食用菌土方法灭菌

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B. 食用菌制种技术的灭菌与消毒

各种微生物都由蛋白质组成，加热灭菌可以使蛋白质凝固从而达到杀死微生物的目的。加热灭菌经济有效，简便易行，可分为干热灭菌和湿热灭菌两种。 1、火焰灭菌是直接利用火焰反微生物杀死的方法，它中适用于金属制的工具，玻璃器皿口等物品的灭菌。
2、干热灭菌是利用热空气进行灭菌的方法。灭菌温度140℃—160℃，时间2—3h，它只适用于金属及玻璃器皿的灭菌。电热干燥箱是干热灭菌常用的设备。 1、高压蒸汽灭菌 利用高温高压蒸汽灭菌，是一种最有效、使用最广泛的灭菌方法。蒸汽压力与温度成正比。高压灭菌所采用的蒸汽压力与时间，应根据具体物质而定。
高压灭菌锅的形成与规格较多，有立式、卧式、手提式，能源用电、蒸汽、煤等。
使用高压蒸汽灭菌锅应注意以下几点：
①灭菌锅内的冷空气必须排尽；②灭菌锅内的基质排列一定要稀疏些。使蒸汽流运畅通；③灭菌时升压和降压要缓慢；④灭菌过程应注意保持棉塞干燥。
2、常压蒸汽灭菌法 这是利用自然压力的蒸汽灭菌的方法。可用土蒸锅，蒸茏等灭菌。由于常压，温度较高压的低得多，故灭菌时间要长。其优点是结构简单、成本低、便于自制，适宜于家庭制种。 1、低温消毒法（巴氏消毒法）一些不耐高温的食品，如牛奶、果子酒、酱油等，需要低温消毒，加热到60℃维持30min，即可杀死食品中的病原菌及多数细菌营养体。
蘑菇培养料的后发酵，就是采用巴氏消毒法，杀死有害于蘑菇的病虫杂菌。
2、沸水消毒法 主要用于针筒等器材的消毒，将有关的器材置沸水中烧煮一定时间，以杀死微生物的营养体。
3、化学药剂消毒法 这是利用化学药剂进行杀菌的方法。杀菌剂的种类及使用浓度：
①重金属盐类：所有的重金属盐类对微生物都有素害作用，如硝酸银、氯化汞等。
②氧化剂：常用的氧化剂有高锰酸钾、过氧化氢、漂白粉、漂白精等，常用的高锰酸钾溶液浓度是0.1%，氯气自来水清洁剂浓度为1ppm，漂白精浓度为400ppm。
③、有机化合物：甲醛（福尔马林）5%甲醛溶液用于种子表面消毒，原液可用于接种箱、培养室、栽培室等空间消毒，熏蒸用量6—10ml/cm3。
新洁尔灭：0.25%新洁尔灭溶液可用作皮肤、种子消毒。
4、干燥消毒利用干燥使微生物失水，达到杀菌或抑菌的目的，称为干燥消毒。食物、药品等经过适当干燥，便可长时间保存，蘑菇干片即是。
5、渗透压消毒利用高渗透压杀菌或抑菌的方法称渗透压消毒。在高渗溶液中，微生物细胞由于脱水，质壁分离，不能正常进行新陈代谢而死亡，盐水蘑菇就是利用这一原理制成。

C. 食用菌的种植方法

一、菌种制作的基本设备
1、食用菌菌种制作的工艺流程
培养料的贮备和预处理——容器、工具的洗涤——配料、培养基制作——灭菌——冷却——接种——培养——贮存
2、基本设施
① 厂房：② 原料库：③原料预处理场地：④ 洗涤室：⑤配料室：⑥ 灭菌室：⑦ 接种室：⑧ 化验室：⑨ 培养室：⑩贮存室
二、纯种分离
菌种的分离方法主要有：孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中和此菌丝分离法。
1、孢子分离法
属有性繁殖。对于香菇、平菇异宗结合的菇类，为避免产生单孢不孕现象，必须采用多孢分离法。单孢分离法主要用于杂交育种的研究。
（1）种菇的选择和处理
种菇选择的标准：必须纯正，具有本菌株性状，发育健壮，无病虫害，成熟度适当。种菇选定后，首先除去附着在菇体表面的杂物，如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分钟，然后用无菌水漂洗3次，以洗除表面附着的药物，最后用无菌纱布吸干水分。香菇、平菇可用75%酒精进行表面消毒。
（2）多孢分离法
① 整菇播种法：② 钩悬法：③ 贴附法：④ 菌褶上抹取孢子法：⑤ 孢子印分离法：⑥ 空中孢子捕捉法
（3）单孢子分离法
一般采用方法：平板划线法、连续稀释法、毛细管法等。
2、组织分离法
（1）子实体分离法：
（2）菌核分离法：
（3）菌索分离法：对一些不易找到子实体及菌核的菌类
3、基内菌丝分离法
对于子实体只有在特定的季节下出现，平时不易采到，或子实体小而薄或呈胶质状态：
（1）菇木（或耳木）分离法
在食用菌繁殖旺盛期：
（2）代料基质分离法
分离前，选择一批子实体发生早、产量高、菇体尚幼嫩且生活力强而无病虫害的栽培袋，待子实体将近成熟时，去掉子实体，然后用75%酒精将培养袋进行消毒后，在培养料下1.5cm处挑取0.3cm的培养料小方块组织，接入试管培养基的中央，置于恒温下培养。
三、制种技术
采用孢子分离、组织分离和基内菌丝分离等方法分离培养而获得的纯菌丝，经过原种的扩大培养和母种、栽培种的制作，即可作为食用菌生产用的菌种。
1、菌种的类型
母种、原种、生产种
2、培养基的种类
天然培养基、合成培养基、半合成培养基
3、原种制作
从担孢子或菇体组织直接分离培养获得的原种或引进的原种
4、母种及生产种制作
将原种菌丝体移植到由粪、草、木屑、棉籽壳或麦粒等原料配制成的培养基上，而制成的菌种称母种。将母种再扩大繁殖制成的菌种，称栽培种或生产种。
5、培养基灭菌
（1）高压蒸汽灭菌法
琼脂培养基采用1.05kg/cm² 压力，温度121℃，灭菌45-60分钟；母种和栽培种固体培养基采用1.2-1.5kg/cm² 压力，温度123-129℃，灭菌1-1.5小时。
（2）常压蒸汽灭菌
6、接种室消毒灭菌
熏蒸消毒法：甲醛与高锰酸钾混合熏蒸法
（2）紫外线消毒：
（3）石碳酸灭菌
7、接种
在无菌条件下，将原种或母种菌种移接到经过严格灭菌的培养基上，称为接种。
8、菌种培养
（1）原种培养
接种后的试管原种，置于25℃左右的恒温箱中培养，经过2-3天即可检查生长情况，纯洁菌种经过7-15天的培养，原种菌丝即可长满斜面培养基。
（2）母种及栽培种培养
栽培种接种后置于25℃左右的培养室内培养。当菌种瓶中菌丝体伸入培养基的1/3时，培养室内的温度可降低2-3℃，以避免菌丝生长代谢加强，料温上升而引起高温障碍。培养室内保持60-70%的空气相对湿度。一般经过20-40天的培养