质粒根本就没切开
③比I慢一点,可能质粒被切成线性或者开环的了
3.被切成了两条,就这样

㈦ 如何分析PCR扩增后的电泳图

在电泳的时候加上DNA的分子量marker,一般16S的大小都是1.5 kb吧(很久不做了,记不太清楚)。如果有明显的目的条带而且大小也合适的话那就一般不会错,如果想要确定,可以将条带从胶中切下来,回收之后送去测序,就可以知道序列的详细信息了。

另外你的目的如果只是判断DNA的提取是否成功的话,那么在提取DNA之后直接跑电泳就可以了,没有必要做PCR扩增16S。一般细菌基因组都在15~16k大小左右。

㈧ 如何分析细菌基因组电泳图

如何分析细菌基因组电泳图
质粒DNA电泳会有三条带,最远的是线形DNA(lDNA):质粒的两条链均断裂;线性分子;中间的是开环DNA(ocDNA):质粒的一条链断裂;松弛的环状分子;共价闭合环状DNA(cccDNA):质粒的两条链没有断裂;超螺旋这是由于在质粒提取过程中,机械力、酸碱度、试剂等的原因,使质粒DNA链发生断裂.而质粒DNA相对于基因组DNA小很多,所以比较容易区分开基因组DNA电泳一般是1条带,虽然在你抽提过程中也会发生断裂,形成几十至几百kb的大片段.但是我们一般用1%的胶,无法区分不同大小的DNA,所以看起来像是一条带.如果配成0.6%的胶再加lamda
hindIII
marker,适当延长跑胶时间,就应该会出现几条带了

㈨ 怎么看蛋白质电泳分析结果图,以及它的原理是什么

双向电泳就是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合。
1.先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI分离开来。
2.然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小):将上一步的胶加上横向电场,同一PI中聚集的蛋白,由于分子量不同而分开。
经染色(一般是银染)得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

二维电泳使用于蛋白组学研究,对大批量蛋白筛选鉴定中存在很大优势,通过不同胶做对比,把不同处的胶割出来单独鉴定。
通过对尿蛋白电泳的蛋白条带的特征进行分析可以判断尿液中蛋白的分子大小,可以区分出低分子蛋白尿、中分子蛋白尿、高分子蛋白尿和混合型蛋白尿,为临床肾脏病的诊断提供帮助。如高分子蛋白尿,分子量范围在5万到100万,蛋白条带包括白蛋白及其以上蛋白条带,以白蛋白为主。低分子蛋白尿,分子量范围在1万到7万,蛋白条带在白蛋白和以下蛋白,以小分子蛋白质条带为主。

㈩ DNA电泳图结果分析

首先看第二泳道,能够看见两条带,一般的质粒跑完电泳都是这种情况,因为质粒容易开链,变成线性的,或者是半线性半环状,而环状的比线性的跑的快,所以上面那条浅的应该是开链的质粒,下面的是环状的质粒,不过不要紧,一般都是这样。看第三条泳带,说明你的目的条带大约在750bp。再看第四个泳带,靠近点样孔的是你切掉了目的基因的质粒,此时为线性的质粒,能够看见它比第二条泳道那条亮带跑的要慢一些,这是对的结果。还是因为环状的比线性的跑的快。而第四条泳带下面那个浅带,是你的目的基因,它与你PCR产物大小一样。因此说明了你的重组质粒构建成功,目的基因已经连入质粒了。恭喜你!第一次做就能做成这样,羡慕啊。

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