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抗血清的鉴定方法有哪些怎么保存

发布时间:2022-02-09 09:26:25

Ⅰ 简述抗血清制备程序或制备方法有哪些

A.特异性免疫、抗原;

特异性免疫即非体内原有的,由抗原引发产生抗体的免疫。蛇毒是用来引起免疫反应,所以是抗原。

Ⅱ 外单位送来一个细菌培养物要求鉴定,你如何将其鉴定到种鉴定到血清型用什么方法

可以用稀释涂布平板法鉴定

Ⅲ 你好,我们想长期保存抗血清至少一年,看到你说使用过很多防腐剂,能否请教你使用的种类和用量

对不起我不会

Ⅳ 如何鉴定血清的质量

博凌科为生物科技-为你解答:血清质量的鉴定一般包括以下几个方面: ●理化性质:如渗透压、pH值、蛋白电泳图谱、蛋白含量、激素水平、内毒素等。蛋白含量包括血清总蛋白含量(不低于35-45g/L)、球蛋白含量(应小于20g/L)、血红蛋白含量等。其中球蛋白含量是一 项非常重要的指标,血清中球蛋白主要是抗体,球蛋白含量越低血清质量越高。血红蛋白也是越低越好。 ●微生物检测:包括细菌、真菌、支原体、病毒等。特别是对支原体、病毒的检测,支原体是一种很小的微生物,可通过孔径22u的滤膜。支原体、病毒污染在光 学显微镜下难于察觉,细胞也能生长繁殖,但会影响实验结果。检测支原体的方法很多,如培养法、PCR法、荧光染色法、电镜观察法等。 ●促生长效果:这是血清重要的特性之一,应当以培养的细胞来检测。有两种方法:克隆形成率、贴瓶 率测定法和连续传代培养法。 (1)克隆形成率测定:一般以悬浮生长的细胞为培养对象,按有限稀释法做克隆化培养,将不同批号的血清配制成不同浓度的培养基,细胞也稀释成不同浓度,接种到96孔板,每孔200ul,培养一定时间,统计有克 隆生长的孔,计算出百分比,再与对照的标准血清相比较,就可看出不同批号血清间的区别。比较低的浓度,更能观察出血清质量间的细微差别。 (2) 贴瓶率测定:是以贴壁细胞为培养对象,将细胞稀释至低密度,接种至平皿,每皿200或100个细胞,以不同浓度的血清培养基培养,培养一定时间后弃培养基,染色后统计集落数,计算出集落数占接种细胞数的百分比,同样再与标准血清比较,判断血清质量高低。 (3)连续传代培养法:是将细胞培养于 3个一定体积的培养瓶中,待测血清配制为5%浓度,一般于第七天收集细胞,计数,取平均值,中间可以更换一次培养基。连续测试三个周期以上, 观察细胞生长状况,并将每次的计数结果与标准血清的测试结果比较。 ●对于使用者,判断血清质量先从外观入手。好的血清应该是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊、不透明、含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若血清呈棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,取材时有溶血现象;如果摇晃时感觉液体稀薄,说明血清中掺入的生理盐水太多。如果要进一步了解血清的质量,则应连续培养某些细胞,观察细胞生长状况。

Ⅳ 猪病常用的血清学诊断方法有哪些

抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应,这种反应称为抗原抗体反应,习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应,体外的抗原抗体反应称为血清学反应,因为抗体主要存在于血清中。

血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原,也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理,设计了许多血清学诊断方法,不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物,或其抗原性成分,而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时,可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统,使其变为可见或可测状态。

目前已知的血清学诊断方法很多,现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法:

(1)凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种:

①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原(经分离培养后)的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原(丹毒杆菌的纯培养液)测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下:

a.材料猪丹毒凝集抗原,玻片,9号针头,酒精棉球,酒精灯,铂耳(取血环)等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴,置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头,铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉,以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合,在2~3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集,为阳性反应。否则为阴性。

②试管凝集试验是一种定量法,用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价,可做临床的辅助诊断,或用于流行病学监测。在猪场中,本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。

A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原(1∶20倍稀释),布氏杆菌病阳性血清、阴性血清(1∶25倍稀释),稀释液(0.5 %石炭酸生理盐水),灭菌小试管,1毫升吸管,试管架,待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上,设阳性和阴性血清及抗原对照各1支,测定管4支,以后每增加1个样品,只需增加4支测定管。

按表10示意稀释血清,加抗原,完成后每支试管内应含1毫升液体。

Ⅵ 实验室中抗血清制备后,抗体特异性鉴定最常采用的方法是

正确答案:B
解析:单向免疫扩散常用于待测抗原的定量测定;亲和层析和免疫吸附是分离纯化的方法;可以用特异性抗原与制备的抗血清进行双向免疫扩散试验来鉴定抗血清的特异性

Ⅶ 牛血清白蛋白的提取和鉴定方法(设计性实验报告)

牛血清白蛋白的提取操作步骤:

1、盐析取离心管一支加入牛血清2mL、加入等量PBS(磷酸盐缓冲生理盐水)稀释血清,摇匀后,逐滴加入pH7.2饱和硫酸铵溶液2mL,边加边摇,充分混匀,然后静止放臵10分钟,再离心(2000r/min)10min,将上清液倾入试管中。

2、取干净的比色板,在各孔内滴加一滴纳氏试剂 

3、取玻璃纸一张,折成袋形,将离心后的上清液倒入袋内,用线扎紧上口(注意要留有空隙),用玻璃棒悬在盛有半杯蒸馏水的100mL烧杯内,使透析袋下半部侵入水中,对蛋白液进行透析,常用玻璃棒搅拌袋外(烧杯中)液体,以缩短透析时间。

4、每隔2分钟检查一次,更换蒸馏水多次,用纳氏试剂检查袋外液体的NH4+,观察颜色变化并记录,直至袋内盐分透析完毕。

5、将袋内液体倾入试管,即得牛血清白蛋白溶液。

牛血清白蛋白的鉴定方法:

1、点样取一张膜条,将薄膜无光泽面向下,放入培养皿中的巴比妥缓冲液中使膜条充分浸透,取出,用干净滤纸吸去多余的缓冲液,以薄膜的无光泽面距一端1.5㎝处做点样线,将牛血清样品与待测的牛血清白蛋白溶液分别用点样器在同一张薄膜的点样线处不同位置点样。标准液点一次,待测液点三次。

2、电泳将点样后的膜条致于电泳槽架上,放置时膜条无光泽面向下,点样端致于阴极,待平衡5min后,打开电源,调节电源,调节电泳仪的电压为160伏,通电60min,关闭电源后用镊子将模条取出。

3、 染色将膜条直接浸于盛有氨基黑10B的染色液中,染2分钟后取出,立即浸于漂洗液中,分别在漂洗液1、2、3中各漂洗5min,直至背景漂洗干净为止,用滤纸吸干薄膜。

4、鉴定比较样品和待测液中白蛋白在薄膜上的电泳结果,看位置是否一致。

(7)抗血清的鉴定方法有哪些怎么保存扩展阅读:

牛血清白蛋白

牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。

血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 Da,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。

Ⅷ 鉴定血清中维生素A的技术方法有哪些鉴定一份血清需要多少时间

5天

Ⅸ 血清 怎么邮寄!

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Ⅹ 什么是抗血清检测法

植物病毒是一种由核酸和蛋白质组成的抗原,当把经过纯化的某种已知病毒注射到脊椎动物体内后,就会产生一种相应的抗体。

抗体主要存在于血清中,含有抗体的血清称为抗血清。注射到动物体内的病毒不同,所产生的抗血清也不同。

抗原和抗体之间能发生高度专一性的免疫反应,借助这种反应,就可用已知病毒的抗血清鉴定未知病毒的种类。其方法之一是将待测植株的一滴汁液加到几种不同的抗血清中,在哪一种抗血清中出现沉淀,就证明该植株带有哪一种病毒。

这个过程在很短时间内即可完成。因此,病毒的抗血清鉴定法既灵敏又快捷,是目前常用的一种病毒检测方法

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