mrna定性或定量分析方法

A. RNA定量分析的方法有哪些

核酸总含量可用紫外吸收法和定磷法测定,用地衣酚显色法测定RNA含量,二苯胺显色法测定DNA含量。
如果样品较纯，直接用紫外吸收测定就行。
real-time RT-PCR需要设计引物......

B. 检测组织中某基因mrna定量的方法有哪些

所谓基因表达,就是从DNA到mRNA再到蛋白的一个过程,基因表达水平一般是通过该基因转录的mRNA的多少来衡量的.每个基因转录产生的mRNA的量,是受到时空等多种因素调控的,个体在不同的生长发育阶段,或者不同的组织水平,基因转录出mRNA的量都是不一样的.例如,当某种植物长期生长在高盐的环境里,该植物体内与抗盐相关的基因的表达量就会增加,以适应这种高盐环境,是植物能够生存下来,这时植物抗盐相关的基因表达水平就相对高,希望我的回答能够帮你弄清这个问题,

C. 蛋白定量分析

蛋白质的定量定主要有直接紫外吸收法、Bradford法和Lorry法三种。

蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，所以任何一个蛋白质都具有280nm附近的紫外吸收峰，在此波长范围内，蛋白质溶液的光密度OD280nm与其浓度呈正比关系。

改良的Bradford法，蛋白质与染料考马斯亮蓝G-250结合，在一定的线性范围内，反应液595nm处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比，测定595nm处吸光度的增加即可进行蛋白定量。

Lorry法。蛋白质与碱性铜溶液中的Cu2+络和使得肽键伸展，从而使暴露出的酪氨酸和色氨酸在碱性铜条件下与福林试剂反应，产生蓝色，在一定浓度范围内，其颜色的深浅与蛋白质中的酪氨酸和色氨酸的含量成正比，由于各种蛋白质中的酪氨酸和色氨酸的含量各不相同，因此在测定时需使用同种蛋白质作标准。

总RNA和DNA都可以用紫外分光光度计在260nm和280nm处测定吸光度值进行浓度换算，dsDNA换算系数为50,RNA为40,oligoDNA20,ssDNA约为37.此外260nm/280nm的比值还可以反映出RNA和DNA的纯度。RNA比值应在2.0而DNA在1.8左右

mRNA的定量需要借助其他生物方法,现在最常用的就是qPCR,就是定量PCR.其中有最常用的是real-time PCR 这种方法可以相对定量或者绝对定量出mRNA的表达水平.

D. 目的mRNA如何检测

先提取RNA，反转录成cDNA，然后根据目的基因设计PCR引物，通过半定量RT-PCR确定目的基因表达。

正因为检测的是mRNA，所以要先反转录成cDNA才能PCR。

E. 预对某个基因的表达（RNA和Pr水平）进行定性和定量分析，可采用的技术路线和主要实验方法

检测mRNA表达水平可以做RT-PCR或者northern-blot，定量分析可以做real time PCR。
检测蛋白表达水平可以用western-blot，定量分析可以做流式细胞分析。

F. 检测细胞中mRNA水平的方法有哪些

如果检测一个或者少数mRNA的话，可以提取总RNA之后反转录，用荧光定量pcr检测其表达量。如果需要检测大量基因的表达的话，用基因芯片或者转录组测序会比较好

G. 通过什么方法检测mrna和蛋白质的稳定性

实时荧光定量PCR检测mRNA的表达，然后westernblot检测蛋白表达量。

H. 定量分析与定性分析方法

常用的定量分析方法，包括回归分析、时间序列分析、决策分析、优化分析、投入产出分析等方法。

常用的定性分析方法，包括归纳分析法、演绎分析法、比较分析法、结构分析法等分析方法。

德尔菲法，是采用背对背的通信方式征询专家小组成员的预测意见，经过几轮征询，使专家小组的预测意见趋于集中，最后做出符合市场未来发挥在那趋势的预测结论。德尔菲法又名专家意见法，是依据系统的程序，采用匿名发表意见的方式，即团队成员之间不得互相讨论，不发生横向联系，只能与调查人员发生关系，以反复的填写问卷，以集结问卷填写人的共识及搜集各方意见，可用来构造团队沟通流程，应对复杂任务难题的管理技术。

德尔菲法的具体实施步骤如下：

（1）组德尔菲法 成专家小组。按照课题所需要的知识范围，确定专家。专家人数的多少，可根据预测课题的大小和涉及面的宽窄而定，一般不超过20人。

（2）向所有专家提出所要预测的问题及有关要求，并附上有关这个问题的所有背景材料，同时请专家提出还需要什么材料。然后，由专家做书面答复。

（3）各个专家根据他们所收到的材料，提出自己的预测意见，并说明自己是怎样利用这些材料并提出预测值的。

（4）将各位专家第一次判断意见汇总，列成图表，进行对比，再分发给各位专家，让专家比较自己同他人的不同意见，修改自己的意见和判断。也可以把各位专家的意见加以整理，或请身份更高的其他专家加以评论，然后把这些意见再分送给各位专家，以便他们参考后修改自己的意见。

I. 想测试一个基因的MRNA表达量，用什么方法最好如果是原位杂交和免疫组化是不是定量不准那RT-PCR呢

对于基因蛋白表达的定量一般不会用到原位杂交和免疫组化，这两个方法的优点是更加直观，但定量困难，适合用作定性实验。个人认为定量实验检测最好用RT-PCR进行核酸层面的检测，或者用免疫学方法直接检测蛋白量，比如ELISA等；蛋白电泳（包括2D）可以进行半定量的实验。另外定量实验要注意的是选择合适的内参，电泳要注意平衡好上样量。

J. 定量研究和定性研究的方法是什么

一、定量研究设计的主要方法有调查法、相关法和实验法。

1、调查法

调查法是一种古老的研究方法，是指为了达到设想的目的，制定某一计划全面或比较全面地收集研究对象的某一方面情况的各种材料，并作出分析、综合，得到某一结论的研究方法。

2、相关法

相关法是指经由使用相关系数而探求变量间关系的研究方法。相关研究的主要目的，是在确定变量之间关系的程度与方向。变量关系的程度，有完全相关、高相关、中等相关、低相关或零相关等；而变量关系的方向有正相关和负相关等。

3、实验法

实验法是指操纵一个或一个以上的变量，并且控制研究环境，借此衡量自变量与因变量间的因果关系的研究方法。实验法有两种，一种是自然实验法，另一种是实验室实验法。

二、定性研究的主要方法包括： 与几个人面谈的小组访问，要求详细回答的深度访问，以及各种投影技术等。

定量研究与定性研究的区别

1、着眼点不同

定量研究着重事物量的方面；定性研究着重事物质的方面。

2、在研究中所处的层次不同

定量研究是为了更准确地定性。

3、依据不同

定量研究依据的主要是调查得到的现实资料数据，定性研究的依据则是大量历史事实和生活经验材料。

4、手段不同

定量研究主要运用经验测量、统计分析和建立模型等方法；定性研究则主要运用逻辑推理、历史比较等方法。

5、学科基础不同

定量研究是以概率论、社会统计学等为基础，而定性研究则以逻辑学、历史学为基础。

6、结论表述形式不同

定量研究主要以数据、模式、图形等来表达；定性研究结论多以文字描述为主。定性研究是定量研究的基础，是它的指南，但只有同时运用定量研究，才能在精确定量的根据下准确定性。