㈠ 測細胞因子含量常用的 elisa 方法為
有一個朋友來找我咨詢用流式檢測細胞因子的問題，他之前用ELISA 檢測細胞因子的話，發現樣本量需求很多，然而有些樣本量又比較少怎麼辦呢，那麼接下來我來對比幾種檢測細胞因子的優缺點，供各位大大們閱讀參考啦~
細胞因子（cytokine，CK）：是由免疫細胞（如單核、巨噬細胞、T細胞、B細胞、NK細胞等）和某些非免疫細胞（內皮細胞、表皮細胞、纖維母細胞等）經刺激而合成（一般是免疫細胞）、分泌的一類生物活性物質分泌的蛋白質，在體內廣泛參與免疫調節及炎症反應、組織修復、刺激造血系統、刺激細胞的增殖與凋亡等重要生理活動，在抵抗外來病原及維持機體內環境平衡中均起重要作用。
細胞因子的作用方式：自分泌作用、旁分泌作用、內分泌作用。
細胞因子的作用特點：多效性、重疊性、協同性、拮抗性和雙重性。
根據產生細胞因子的細胞種類不同分類：白細胞介素（interleukin, IL)、干擾素（interferon, IFN)、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF)、轉化生長因子-β家族（transforming growth factor-β family, TGF-β family)、集落刺激因子（colony stimulating factor, CSF)、趨化因子（chemokinefamily)、生長因子（growth factor,GF）等。
細胞因子的檢測方法一般分為生物學、分子生物學測定法及免疫學（重點介紹）
1、生物學測定法 其原理是根據細胞因子對特定的依賴性細胞株(即靶細胞)的促增殖作用,以增殖細胞中的DNA的合成或酶活性為指標,間接推算出細胞因子的活性單位,如對IL-1、IL-2等細胞因子活性的檢測。亦可根據某些細胞因子對特定靶細胞的殺傷效應或對病毒的抑製作用進行測定,如對腫瘤壞死因子及干擾素的生物活性測定。
2、分子生物學測定法 目前採用的技術有各種印跡法、斑點雜交、原位雜交和PCR等。通過檢測細胞內細胞因子的基因組成或mRNA量,推算出細胞因子的合成量。
3、免疫學檢測法 其基本原理是將細胞因子作為抗原進行定量檢測。如免疫斑點法、ELISA法、免疫印跡法和流式細胞儀等均已用於細胞因子的檢測。
細胞因子的檢測方法對比
1、酶聯免疫吸附實驗（ELISA）
原理：使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。由於酶的催化頻率很高，故可放大反應效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。
優點：避免特異性抗體直接標記，便宜。
缺點：所需樣本量多、每次僅能測定一項細胞因子、操作步驟和測定時間過長、酶聯反應所致的人工假象
2、流式細胞儀（CBA）
原理：利用微小、分散的顆粒捕獲液體待測物，並利用流式細胞儀檢測類似「三明治」的顆粒——待測物復合體所散發的熒光，從而測定待測物的數量。
優點：所需樣本量少、快速（實驗6-8h可以完成）操作簡便、靈敏度高、重復性好、高效（同一個樣品可以同時檢測多個因子）、安全、接近生物體的分析條件（全血檢測保留細胞及生化微環境更准確反應了體內狀況）。
㈡ 細胞因子檢測可以用哪些方法，簡述其原理
細胞因子主要是指由內分泌細胞分泌的一類可以參與免疫應答的蛋白多肽。對於細胞因子的檢測方法主要有三種：細胞生物學檢測、免疫學檢測和分子生物學檢測。細胞因子的發現依賴於其生物學活性，因此，建立了生物分析法用於細胞因子的檢測。隨後，用於檢測實驗溶液(如組織培養上清液)中細胞因子的免疫分析法被建立，並不斷用於實驗室研究。但准確地、可重復地測定細胞因子具有一定困難，主要原因是眾所周知的細胞因子的含量極低(大部分都是以pmol/L計)，同時存在著源於異嗜性抗體，類風濕因子以及特異的和非特異的細胞因子結合蛋白等[1，2] 的顯著干擾。
㈢ 細胞內細胞因子的流式細胞怎樣檢測
胞內流式分析法是用抗細胞因子抗體與細胞表面或胞內特定亞群標志組合，即可檢測不同細胞亞群細胞因子的分泌，同時採用特殊的化學與抗體選擇，確保靜止與無細胞因子分泌細胞的最小熒光背景。具有其它方法難以比擬的優點： 快速：流式定量檢測細胞內細胞因子可在一天內完成，實驗流程需6-8小時，實際操作時間為1-2小時，快速簡便; 簡便：無需組織培養，可以全血分析，無需分離PBMCs; 靈敏度高：高度靈敏的熒游標記與檢測系統; 高效：可以在同一個細胞內同時檢測兩種或更多種細胞因子，也可根據細胞免疫表型區分分泌細胞因子的細胞的亞型，進行多參數相關分析; 安全：減少樣本處理與生物源性污染 接近生物體的分析條件：全血檢測保留細胞及生化微環境更准確反映了體內狀況。 生物幫上面有這方面的詳細內容，SDS提取法 http://www.bio1000.com/experiment/hesuan/241857.html
㈣ 常用的細胞因子檢測方法有哪些
（1）生物學檢測法：又稱生物活性檢測，是根據細胞因子特定的生物活性而設計的檢測法。生物活性檢測法又可分為： 1、細胞增殖法； 2、靶細胞殺傷法； 3、細胞因子誘導的產物分析法； 4、細胞病變抑製法。
（2）免疫學檢測法：細胞因子均為蛋白或多肽，具有較強的抗原性，可利用抗原抗體特異性反應的特性，用免疫學技術定量檢測細胞因子，常用的方法包括ELlSA、RlA及免疫印跡法
（3）分子生物學方法：目前公認的細胞因子的基因均已克隆化，較容易地得到某一細胞因子cDNA探針或根據已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。常使用斑點雜交、Northernblot、逆轉錄PCR，細胞或組織原位雜交等。具有靈敏、快速等優點，甚至從l～10個細胞中就可檢出其中的特異mRNA