『壹』 怎麼判斷發酵過程的染菌是由哪種微生物引起的
發酵染菌原因分析
第一部分：基礎知識
1）雜菌的類型
空氣中的微生物大多數是細菌和芽孢,還有一定數量的黴菌、酵母和病毒。細菌的大小有零點幾微米至幾個微米,見表5-3。
根據以上特點我們應得出如下結論：
A：這些微生物在空氣中極少單獨游離存在,基本上是附著於灰塵、液滴等微粒的表面上。 B：介質過濾除菌就是把空氣中的各種微粒和極少量的游離微生物捕集起來予以除掉。 因此我們通常所用的空氣過濾器為什麼0.3u可以保證無菌發酵生產的原因。 2）無菌檢查與染菌的處理
在抗生素生產過程中,為了及早發現染菌並進行恰當處理,保證生產正常進行,對菌種制備、種子罐、發酵罐的接種前後和培養過程中,須要按工藝規程要求按時取樣，進行無菌檢驗。 A：無菌檢查
培養液是否污染雜菌可從三個方面進行分析：
a:無菌試驗
b:培養液的顯微鏡拉查 c:培養液的生化指標變化情況。 其中無菌試驗是判斷染菌的主要依據。
無菌試驗
現在採用的無菌試驗方法有肉湯培養法、雙碟培養法、斜面培養法。其中以酚紅肉湯培養法和雙碟培養法結合起來進行無菌檢查用的較多。
(1)肉湯培養法 直接用裝有酚紅肉湯的無菌試管取樣,然後放入37℃恆溫室(箱)內培養。定時觀察試管內肉湯培養基的顏色變化,同時進行顯微鏡觀察。
（2）斜面培養法 先用空白無菌試管取樣,然後在無菌條件下接種於斜面培養基上,置於37℃恆溫室(箱)內培養。定時觀察有無雜菌菌落生長。。
（3）雙碟培養法 種子罐樣品先取入肉湯培養基中,然後在無茵條件下在雙碟培養基上面劃線,剩下的肉湯培養物在恆溫室(箱)內培養6小時後復劃線一次,發酵罐培養液直接取入空白無菌試管中,於37℃下培養6小時後在雙碟培養基上劃線。24小時內的雙碟定時在燈光下檢查有無雜菌生長。24小時~48小時的雙碟1天檢查一次,以防生長緩慢的雜菌漏檢。正常生產過程中,種子罐和發酵罐每隔8小時取樣一次,進行無菌檢查。該方法經常用於單菌落挑選，可以從染有雜菌的培養液中經多次劃線挑取單菌落進行分離培養，得到純種的種子。
『貳』 醫療器械的無菌檢查法
無菌檢查是不能用固體培養基的，要用硫乙醇酸鹽流體培養基和改良馬丁液體培養基，最好用薄膜過濾法。
請參考國標：
GB/T14233.2-2005